毒死蜱和TCP對(duì)斑馬魚DNA損傷及氧化脅迫.pdf

1、毒死蜱（Chlorpyrifos）是一種廣譜有機(jī)磷殺蟲劑，其化學(xué)名稱是O,O-二乙基-O-（3,5,6-三氯-2-吡啶基）硫代磷酸酯，主要應(yīng)用于農(nóng)業(yè)害蟲和城市家庭衛(wèi)生害蟲的防治。毒死蜱是全球應(yīng)用最廣泛的殺蟲劑之一，其殘留毒性問題已經(jīng)受到普遍關(guān)注。TCP（3,5,6-三氯-2-吡啶酚）是毒死蜱的主要代謝產(chǎn)物，由于毒死蜱的廣泛使用，導(dǎo)致環(huán)境中存在一定量的TCP。TCP具有比毒死蜱具有更強(qiáng)大的水溶性和流動(dòng)性，從而更容易滲入水中，污染地下和地表

2、水體，對(duì)環(huán)境生物造成危害。盡管TCP對(duì)環(huán)境生物具有潛在的有害影響，但只有少數(shù)的研究報(bào)道。
　　 本研究以毒死蜱和TCP為研究對(duì)象，選取斑馬魚為指示生物，將斑馬魚雌魚和雄魚分別暴露于空白對(duì)照和0.01，0.1，1mg/L毒死蜱，0.01，0.1，0.5 mg/L TCP不同濃度溶液中，染毒后的5，10，15,20,25d取樣測(cè)定。通過毒死蜱和TCP對(duì)斑馬魚DNA損傷，對(duì)肝微粒體細(xì)胞色素P450含量、NADPH-細(xì)胞色素P450還原

3、酶（NCR）活性、過氧化氫酶（CAT）活性、超氧化物歧化酶（SOD）活性、活性氧（ROS）的影響。評(píng)價(jià)了毒死蜱及其降解產(chǎn)物TCP的生態(tài)毒性和遺傳毒性，為全面了解和認(rèn)識(shí)毒死蜱和TCP對(duì)水生生態(tài)系統(tǒng)的影響提供依據(jù)。主要研究結(jié)果如下：
　　 1.單細(xì)胞凝膠電泳實(shí)驗(yàn)（SCGE）：經(jīng)不同濃度毒死蜱和TCP處理均可造成斑馬魚細(xì)胞DNA損傷，而且隨著濃度的增加和時(shí)間的延長(zhǎng)，彗星拖尾長(zhǎng)度、Olive尾矩的值均有上升的趨勢(shì)，這說明DNA損傷程度與

4、毒死蜱和TCP的濃度和處理時(shí)間存在劑量-效應(yīng)和時(shí)間-效應(yīng)關(guān)系。同時(shí)，通過比較相同條件下毒死蜱與TCP對(duì)斑馬魚肝微粒體細(xì)胞DNA所造成的影響可知，毒死蜱的降解產(chǎn)物TCP比毒死蜱具有更大的基因毒性。
　　 2.P450酶系：選擇P450酶系中的細(xì)胞色素P450含量、NCR作為指標(biāo)。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，毒死蜱和TCP處理組的指標(biāo)活性均始終處于對(duì)照組水平之上。經(jīng)TCP染毒的各處理組的P450含量、NCR分別高于相同濃度下毒死蜱處理組，說明

5、TCP對(duì)斑馬魚的影響更劇烈，毒性比毒死蜱更高。另外，本研究還表明，毒死蜱和TCP在對(duì)斑馬魚P450酶系的影響中存在性別差異，雌魚的P450含量和NCR活性明顯高于雄魚，雌魚比雄魚更敏感且易受影響。
　　 3.抗氧化酶系：選擇抗氧化酶系中的SOD和CAT活性作為指標(biāo)。實(shí)驗(yàn)過程中，隨著暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，抗氧化酶活性在低濃度（0.01，0.1mg/L）處理組下升高，在高濃度（0.5，1mg/L）處理組下降低，但都顯著高于對(duì)照組指標(biāo)活性。

6、這說明毒死蜱對(duì)斑馬魚抗氧化酶系具有一定的激活作用。斑馬魚在毒死蜱和TCP作用下，機(jī)體受到毒性侵害，其抗氧化酶系發(fā)生作用，以抵御外界污染物的毒性影響。相同條件下，受TCP影響的抗氧化酶指標(biāo)活性高于毒死蜱，說明TCP對(duì)斑馬魚的影響更劇烈，毒性比毒死蜱更高。
　　 4.活性氧（ROS）：在實(shí)驗(yàn)過程中，較對(duì)照組而言，處理組ROS活性隨著染毒時(shí)間的延長(zhǎng)和染毒劑量的增加顯著提高。TCP影響下的斑馬魚肝微粒體ROS活性明顯高于相同條件下毒死蜱