納米tio2對斑馬魚肝損傷基因表達(dá)的影響【開題報告】

1、<p><b>　　畢業(yè)論文開題報告</b></p><p><b>　　生物技術(shù)</b></p><p>　　納米TiO2對斑馬魚肝損傷基因表達(dá)的影響</p><p>　　一、選題的背景與意義</p><p>　　納米技術(shù)是當(dāng)今高科技發(fā)展中最快的領(lǐng)域之一，大約超過200種的納米材料被用于

2、個人、商業(yè)、醫(yī)藥和軍事等領(lǐng)域。隨著納米材料所帶來的利益的同時，對納米材料釋放到環(huán)境中并對環(huán)境及生物所造成的潛在毒性也受到越來越多學(xué)者的關(guān)注。有研究表明，當(dāng)宏觀物質(zhì)被粉碎成納米級超微顆粒后，其諸多方面的性質(zhì)均發(fā)生了根本性改變，納米顆粒特殊的理化性質(zhì)（如小尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)和宏觀量子隧道效應(yīng)等） 使其與宏觀材料在生物活性和生物動力學(xué)過程等方面產(chǎn)生了明顯差異，因此對機(jī)體產(chǎn)生的生物效應(yīng)和作用強(qiáng)度也發(fā)生了本質(zhì)上的改變，一些原本無毒或

3、微毒的顆粒粒徑達(dá)到納米級時毒性明顯增強(qiáng)，一些原本無害的材料在達(dá)到納米級時可能會對人體產(chǎn)生各種潛在危害（汪冰等，2005；朱融融等，2007）. 常規(guī)二氧化鈦（TiO2） 是一種低毒粉塵，在許多粉塵的毒理學(xué)研究中往往被用作無毒的對照粉塵，然而當(dāng)其達(dá)到納米級時（納米TiO2）其毒性明顯增強(qiáng). 研究表明，納米TiO2 染毒后可在肝大量富集，肝是納米TiO2 在生物體內(nèi)的主要靶器官（王江雪等，2008）</p><p>

4、　　目前研究納米TiO2顆粒對生物的影響及生物效應(yīng)的受試生物主要為小鼠和細(xì)胞,對水生生物的效應(yīng)研究較少,更未見有研究納米TiO2對魚肝損傷及相關(guān)基因表達(dá)的報道.然而, 使用納米材料可能導(dǎo)致排放到水環(huán)境 ，并危及水生物與水生生態(tài)系統(tǒng).斑馬魚除了具有經(jīng)濟(jì)、觀賞價值外，還被廣泛應(yīng)用于發(fā)育生物學(xué)、毒理學(xué)、分子生物學(xué)等研究，被喻為理想的分子生物學(xué)的脊椎動物模型，具有很高的科研價值, 是外界環(huán)境變化，如重金屬鹽類、農(nóng)藥、工業(yè)污水、放射性物質(zhì)等對人類

5、影響的良好研究材料。本項(xiàng)目希望通過納米TiO2對斑馬魚肝損傷及其相關(guān)基因表達(dá)的研究,為該領(lǐng)域的研究提供參考,積累數(shù)據(jù),更為深入了解納米TiO2 的毒性及其機(jī)制提供基礎(chǔ)依據(jù).</p><p>　　二、研究的基本內(nèi)容與擬解決的主要問題：</p><p><b>　　研究的基本內(nèi)容：</b></p><p>　　從轉(zhuǎn)錄水平研究TiO2對魚的生物需效應(yīng)

6、，包括RNA含量的測定；</p><p>　　從分子水平研究TiO2對魚的生物學(xué)效應(yīng)，如測定相關(guān)基因的表達(dá)。</p><p><b>　　擬解決的主要問題：</b></p><p>　　如何提取出比較純的斑馬魚肝，并將其在液氮中完善的保存一段時間。</p><p>　　用液氮研磨法提取出比較純凈的RNA。</p&g

7、t;<p>　　以Actin作內(nèi)參配制等濃度的RNA量</p><p><b>　　引物的設(shè)計(jì)。</b></p><p>　　熟練運(yùn)用RT-PCR技術(shù)及瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測待測基因的表達(dá)情況。</p><p>　　三、研究的方法與技術(shù)路線：</p><p>　　研究的方法：對斑馬魚進(jìn)行納米材料TiO2的染

8、毒培養(yǎng)，提取出斑馬魚肝中的RNA，以Actin作內(nèi)參配制等濃度的RNA量，RT-PCR技術(shù)及瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測待測基因的表達(dá)情況。</p><p><b>　　技術(shù)路線：</b></p><p>　　四、研究的總體安排與進(jìn)度：</p><p>　　2010年11月到2010年12月：查閱相關(guān)文獻(xiàn)，了解實(shí)驗(yàn)原理與實(shí)驗(yàn)過程。</p>

9、<p>　　2011年2月到2011年3月，RNA的提取，跑RT-PCR。</p><p>　　2011年3月到2011年4月，后期數(shù)據(jù)的處理。</p><p><b>　　五、主要參考文獻(xiàn)：</b></p><p>　　[1] 朱融融, 汪世龍, 孫曉宇, 等. β-CD 對納米TiO2 引發(fā)DNA 損傷的抑制效應(yīng)及其機(jī)理[J]

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