臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器描述

1、第五章 臨床血液常規(guī)檢驗(yàn)儀器,臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器是臨床實(shí)驗(yàn)室最常用最基本的的分析儀器，包括：血細(xì)胞分析儀血液凝固分析儀,第五章 臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀,教學(xué)要求掌握血細(xì)胞分析儀的概念、庫(kù)爾特原理、儀器的基本結(jié)構(gòu)。熟悉聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀器的檢測(cè)原理，網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理，血紅蛋白檢測(cè)原理、儀器性能評(píng)價(jià)和維護(hù)。了解血細(xì)胞分析儀的分類、性能指標(biāo)、常見故障和排除及進(jìn)展。,第一節(jié) 血細(xì)胞分析儀學(xué)習(xí)內(nèi)容,一、血細(xì)胞

2、分析儀的分型二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu)四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià)五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)及常見故障六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展 思考題,一、血細(xì)胞分析儀的分型,血細(xì)胞分析儀(Blood cell analyzer,BCA)是指對(duì)一定體積全血內(nèi)血細(xì)胞異質(zhì)性進(jìn)行自動(dòng)分析的臨床檢驗(yàn)常規(guī)儀器。又稱血細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀(ABCC)、血液學(xué)自動(dòng)分析儀(AHA)。ABCC代表早期的低檔次BCA，AHA外延

3、過大。,,一、血細(xì)胞分析儀的分型,血細(xì)胞分析儀分型按自動(dòng)化程度按檢測(cè)原理按對(duì)白細(xì)胞的分類水平,,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（一）血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理,庫(kù)爾特（電阻抗）血細(xì)胞檢測(cè)原理,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（2）紅細(xì)胞和血小板檢測(cè)的直方圖,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,2.聯(lián)合檢測(cè)型血細(xì)胞分析儀檢測(cè)原理,,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,,,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,體積(volume，V) 電阻抗原理測(cè)定細(xì)胞體積和數(shù)量

4、電導(dǎo)性(conductivity，C) 高頻電磁探針，測(cè)量細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)，細(xì)胞內(nèi)核漿比例光散射(scatter，S)細(xì) 胞內(nèi)粗顆粒的光散射強(qiáng) 度要比細(xì)顆粒更強(qiáng),二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（3） 光散射與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理,這類儀器是應(yīng)用激光散射與細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù)。,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,,高角度前向散射光：細(xì)胞核及顆粒的信息低角度前向散射光：細(xì)胞大小的信息,結(jié)合細(xì)胞化學(xué)染色技術(shù)對(duì)白細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)

5、數(shù),,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（4）電阻抗、射頻與細(xì)胞化學(xué)聯(lián)合檢測(cè)原理,這類儀器是利用電阻抗、射頻這一成熟細(xì)胞計(jì)數(shù)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，通過4個(gè)不同的檢測(cè)系統(tǒng)對(duì)白細(xì)胞、幼稚細(xì)胞進(jìn)行分類和計(jì)數(shù)。,,,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,白細(xì)胞分類散射圖,聯(lián)合使用多項(xiàng)技術(shù)(流式、激光、射頻、電導(dǎo)、電阻抗、細(xì)胞化學(xué)染色)同時(shí)分析一個(gè)細(xì)胞，綜合分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，從而得出較為準(zhǔn)確的白細(xì)胞“五分類”結(jié)果。,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（5）網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原

6、理,,網(wǎng)織紅細(xì)胞中嗜堿性物質(zhì)RNA，在活體狀態(tài)下與特殊的熒光染料結(jié)合熒光強(qiáng)度與RNA含量成正比用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) 網(wǎng)織紅細(xì)胞大小和 RNA含量及血紅蛋 白的含量,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,網(wǎng)織紅細(xì)胞等與試劑反應(yīng)前后的變化,反應(yīng)前,反應(yīng)后,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,熒光(RNA)強(qiáng)度,,,Reticulocytes,,,,PLT,RBC,,,,,WBC,,前向散射光(細(xì)胞大小),血細(xì)胞分析儀網(wǎng)織紅細(xì)胞成熟度分類,二

7、、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,3.干式離心分層型血細(xì)胞分析儀的細(xì)胞計(jì)數(shù)原理將血液充入到含特殊試劑（抗凝劑、熒光染料）的毛細(xì)管內(nèi)專用離心機(jī)上離心，儀器根據(jù)血中各種血細(xì)胞成份的比重不同分層亦不同的原理，血細(xì)胞被吖啶橙染色后，各層細(xì)胞會(huì)有明顯的顏色差異，然后將毛細(xì)管放在特殊的判讀機(jī)上對(duì)不同細(xì)胞層進(jìn)行比對(duì)定量分析計(jì)算機(jī)綜合信息處理，得到紅細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、血小板、血紅蛋白等參數(shù)。,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,（二）血細(xì)胞分

8、析儀的血紅蛋白測(cè)定原理,除干式、無創(chuàng)型外，各型BCA對(duì)血紅蛋白測(cè)定都采用光電比色原理血細(xì)胞懸液中加入溶血?jiǎng)┖?，紅細(xì)胞溶解釋放出血紅蛋白，后者與溶血?jiǎng)┲杏嘘P(guān)成分結(jié)合形成血紅蛋白衍生物，進(jìn)入血紅蛋白測(cè)試系統(tǒng)特定波長(zhǎng)(530～550nm)下進(jìn)行光電比色,二、血細(xì)胞分析儀的檢測(cè)原理,基本結(jié)構(gòu),機(jī)械系統(tǒng)電學(xué)系統(tǒng)血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng)血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng)計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng),三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),1.機(jī)械系統(tǒng) 包括機(jī)械裝置（如全自動(dòng)有進(jìn)

9、樣針、分血器、稀釋器、混勻器、定量裝置等）和真空泵，以完成樣本的定量吸取、稀釋、傳送、混勻，以及將樣本移入各種參數(shù)的檢測(cè)區(qū),三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),2.電學(xué)系統(tǒng) 包括主電源、電壓元器件、控溫裝置、自動(dòng)真空泵電子控制系統(tǒng)，以及儀器的自動(dòng)監(jiān)控、故障報(bào)警和排除等,三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),3.血細(xì)胞檢測(cè)系統(tǒng) 國(guó)內(nèi)常用的血細(xì)胞分析儀，使用的檢測(cè)技術(shù)可分為電阻抗檢測(cè)技術(shù)和光散射檢測(cè)技術(shù)兩大類,三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),電

10、阻抗檢測(cè)技術(shù)：由檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成流式光散射檢測(cè)技術(shù)：由激光光源、檢測(cè)裝置和檢測(cè)器、放大器、甄別器、閾值調(diào)節(jié)器、檢測(cè)計(jì)數(shù)系統(tǒng)和自動(dòng)補(bǔ)償裝置組成,三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),4.血紅蛋白測(cè)定系統(tǒng) 由光源、透鏡、濾光片、流動(dòng)比色池和光電傳感器等組成。 5.計(jì)算機(jī)控制系統(tǒng),三、血細(xì)胞分析儀的基本結(jié)構(gòu),四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià),（一）儀器的性能指標(biāo) 1.測(cè)試參數(shù) 2.細(xì)胞形態(tài)學(xué)分

11、析 3.測(cè)試速度 4.樣本量 5.工作條件與基本功能 6.技術(shù)要求,（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià),ICSH公布了電子血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià)方案：在細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白測(cè)定方面，要評(píng)價(jià)儀器測(cè)試樣本的總變異、攜帶污染率、線性范圍、可比性和準(zhǔn)確性等,四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià),四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià),（二）血細(xì)胞分析儀的評(píng)價(jià) 1.精密度 2.攜帶污染率 3.總重復(fù)性 4.線性范圍 5.標(biāo)本老化 6.抗干擾性

12、 7.白細(xì)胞分類的鑒定,（三）血細(xì)胞分析儀的校準(zhǔn),出廠前已經(jīng)過廠方技術(shù)鑒定合格，但由于運(yùn)輸振動(dòng)或因故障維修后或長(zhǎng)時(shí)間停用后再啟用等原因，以及正常使用半年以上或認(rèn)為有必要時(shí)，都必須對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)校及性能測(cè)試，這對(duì)了解儀器性能，發(fā)現(xiàn)問題，確保檢驗(yàn)質(zhì)量有重要意義,四、血細(xì)胞分析儀的性能指標(biāo)與評(píng)價(jià),五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障排除,（一）儀器的維護(hù) 血細(xì)胞分析儀屬高精密儀器，應(yīng)有專人負(fù)責(zé)，按儀器廠家的的要求進(jìn)行日保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)及

13、年終的大保養(yǎng)，并建立儀器保養(yǎng)和維修檔案。同時(shí)要做好：檢測(cè)器、液路和機(jī)械傳動(dòng)部分的維護(hù),（二）儀器的維護(hù) 1.檢測(cè)器的維護(hù) ①采血順利②防止纖維絲堵孔③關(guān)機(jī)前對(duì)檢測(cè)器的微孔進(jìn)行清理沖洗④計(jì)數(shù)期間，及時(shí)按 “反沖”鍵，沖掉沉積變性的蛋白質(zhì)⑤定期卸下檢測(cè)器，用5%次氯酸鈉浸泡清洗,五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障排除,2.液路的維護(hù),五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障排除,3.機(jī)械傳動(dòng)部位的維護(hù),五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障

14、排除,（三）常見故障排除,有自我診斷功能，有故障發(fā)生時(shí)，內(nèi)置電腦的錯(cuò)誤檢查功能顯示出“錯(cuò)誤信息”，并伴有報(bào)警聲,五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障排除,1.開機(jī)時(shí)的常見故障2.測(cè)試過程中常見的錯(cuò)誤信息 其中檢測(cè)器的微孔堵塞是影響檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最常見的原因。根據(jù)微孔堵塞的程度，將其分為完全堵孔和不完全堵孔兩種。,五、血細(xì)胞分析儀的維護(hù)與常見故障排除,（三）常見故障排除,六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,儀器測(cè)試原理的不斷創(chuàng)新 白細(xì)胞分類的改

15、進(jìn) 紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn) 新血細(xì)胞分析參數(shù)的出現(xiàn)各種特殊技術(shù)的應(yīng)用儀器自動(dòng)化水平的提高無創(chuàng)血液分析儀的上市,紅細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)原理的改進(jìn),二維激光散射法測(cè)定紅細(xì)胞和血小板,克服了電阻抗法在病理情況下測(cè)定MCH、MCHC結(jié)果不準(zhǔn)及血小板計(jì)數(shù)精確性較差的缺點(diǎn),六、血細(xì)胞分析儀的進(jìn)展,思 考 題,1.BCA的概念及功能是什么？2.簡(jiǎn)述電阻抗血細(xì)胞檢測(cè)原理。3.簡(jiǎn)述聯(lián)合檢測(cè)型BCA白細(xì)胞分類計(jì)數(shù)的實(shí)質(zhì)和共有

16、特點(diǎn)4.簡(jiǎn)述BCA網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)原理。5.如何對(duì)BCA進(jìn)行分類？半自動(dòng)與全自動(dòng)BCA的主要區(qū)別？6.如何對(duì)BCA進(jìn)行評(píng)價(jià)？7.電阻抗型BCA和聯(lián)合檢測(cè)型BCA的基本結(jié)構(gòu)？8.BCA的進(jìn)展表現(xiàn)在哪幾個(gè)方面？9.BCA常見的堵孔原因有哪些？如何處理？10.BCA保證血小板準(zhǔn)確計(jì)數(shù)的技術(shù)有哪些？,第二節(jié) 血液凝固分析儀,教學(xué)要求掌握血凝儀的檢測(cè)原理和基本結(jié)構(gòu)熟悉半自動(dòng)、全自動(dòng)血凝儀的特點(diǎn)，血凝儀的性能評(píng)價(jià)以及各種檢測(cè)方法的優(yōu)

17、缺點(diǎn)了解血凝儀的分類、臨床應(yīng)用、儀器的維護(hù),學(xué)習(xí)內(nèi)容,一、 概述一、血凝儀的分型二、血凝儀的檢測(cè)原理三、血凝儀的基本結(jié)構(gòu)四、血凝儀的性能評(píng)價(jià)五、血凝儀的維護(hù)六、血凝儀的臨床應(yīng)用● 思考題,一、概 述,血液凝固分析儀（automated coayulation analyzer,ACA）是采用一定分析技術(shù)，對(duì)血栓與出血有關(guān)成分自動(dòng)檢測(cè)的臨床常規(guī)檢驗(yàn)儀器在血栓/出血實(shí)驗(yàn)室中最基本的設(shè)備就是血液凝固分析儀（簡(jiǎn)

18、稱血凝儀）,發(fā) 展 史1910年，Kottman發(fā)明了最早的血凝儀1950年，Schnitger和Gross發(fā)明了基于電流法的血凝儀20世紀(jì)70年代前為血凝儀的初級(jí)階段,一、概 述,20世紀(jì)70年代，較精確的各種自動(dòng)血凝儀先后問世。其特點(diǎn)是，單通道、終點(diǎn)法的半自動(dòng)血凝儀，也稱第一代產(chǎn)品20世紀(jì)80年代末，多通道、多方法與原理的半自動(dòng)血凝儀相繼誕生，稱之為第二代產(chǎn)品,各代血凝儀的特點(diǎn),一、概 述,20世紀(jì)90年代以來，多通

19、道、多方法、多功能全自動(dòng)（即第三代）血凝儀不斷涌現(xiàn),一、概 述,二、血凝儀的分型及特點(diǎn),（一）血凝儀分型按自動(dòng)化程度半自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝儀全自動(dòng)血凝工作站,三者有何區(qū)別 ？,三、血凝儀的檢測(cè)原理,血凝儀檢測(cè)原理主要檢測(cè)方法：凝固法、底物顯色法、免疫學(xué)法、干化學(xué)法等。,彼此有何不同？,三、血凝儀的檢測(cè)原理,,,血凝儀檢驗(yàn)技術(shù)原理,,三、血凝儀的檢測(cè)原理,,1．凝固法原理 是通過檢測(cè)血漿在凝血激活劑作用下發(fā)生一系列

20、物理量（光、電、超聲、機(jī)械運(yùn)動(dòng)等）的變化，再由計(jì)算機(jī)分析所得最終結(jié)果，稱生物物理法。按測(cè)量原理分為電流法、超聲分析法、光學(xué)法和磁珠法四種。,呵！是血漿凝固的變化,光學(xué)法（比濁法）：是根據(jù)血漿凝固過程中濁度的變化，導(dǎo)致光強(qiáng)度變化來測(cè)定相關(guān)因子,三、血凝儀的檢測(cè)原理,三、血凝儀的檢測(cè)原理,光學(xué)法血凝儀工作流程,,三、血凝儀的檢測(cè)原理,纖維蛋白的形成與吸光度,??？為何在50%？,三、血凝儀的檢測(cè)原理,磁珠法原理：是根據(jù)磁珠運(yùn)動(dòng)的幅度隨血漿凝固

21、過程中黏度的增加而變化來測(cè)量凝血功能的方法。根據(jù)儀器對(duì)磁珠運(yùn)動(dòng)測(cè)量原理的不同，又可分為光電探測(cè)法和電磁珠探測(cè)法。,雙磁路磁珠法原理,三、血凝儀的檢測(cè)原理,光電磁珠法原理,可以用光檢測(cè)磁珠擺動(dòng)衰減幅度,,用電磁檢測(cè)磁珠擺動(dòng)衰減幅度,光學(xué)法與磁珠法原理主要區(qū)別光學(xué)法原理：是用光探測(cè)凝固過程中血漿濁度的（吸光度）變化來判斷終點(diǎn)；光電磁珠法原理：是用光探測(cè)鋼珠振幅衰減程度來判斷終點(diǎn)；雙磁路磁珠法原理：是用電磁探測(cè)鋼珠振幅衰減程度來判斷終點(diǎn)

22、。,三、血凝儀的檢測(cè)原理,三、血凝儀的檢測(cè)原理,2.產(chǎn)色底物法原理：實(shí)質(zhì)為光電比色原理，是通過測(cè)定產(chǎn)色底物的吸光度變化來推測(cè)所測(cè)物質(zhì)的含量和活性，也稱生物化學(xué)法,三、血凝儀的檢測(cè)原理,3.免疫學(xué)方法原理 以純化的被檢物質(zhì)為抗原，制備相應(yīng)的抗體，然后利用抗原抗體反應(yīng)對(duì)被檢物進(jìn)行定性或定量測(cè)定。血凝儀使用免疫比濁法,四、血凝儀的基本結(jié)構(gòu),1.半自動(dòng)血凝儀的基本結(jié)構(gòu) 主要由樣本預(yù)溫槽和試劑預(yù)溫槽、加樣器、檢測(cè)系統(tǒng)（光學(xué)、磁場(chǎng)）及

23、微機(jī)組成,,全自動(dòng)呢 ？,四、血凝儀的基本結(jié)構(gòu),2.全自動(dòng)血凝儀基本結(jié)構(gòu) 包括樣本傳送及處理裝置、試劑冷藏位、樣本及試劑分配系統(tǒng)、檢測(cè)系統(tǒng)、計(jì)算機(jī)、輸出設(shè)備 及附件等,,就這么簡(jiǎn)單？,1.一般性評(píng)價(jià) 包括：①產(chǎn)品質(zhì)量占50%，其中想要的特征占25%、儀器自動(dòng)化水平占15%、免費(fèi)維護(hù)能力占10%；②價(jià)格占25%；③廠商評(píng)估占10%；④擔(dān)保占5%；⑤售后服務(wù)占5%；⑥可接受性占5%。,五、血凝儀的性能評(píng)價(jià),五、血凝儀的

24、性能評(píng)價(jià),2.技術(shù)性能評(píng)價(jià) 重復(fù)性測(cè)定、正確度、線性范圍、攜帶污染率、干擾因素等幾方面,,攜便式血凝儀,3.半自動(dòng)與全自動(dòng)血凝儀的比較 半自動(dòng)血凝儀：手工加樣加試劑；操作簡(jiǎn)便；應(yīng)用檢測(cè)方法少；價(jià)格便宜；速度慢；測(cè)量精度好于手工，但低于全自動(dòng)全自動(dòng)血凝儀：自動(dòng)化程度高；檢測(cè)方法多；通道多，速度快；測(cè)量精度好,五、血凝儀的性能評(píng)價(jià),六、血凝儀的維護(hù),1.半自動(dòng)血凝儀的維護(hù) ①保持測(cè)試槽、樣本槽、試劑槽清潔，嚴(yán)禁有異物進(jìn)入；

25、②避免陽光直曬和遠(yuǎn)離強(qiáng)熱物體；③放置在平穩(wěn)的工作臺(tái)面上，不得搖晃與振動(dòng)；④防止受潮和腐蝕；⑤儀器和加珠器（磁珠法）都必須遠(yuǎn)離強(qiáng)電磁場(chǎng)干擾源，并使用一次性測(cè)試杯及鋼珠；⑥最好使用穩(wěn)壓器電源；⑦更換熔斷器內(nèi)的保險(xiǎn)管時(shí)，應(yīng)先關(guān)閉本系統(tǒng)，拔下電源線，嚴(yán)格按熔斷器座旁標(biāo)示的規(guī)格型號(hào)進(jìn)行更換；⑧儀器保持恒溫37℃±0.2℃。,六、血凝儀的維護(hù),2.全自動(dòng)血凝儀的維護(hù)日保養(yǎng) ①開機(jī)前應(yīng)檢查穩(wěn)壓電源是否正常，廢液瓶、垃圾箱是否倒空、洗液

26、瓶?jī)?nèi)的蒸餾水是否超過上面的凹槽、試劑是否夠用、打印紙是否更換等。②標(biāo)本檢測(cè)完畢要進(jìn)行洗針和管路清洗程序，防止管道堵塞。,2.全自動(dòng)血凝儀的維護(hù)周保養(yǎng) ①每周進(jìn)行1次徹底的管路清洗。②清洗或更換空氣過濾器。③檢查及清潔反應(yīng)槽；④清洗洗針池及通針；⑤檢查冷卻劑液面水平。 月保養(yǎng) ①清潔機(jī)械運(yùn)動(dòng)導(dǎo)桿和轉(zhuǎn)動(dòng)部分并加潤(rùn)滑油。②及時(shí)保養(yǎng)定量裝置。③更換樣品及試劑針。④數(shù)據(jù)備份及恢復(fù)。⑤每月進(jìn)行儀器內(nèi)部的徹底清洗。,六、血凝儀的維護(hù),七、血凝