草魚生長激素和植酸酶的融合基因大量表達(dá)產(chǎn)物分析-論文答辯

1、內(nèi)容提綱,研究背景及意義,實(shí)驗(yàn)方法及步驟,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,討論,研究背景及意義,1.市場餌料添加劑污染嚴(yán)重且有富集作用，對人體有害。,研究背景及意義,2.草魚生長激素參與魚體生長代謝，能夠加速蛋白質(zhì)合成和脂類降解等生理功能。,研究背景及意義,3.植酸酶降低磷對環(huán)境的污染并消除植酸的抗?fàn)I養(yǎng)作用，同時(shí)改善動(dòng)物對蛋白質(zhì)和礦物質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)的利用率。,研究背景及意義,草魚生長激素和植酸酶的融合基因的融合蛋白,促生長 √

2、污染小 √高表達(dá) √大量提取 √,實(shí)驗(yàn)方法及步驟,,,,,,,,,,,,100ml,250ml,500ml,IPTG,恒溫振蕩培養(yǎng)箱,1.菌株培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)方法及步驟,2.蛋白樣品制備,,,,離心,超聲波破碎,離心,沉淀,上清,PBS,實(shí)驗(yàn)方法及步驟,3.SDS-PAGE電泳分析比較,4.蛋白純化,5.蛋白定量,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,,,,,,,,pET-28a,H17,

3、PHY,HAP,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,H17,PHY,HAP,,,,28KDa,52KDa,80KDa,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析,蛋白濃度H17 為1.55 mg/mL，PHY為 1.852 mg/mL，HAP 為1.414mg/mL，總共提取分別得到約H17 為7.75mg，PHY 為9.26mg，HAP 為7.07mg目的蛋白。,討論,重組蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)形式可分為三種：1.胞外分泌表達(dá)，2.周質(zhì)空間表達(dá)，3.胞內(nèi)表達(dá)，