如何看抗體檢測結(jié)果及檢測應用

1、如何看抗體檢測結(jié)果及抗體檢測應用,隋海亮2014年7月5日,文檔密級：內(nèi)部公開,一、豬瘟,ELISA原理 ——阻斷（競爭）ELISA,例如：CSFV-Ab、PRV-gI、PRV-gB,豬瘟疫苗的免疫評估—關注兩點,陽性率：豬瘟抗體（阻斷率（Blocking）≥40%，判為陽性結(jié)果；30%＜Blocking＜40%，判為可疑結(jié)果；Blocking≤30%，判為陰性結(jié)果）；免疫合格率：阻斷率（Blocking）≥50%的，即為免疫合格

2、。免疫合格的比例即為免疫合格率。,,變異系數(shù)： Coefficient of Variation (CV) 變異系數(shù)計算的是平均個體的變化，以平均滴度的背離的百分數(shù)來表示公式如下 標準偏差（STDEV） CV= X 100% 平均阻斷率CV≤40%,顯示了群內(nèi)豬只有一個均

3、衡的、相似反應CV≥60%,顯示了群內(nèi)豬只滴度反應變化高于正常估計值,,豬瘟檢測的應用,免疫評估：商品豬：豬瘟二免后4-6周 ，要求：陽性率 ≥80%,CV≤40% 種豬群（公豬和母豬）：豬瘟免疫后4-6周，要求 ：免疫合格率≥80%（嚴格一點，要≥90%）,CV≤40%后備豬（全群檢測）：進入隔離舍后1-2周、進入配種舍前1個月（6-6.5月齡），要求： Blocking ≥40%，陰性豬補打疫苗，3周后復檢，不合格淘汰。,豬

4、瘟檢測的應用,仔豬首免日齡的確定：選30-60頭仔豬，日齡和體重相近，每窩1-2頭，確認沒有野毒感染的風險，不接種豬瘟疫苗連續(xù)采血：出生后7天、14天、21天、28天、35天、42天檢測抗體水平 要求：CSFAb Block≤30%仔豬占20%-40%時為首免日齡(依據(jù)感染壓力和平均阻斷率而定)。,二、藍耳,ELISA原理 ——間接ELISA,結(jié)果判斷,結(jié)果判定：藍耳抗體（S/P≥0.4，判為陽性結(jié)果； S/P<0.4，判為

5、陰性結(jié)果）免疫豬群 0.4＜S/P≤2.5；對于過高抗體種豬，隔離飼養(yǎng)，2周后采血檢測，若抗體處于上升趨勢的種豬則淘汰非免疫豬群 S/P值≥0.4 淘汰或隔離飼養(yǎng),應用,公豬 季度性監(jiān)測全部公豬 ，一年4次要求： S/P≥2.5公豬暫停使用(1-2個月)或PCR確認感染狀態(tài) 母豬 季度性監(jiān)測母豬 要求：S/P應主要在2.5 ≥ S/P ≥0.4(90%母豬抗體在免疫后轉(zhuǎn)陽) 后備母豬和后備公豬 在引進種群前1個月，全群

6、監(jiān)測 要求：S/P≥2.5和S/P≤0.4暫停引入繁殖群,應用,動態(tài)檢測4周齡、10周齡豬群，每次20-30樣本 主要是：分析藍耳感染狀態(tài)，判斷豬群是否穩(wěn)定，(對于不穩(wěn)定群體,延遲轉(zhuǎn)群或免疫等)，如果S/P≥2.5的比例超過5%，則判斷該場藍耳不穩(wěn)定，有感染；沒有則穩(wěn)定。,三、偽狂犬,偽狂犬gE：結(jié)果成立條件：陰性對照平均值-陽性對照平均值必須大于或等于0.3；否則試驗無效。判定結(jié)果：如果S/N值低于或等于0.60，樣品應判

7、定為陽性；如果S/N值大于0.70，樣品應判為陰性；處于0.6~0.7的樣品判定為可疑，間隔兩周時間可重新檢測。,,,偽狂犬病毒,,gE片段,,gB片段,,疫苗病毒片段,豬群PRV感染狀況的普查,采樣要求公豬群：全部采樣生產(chǎn)母豬群：隨機采樣30個樣本15周齡后的生長豬（母源抗體消失）：隨機采樣20-30個樣本檢測方法IDEXX PRV gI ELISA S/N≤0.6 陽性，S/N＞0.7陰性0.6<S/N≤0.7 隔

8、離2周后重復檢測普查結(jié)果分析：低感染群：種豬陽性率10%以下，可做凈化 高感染群：種豬陽性率10%以上，低于30%，可做凈化；高于30%，通過疫苗控制，來穩(wěn)定豬群,偽狂犬疫苗的免疫評估—針對陰性場,商品豬群免疫疫苗后4-6周，隨機采樣20-30份要求：gE抗體檢測全部為陰性；gB抗體檢測陽性率≥95%,,偽狂犬的評級標準：偽狂犬gE抗體全陰性，則為陰性場偽狂犬gE抗體陽性，但檢測15周齡豬，gE抗體轉(zhuǎn)陰，則為陽

9、性穩(wěn)定場偽狂犬gE抗體陽性，但檢測15周齡豬，gE抗體陽性率達到20%以上，則為陽性不穩(wěn)定穩(wěn)定場,應用—凈化,母豬群,公豬群(全部)過去6-12個月沒有使用全病毒滅活苗或非gE基因缺失弱毒疫苗　 若S/N≤0.6 則淘汰（對于懷孕母豬:可以先隔離,產(chǎn)后2周淘汰）;若0.6<S/N≤0.7 淘汰或隔離2周后重復檢測,陽性者淘汰;間隔6,12個月重復檢測全群,若前后兩次檢測全部為陰性，則后續(xù)檢測不需要全群采樣,可以按季