dna邏輯門在癌癥診斷中的運(yùn)用

1、DNA邏輯門在癌細(xì)胞識別中的應(yīng)用,王鑫瑞,利用DNA探針識別癌細(xì)胞,將特定的，與癌細(xì)胞DNA特異性結(jié)合的DNA片段連接到被標(biāo)記（熒光，放射性同位素，酶等）的探針上，組成DNA分子探針。 將待測細(xì)胞DNA分離提取，然后加入DNA分子探針。由于DNA分子雜交遵循堿基互補(bǔ)配對原則，只有目標(biāo)DNA能與探針結(jié)合，從而帶有熒光信號。 分子雜交結(jié)束后將未配對的DNA單鏈洗脫。檢測余下樣品的熒光活性可知目標(biāo)DNA分子的有

2、無。,,,核酸探針識別識別癌細(xì)胞,細(xì)胞膜表面含有蛋白質(zhì)，脂類等物質(zhì)。一些膜蛋白為某一種或幾種細(xì)胞所獨有。細(xì)胞癌變后也會產(chǎn)生特有的蛋白質(zhì)，例如酪氨酸蛋白激酶7和免疫球蛋白重鏈μ。 核酸適配體是一類從隨機(jī)合成寡居核苷酸單鏈中篩選出來的，能特性性結(jié)合特定蛋白或其他小分子物質(zhì)的寡居核苷酸短鏈。（例如Sgc8c,Sgc4f,TD05等） 將能識別癌細(xì)胞產(chǎn)生蛋白質(zhì)的核酸適配體連接在探針上，在探針上連接信號源（熒光物質(zhì)

3、等）即可使含目標(biāo)蛋白的細(xì)胞被標(biāo)記。而將藥物分子連接在探針上則可以實現(xiàn)靶向給藥。 核酸適配體的優(yōu)勢在于核酸序列的多樣性。,,與DNA分子探針的方法類似，核酸適配體探針法的思路依然是將目標(biāo)底物特異性結(jié)合物質(zhì)，探針，信號源連接起來，從而使目標(biāo)物質(zhì)受到信號標(biāo)記，從而進(jìn)行測定。不同點在于，核酸適配體識別的目標(biāo)底物主要是蛋白質(zhì)。 核酸適配體探針可以快速對目標(biāo)膜蛋白的有無做出測定。 由于膜蛋白與細(xì)胞并非

4、一一對應(yīng)關(guān)系，因此需要對多種膜蛋白進(jìn)行測定，然后對分析結(jié)果進(jìn)行處理。 使用邏輯門可以使分析工作自動化。,邏輯門,邏輯門又稱“數(shù)字邏輯電路基本單元”。執(zhí)行“或”、“與”、“非”、“或非”、“與非”等邏輯運(yùn)算的電路。任何復(fù)雜的邏輯電路都可由這些邏輯門組成。,與門,只有當(dāng)兩個輸入值同時為真時，輸出才為真。（既A且B，維恩圖中為交集）,或門,只要輸入值中存在真，輸出值即為真。（A或B，并集）,非門,當(dāng)輸入值為非真時，輸出值才為真

5、。（非A，補(bǔ)集）,與非門,只要輸入值存在非真，輸出值就為真。（非A或非B或非A且非B，交集的補(bǔ)集）,或非門,只有輸入值全為非真時，輸出值為真。（非A且非B，并集的補(bǔ)集）,,例如，若目標(biāo)細(xì)胞含蛋白A或B，且含蛋白C，且不含蛋白D，那么目標(biāo)細(xì)胞對應(yīng)的信號為A OR B AND C ANDNOT D. 在實際測定中，首先找出目標(biāo)細(xì)胞所屬集合。用相應(yīng)的蛋白質(zhì)探針進(jìn)行檢測。設(shè)定信號強(qiáng)度的閾值，所得信號將轉(zhuǎn)變?yōu)?和1（無和有）。將所