葡萄ssr標(biāo)記反應(yīng)體系建立及多樣性分析[任務(wù)書]

1、本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）任務(wù)書生物工程葡萄SSR標(biāo)記反應(yīng)體系建立及多樣性分析一、主要任務(wù)與目標(biāo)：本課題主要針對(duì)“鄞紅”葡萄SSR反應(yīng)體系進(jìn)行條件優(yōu)化并篩選出合適的引物，并應(yīng)用此最佳反應(yīng)體系對(duì)不同輻照處理后的“鄞紅”葡萄植株進(jìn)行分析鑒別，以期為今后進(jìn)一步研究提供基礎(chǔ)依據(jù)。二、主要內(nèi)容與基本要求：主要內(nèi)容：進(jìn)行葡萄SSR反應(yīng)體系的優(yōu)化，主要針對(duì)影響反應(yīng)的6個(gè)主要因素Mg2濃度、dNTP濃度、Taq酶濃度、引物濃度、模板DNA濃度、退火溫度等分別

2、設(shè)置梯度進(jìn)行比較試驗(yàn)；建立SSR反應(yīng)最佳體系后利用多個(gè)引物組合對(duì)所有材料進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，從中篩選出譜帶清晰、多態(tài)性好的引物組合。對(duì)不同輻照處理后的植株DNA采用最優(yōu)SSR體系反應(yīng)擴(kuò)增后的譜帶進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，統(tǒng)計(jì)出多態(tài)性帶和特異性條帶從而直觀地觀察不同輻照處理后各個(gè)“鄞紅”葡萄植株間是否具有差異性及各處理的差異性大小基本要求：建立葡萄SSR反應(yīng)最佳體系，分析經(jīng)輻照處理后“鄞紅”葡萄植株的差異性。三、計(jì)劃進(jìn)度：2010.11.1011.20：

3、“鄞紅”葡萄各材料的DNA提取2010.11.2012.20：PCR反應(yīng)體系梯度Mg2濃度、dNTP濃度、Taq酶濃度、引物濃度、模板DNA濃度、退火溫度設(shè)置并篩選合適的引物；2010.12.201.15：對(duì)不同處理后的植株進(jìn)行SSR擴(kuò)增反應(yīng)并應(yīng)用6%變性聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測(cè)分析。四、主要參考文獻(xiàn)：[1]郝宇，張淑靜，張世紅，梁海永葡萄品種資源的SSR鑒定及遺傳多樣性分析[J]河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)201033(1):5455[2]黨尉尉亞

4、輝張華平劉科.葡萄總DNA提取方法的比較研究[J].西北大學(xué)學(xué)報(bào)200333(5):572574[3]楊進(jìn).SSR標(biāo)記技術(shù)在植物遺傳多樣性研究上的應(yīng)用[J].農(nóng)業(yè)生物技術(shù)科學(xué)200622(7):9094[4]王勁松萬怡震張劍俠段朝輝.分子標(biāo)記及其在葡萄屬植物研究上的應(yīng)用[J].200120:7075[5]張淑靜楊敏生梁海永，王衛(wèi)政.葡萄SSR反應(yīng)體系的優(yōu)化[J].河北林果研究200823(3):281286[6]張淑靜.葡萄SSR反應(yīng)體