常見藍(lán)藻毒素結(jié)構(gòu)

1、常見藍(lán)藻毒素結(jié)構(gòu),節(jié)球藻毒素,微囊藻毒素,魚腥藻毒素,束絲藻毒素,藍(lán)藻毒素毒性分類,肝毒素,神經(jīng)毒素,皮疹毒素,anatoxin-a、 anatoxin-a(s)、 saxitoxin和 neosaxitoxin，前兩者主要由淡水藍(lán)藻產(chǎn)生，后兩種還可由某些海洋藻類產(chǎn)生,微囊藻毒素和節(jié)球藻毒素是分布最廣泛的兩種肝毒素；擬筒孢藻毒素能以漸進(jìn)的方式損傷包括肝臟在內(nèi)的大多數(shù)器官,包括鞘絲藻毒素-a等主要發(fā)現(xiàn)于海洋藍(lán)藻鞘絲藻中，皮疹毒素可能是蛋白

2、激酶C的活化劑，具有促腫瘤作用。目前在淡水水體中還沒有發(fā)現(xiàn)這類毒素,,神經(jīng)毒素致死事件的報(bào)道主要發(fā)生在北美，而肝毒素的危害是全球性的,,微囊藻毒素出現(xiàn)頻率最高、范圍最廣，造成危害最嚴(yán)重,,,已報(bào)道MC異構(gòu)體的種類接近80種,微囊藻毒素在水環(huán)境中可能的遷移、歸趨途徑,生物降解(細(xì)菌等),,,光降解,,生物放大,生物積累,,微囊藻毒素威脅人類健康的主要途徑,Microcystins,地表水,地下水,,,,,,微囊藻毒素,,經(jīng)口,腹腔注

3、射,,,,肝臟,性腺,,蛋白磷酸酶（PP）1和2A,抑制,,細(xì)胞代謝紊亂,,遺傳毒性,微囊藻毒素對動(dòng)物的毒性,微囊藻毒素的主要靶器官是肝臟，同時(shí)具有致癌、致畸作用,微囊藻毒素的限制值,世界衛(wèi)生組織于（WHO）1997年召開會(huì)議訂定相關(guān)藻類毒素的建議規(guī)范，并于1998年初公布藻類毒素（Microcystin-LR）于飲用水水質(zhì)中不得超過1微克/升 （μg/L）。截至目前為止，巴西、加拿大、波蘭、捷克、西班牙、法國、中國等國，在飲用水水

4、質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)已規(guī)范微囊藻毒素最大限值。 通過在小鼠身上的長達(dá)13周的實(shí)驗(yàn)研究中得出未觀察到有害作用劑量（NOAEL）的量為40μg／kg體重／d，可計(jì)算出每日可容忍攝入量（TDI）的量為0．04μg／kg體重／d。按人體的標(biāo)準(zhǔn)體重60 kg，每天飲水2 L計(jì)算，每日最大容許攝入濃度為1 μg/L,,,,,,,HPLC: 能準(zhǔn)確檢測各種毒素異構(gòu)體, 重現(xiàn)性好，檢測限為0.1?g/mL。但該法檢測時(shí)需MC標(biāo)樣，分析單個(gè)樣品耗時(shí)較長。,ELIS

5、A: 基于單克隆抗體技術(shù)發(fā)展的免疫檢測技術(shù)。需要的樣品量少，前處理簡單，該方法靈敏度很高,檢測限達(dá)到100pg/mL，但線性范圍窄，易出現(xiàn)假陽性結(jié)果。,PPI: 基于MC對PP有抑制作用而建立的體外測試方法，檢測限80pg，得到的結(jié)果是MC總量。,常用檢測方法,生物毒性實(shí)驗(yàn)：粗略確認(rèn)MC的分析技術(shù)。 操作比較簡單，但靈敏度低、專一性差。,微囊藻毒素的檢測方法,,LC/MS: 按照離子的荷質(zhì)比不同，來分離不同分子量的分子，能準(zhǔn)確定

6、量各種異構(gòu)體，檢測限低，靈敏度高，但儀器昂貴。,,樣品采集和運(yùn)輸保存－藻樣,25號(hào)浮游生物網(wǎng)富集,,13號(hào)網(wǎng)過濾浮游動(dòng)物,,離心，去掉碎屑等雜質(zhì),,700目篩網(wǎng)或篩絹布富集,,藻樣,,4℃保存樣品瓶敞口通氣,運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)室 處理,,樣品采集和運(yùn)輸保存－水樣,取深度0m和0.5m處水樣等量混合,,玻璃瓶保存,,取底泥面以上0.1m范圍內(nèi)水樣,,離心，去除雜質(zhì),,GF/C濾膜過濾，去除藻類,,,表層水樣,底層水樣,,運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)室

7、 處理,,冰凍保存,樣品采集和運(yùn)輸保存－泥樣,Peterson采泥器采集,,塑料袋保存,,柱狀采泥器采集,,冷凍,,真空冷凍干燥,,,表層泥樣,分層泥樣,,運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)室 處理,,冰凍保存,樣品采集和運(yùn)輸保存－水生動(dòng)植物樣,水生植物,,封口袋保存,,水生動(dòng)物,,物種鑒定,,真空冷凍干燥,,,根、莖、葉等,肝、腎、肌肉等,,運(yùn)輸,實(shí)驗(yàn)室 處理,,,解剖,冰凍保存,不同基質(zhì)樣品中微囊藻毒素的分析體系－生物樣品,藻細(xì)胞及

8、水產(chǎn)品等基質(zhì)樣品中微囊藻毒素的分析流程圖,藻細(xì)胞、水產(chǎn)品、生物組織樣品,,離心，取上清液,,5%乙酸或80%甲醇等溶劑提取3次，離心,SPE分離純化，20％甲醇預(yù)淋洗，90％甲醇洗脫,濃縮殘留物,,HPLC，ELISA，LC/MS，PPIA，MMPB測定,純水或甲醇定容，貯存與-20℃，待測,土壤和底泥樣品中微囊藻毒素的檢測流程,土壤、底泥樣品,,離心，取上清液,,EDTA－Na2P2O8提取，超聲波400w，10分鐘，3次,S

9、PE分離純化，20％甲醇預(yù)淋洗，90％甲醇洗脫,濃縮致干,,HPLC，ELISA，LC/MS測定,純水或甲醇定容，貯存與-20℃，待測,水樣中微囊藻毒素的檢測流程,1－5升水樣,,0.45um濾膜過濾,,SPE富集、分離純化，20％甲醇預(yù)淋洗，90％甲醇洗脫,濃縮致干,,HPLC測定,純水或甲醇定容，貯存與-20℃，待測,,ELISALC/MS測定,GB/T 20466-2006,不同基質(zhì)樣品中微囊藻毒素的分析體系－水、泥樣品,