人工復(fù)制小鼠銅離子中毒的病理變化觀察

1、<p><b>　　畢業(yè)設(shè)計(jì)（論文）</b></p><p>　　題　　目：人工復(fù)制小鼠銅離子中毒的病理變化觀察</p><p>　　系　　部： 動(dòng)科系　　　　　</p><p>　　專　　業(yè)：　　　　　　　　　　　　</p><p>　　學(xué)　　號(hào)：　　　　　　　　　　　　</p>

2、<p>　　學(xué)生姓名：　　　　　　　　　　　　</p><p>　　導(dǎo)師姓名：　　　　　　　　　　　　</p><p>　　導(dǎo)師職稱：　　　　　　　　　　　　</p><p>　　二○一三年四月（填寫時(shí)間要用中文）</p><p><b>　　內(nèi)容摘要及關(guān)鍵詞</b></p><p>　

3、　【摘 要】：本研究采用硫酸銅灌胃的方式對小鼠銅中毒的臨床表現(xiàn)及組織器官的病理變化進(jìn)行觀察。試驗(yàn)根據(jù)灌胃的劑量將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為 4 組：對照組 (0 mg/kg)、低劑量組 (50mg/kg)、中劑量組 (100mg/kg)，高劑量組 (200mg/kg)，每組 6 只，試驗(yàn)周期為 2 周。結(jié)果顯示，高劑量組的死亡率高于中劑量和低劑量組。高劑量組器官的病理形態(tài)學(xué)觀察表現(xiàn)為肝脂肪變性和顆粒變性，肝細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀，低劑量組和中劑量組

4、肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒；低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄，間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。結(jié)果表明，銅中毒主要損害肝臟、腎臟等組織器官，最終導(dǎo)致發(fā)病甚至死亡。</p><p>　　關(guān)鍵詞：銅中毒；病理變化；小白鼠；</p>

5、<p>　　Abstract and keywords</p><p>　　[Abstract]: the pathological changes in this study by copper sulfate gavage to mice copper poisoning clinical manifestations and organs were observed. According to

6、 the gavage dose mice were randomly divided into 4 groups: control group (0 mg/kg), low dose group (50mg/kg), middle dose group (100mg/kg), high dose group (200mg/kg), 6 rats in each group, the test cycle for 2 weeks. Th

7、e results showed that, the high dose group was lower than that in middle dose and low dose group. Pathological observ</p><p>　　Keywords: copper poisoning， pathological changes， rat</p><p><

8、b>　　目錄</b></p><p><b>　　1 前言1</b></p><p><b>　　2 材料與方法3</b></p><p>　　2.1 試驗(yàn)材料3</p><p>　　2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：3</p><p>　　2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑

9、和儀器：3</p><p><b>　　2.2實(shí)驗(yàn)方法3</b></p><p>　　2.2.1 動(dòng)物分組3</p><p>　　2.2.2 臨床觀察3</p><p><b>　　3 結(jié)果與分析6</b></p><p>　　3.1 臨床癥狀與病理變化6<

10、/p><p>　　3.2 病理組織學(xué)變化6</p><p><b>　　4 討論8</b></p><p><b>　　5 結(jié)論9</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn):10</b></p><p><b>　　致 謝12&l

11、t;/b></p><p>　　圖 01圖 02 肝細(xì)胞呈蜂窩狀4</p><p>　　圖 2 紅髓血竇擴(kuò)張充血5</p><p>　　圖 4 肌纖維腫脹和細(xì)微顆粒7</p><p><b>　　1 前言</b></p><p>　　銅元素普遍存在于動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)，是所有

12、低等動(dòng)物和脊椎動(dòng)物必需的微量元素之一。自 1925 年被首次報(bào)道后，銅作為動(dòng)植物營養(yǎng)必需微量元素的作用逐漸被人們所認(rèn)識(shí)并不斷被研究[1]。研究表明，在飼料中添加適量的銅，可明顯提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。銅的這種特殊生物學(xué)作用，在現(xiàn)代畜牧業(yè)中已被廣泛應(yīng)用，并取得了較好的經(jīng)濟(jì)效益。近年來，由于飼料中銅的過量添加而導(dǎo)致的動(dòng)物中毒現(xiàn)象常有時(shí)有發(fā)生[4]。許多銅鹽如硫酸銅、次醋酸銅、碳酸銅、氯化銅、氧化亞銅、硝酸銅、石油酸銅、三氯酚銅等作為沙蟲劑、浸種

13、劑、殺真菌劑、驅(qū)蟲劑、滅螺劑或木材防腐劑[2]被廣泛的使用也常常給家畜養(yǎng)殖帶來巨大的潛在危險(xiǎn)，動(dòng)物誤食銅鹽后就會(huì)發(fā)生銅中毒。此外，一些植物含有吡咯類生物堿的有毒植物 (如三葉草、千里光、和天蕎萊屬植物) 能夠增強(qiáng)銅與肝臟的親和力、使銅在肝臟蓄積而不能正常排出；另一些含有肝毒性生物堿的植物會(huì)造成動(dòng)物肝細(xì)胞的損傷，從而使銅在肝臟的代謝出現(xiàn)異常，也能使動(dòng)物體內(nèi)蓄銅過多而中毒[3]。雖然動(dòng)物每日攝入銅的含量沒有達(dá)到中毒劑量，但是動(dòng)物日糧中鉬的含

14、量非常低或日糧中銅/鉬的比值過高 (大于10)，也能造成銅在動(dòng)物肝臟內(nèi)蓄積</p><p>　　已有的研究表明，各種動(dòng)物對銅的毒性作用和銅的敏感性存在有較大的差異[10]。綿羊敏感性最高，反芻動(dòng)物次之，高于其它動(dòng)物[6]；中毒劑量的報(bào)道也不經(jīng)相同：羔羊 25-50 mg/kg，綿羊 20-110mg/kg[15]，奶牛 200-880 mg/kg[7]，奶牛 200mg/kg[8]，蛋雞 500mg/kg，豬為

15、250-400 mg/kg [17]；兔 200 mg/kg[16]；馬 800 mg/kg，大鼠 1000 mg/kg，肉雞300 mg/kg[11]，鴨 300mg/kg[9]，鵝 100 mg/kg[2]。動(dòng)物銅中毒的研究主要集中于中毒劑量，臨床表現(xiàn)，病理變化，血液生化指標(biāo)以及發(fā)病機(jī)理等方面，在蓄積至一定階段后，會(huì)突然出現(xiàn)嚴(yán)重的溶血，肝腎損傷，并最終死亡[14]。動(dòng)物發(fā)生銅中毒時(shí)，6-磷酸葡萄糖脫氫酶，谷胱甘肽過氧化物酶活性降低，

16、而丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，乳酸脫氫酶等酶活性升高[16]。</p><p>　　動(dòng)物的銅中毒習(xí)慣上分為急性中毒和慢性中毒。急性銅中毒主要以明顯的胃腸炎為臨床癥狀，表現(xiàn)為惡心、流涎、腹瀉、劇烈腹痛[13]。慢性銅中毒主要以溶血癥狀為主要臨床癥狀，據(jù)國內(nèi)報(bào)道，王幼名和王長青等做了豬中毒的研究，臨床表現(xiàn)如下性中毒時(shí)精神沉郁、食欲廢絕、嘔吐、腹痛、腹瀉，肌肉松弛，排黑色稀糞，胃與十二指腸粘膜見有出血、潰瘍

17、、壞死病變，肝臟腫大呈土黃色[5]。徐善良和楊云林等做了山羊的銅中毒研究，具體癥狀如下：銅中毒時(shí)病理剖檢變化以胃腸粘膜糜爛脫落、潰瘍、出血為特征[12]。黨曉鵬和齊長明等做了綿羊的研究，具體癥狀如下：心外膜出血，肝臟腫大膽囊擴(kuò)張，腎臟表面有出血點(diǎn)[15]。舒港亮，翟國東和朱秀琴做了雞的研究，結(jié)果如下：急性銅中毒最后痙攣而死，中毒臨床癥狀:拉稀，縮頭伏地.食欲廢絕，精神沉郁，腿部肌肉麻痹，呼吸困難，剖檢可見肝臟腫大，呈塊狀土黃色胃粘膜充血

18、，其中十二指腸較嚴(yán)重，膽囊腫大 [11]。</p><p>　　本實(shí)驗(yàn)通過研究小鼠銅中毒，了解和觀察銅離子對小鼠心、肝、脾、肺、腎的影響，從而研究銅中毒對機(jī)體器官組織的病理損害，探討發(fā)病機(jī)理，為臨床診斷和基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)。</p><p><b>　　2 材料與方法</b></p><p><b>　　2.1 試驗(yàn)材料</b

19、></p><p>　　2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：</p><p>　　昆明種小白鼠 (24 只，體重 18g-22g)，購買于湖南吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。飼養(yǎng)室溫度 23℃～27℃，每天光照 12 h。</p><p>　　2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器：</p><p>　　乙醇 (湖南江虹試劑有限公司)、二甲苯 (上海實(shí)驗(yàn)試劑有限公司

20、)、蘇木素 (上海標(biāo)本模型廠)、伊紅染色素 (上海試劑三廠)、切片石蠟 (上海標(biāo)本模型廠)、中性樹膠 (上海標(biāo)本模型廠)、福爾馬林、碳酸鋰飽和液等。</p><p>　　Motic奧林巴斯顯微攝影系統(tǒng)、YD202型石蠟切片機(jī)。</p><p><b>　　2.2實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　2.2.1 動(dòng)物分組</p>&

21、lt;p>　　室內(nèi)暫養(yǎng)一周后，試驗(yàn)小鼠被隨機(jī)分成四組：對照組、低劑量組 (50mg/kg)，中劑量組 (100mg/kg)、高劑量組 (200mg/kg)。硫酸銅溶液經(jīng)口灌胃小鼠，對照組以等量生理鹽水代替硫酸銅。每天中午進(jìn)行灌胃，不限飲水，自由采食，共連續(xù)灌胃 15 d。試驗(yàn)期間，溫度在 22℃～26℃，光照 12 h。</p><p>　　2.2.2 臨床觀察</p><p>　　

22、試驗(yàn)期間每日進(jìn)行臨床觀察，紀(jì)錄臨床癥狀。在試驗(yàn)進(jìn)行的第 10 天和11天，高劑量組有 3 只小白鼠死亡，中劑量組在第 14 天有 1 只小白鼠死亡。死亡的小白鼠立即當(dāng)天取其臟器，余下的小白鼠在試驗(yàn)期滿時(shí)采用人工脫頸致死法進(jìn)行剖殺，并取心、肝、脾、肺、腎進(jìn)行觀察，之后放入福爾馬林固定液中固定。圖 01圖 02 肝細(xì)胞呈蜂窩狀</p><p>　　圖 01圖 02 肝細(xì)胞呈蜂窩狀</p>&

23、lt;p>　　2.2.3 病理組織學(xué)觀察</p><p>　　(1) 取材：取病變與正常組織的交界處的實(shí)質(zhì)臟器 (心、肝、脾、肺、腎)。</p><p>　　(2) 固定：將所取病料置 10% 的福爾馬林固定液中固定 48 h,在固定 6h小時(shí)后，對組織塊進(jìn)行修塊。將修好的組織塊放于白色的小包埋盒中，按設(shè)定好的程序進(jìn)行脫水、透明、浸蠟，其具體的程序步驟為水洗→80% 酒精 1h→90

24、%酒精 1.5h→95% 酒精 2h→95%酒精 2h→100%酒精 1h→100%酒精 1.5h→100%酒精 1.5h→二甲苯 0.5h→二甲苯 1h→石蠟 2h→石蠟 2h。</p><p>　　(3) 包埋：將小包埋盒的蓋子去掉，將組織塊從包埋盒中用小鑷子輕輕取出，取出時(shí)注意仍將要切的面朝下，平放在已滴滿石蠟的不銹鋼包埋盒的中央位置，這一點(diǎn)非常重要，否則會(huì)將要切的面切不完整，放好組織塊后，將白色的小包盒底

25、部鑲嵌在不銹鋼包埋的上方，再在其上滴滿石蠟。隨后將已包埋好的不銹鋼小包埋盒冷卻使其凝固。當(dāng)組織塊已完全與石蠟?zāi)探Y(jié)合在一起時(shí)，將不銹鋼包埋盒輕輕從要切的組織塊底部輕輕去掉，將留有組織塊的白色小包埋盒側(cè)面的石蠟輕輕刮去。</p><p>　　(4) 切片：將保留在白色小包埋盒的組織塊固定在石蠟切片機(jī)上，先行修片，當(dāng)修到完整的組織時(shí)，將切片的厚度調(diào)到 5-7μm，再行切片，切片時(shí)注意用力均勻，進(jìn)行連續(xù)切片。</

26、p><p>　　(5) 展片、攤片與烘片：將切好的組織薄片用毛筆刷輕輕挑起，同時(shí)用小鑷子輕輕將切好的組織薄片的起始部夾起，放入水浴鍋展片，溫度為 45-50℃。溫度過高可將切片熔化，過低則切片不宜伸展。切片放入展片槽中時(shí)，立即用小鑷子輕輕在其上面將其有皺縮的地方展平，此時(shí)將已準(zhǔn)備好的載玻片垂直伸入液面下在載玻片的 1/3 處將薄層切片緩緩澇起，切片可自動(dòng)貼附于載玻片上，將載玻片放在切片架上，再將其放在攤片架上。最后再

27、將切片架移到烘片箱中烘干(烘片箱中的溫度為 76℃)，一般持續(xù)時(shí)間為 40min。</p><p>　　(6) 脫蠟、染色與封藏：將放有載玻片的染色架放入二甲苯 Ⅰ 中浸泡 10 min →二甲苯 Ⅱ 中浸泡 10min (以充分脫蠟)→100% 酒精 5min→100% 酒精 5 min→95% 酒精5 min →85% 酒精5 min→80% 酒精 5 min→蘇木素染液染色5min→水洗（將切片架放入事先準(zhǔn)

28、備好的清水中沖洗5 min）→1%鹽酸酒精分化（這一步驟相當(dāng)關(guān)鍵，它的主要目的是脫去胞漿的著色，時(shí)間過長可使胞核的著色脫去。）放進(jìn)去后要迅速取出，時(shí)間一般掌握在4-6 秒鐘→自來水緩緩沖洗15-30 min →伊紅染液染色1-3 分鐘→95%酒精3s→ 100%酒精 3s→100% 酒精 3s→二甲苯 Ⅰ 3s →二甲苯 Ⅱ 3s。至此 H.E 染色過程全部結(jié)束，將染色架上的載玻片取出，用干凈的紗布將二甲苯液體蘸去，并在上面滴上中性樹膠

29、，將蓋玻片封好，貼上標(biāo)簽作好標(biāo)記后放入切片盒中,觀察各個(gè)臟器的病理變化。圖 3 紅髓血竇擴(kuò)張充血</p><p>　　圖 3 紅髓血竇擴(kuò)張充血</p><p><b>　　3 結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1 臨床癥狀與病理變化</p><p>　　高劑量組臨床表現(xiàn)食欲廢絕，精神沉郁，縮頭，全身震顫，臥地不

30、起，排黑褐色糞，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，質(zhì)脆易碎，膽囊膨大充滿藍(lán)綠色膽汁，死亡病例還可見腎輕度腫大。中等劑量組表現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色。低劑量組的無明顯的變化。</p><p>　　3.2 病理組織學(xué)變化</p><p>　　肝臟：低劑量組和中劑量組肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒，中央靜脈、肝竇以及間質(zhì)小血管內(nèi)充滿紅

31、細(xì)胞。高劑量組肝臟出現(xiàn)明顯顆粒變性和脂肪變性，肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆?；驁A形空泡，細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀 (圖1)。部分病例可見局灶性壞死，內(nèi)肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞胞漿紅染，細(xì)胞核出現(xiàn)固縮和碎裂 (圖2)。中央靜脈內(nèi)紅細(xì)胞不清楚，只見紅染絲網(wǎng)狀物質(zhì)充滿血管。</p><p>　　心臟：在中劑量組和高劑量組可見心肌纖維腫脹，出現(xiàn)許多紅染的細(xì)微顆粒(圖3)。心肌纖維間毛細(xì)血管內(nèi)充滿紅細(xì)胞。</p&

32、gt;<p>　　脾臟：在中劑量組和高劑量組可見脾臟白髓區(qū)變小，中央淋巴細(xì)胞和邊緣區(qū)淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，網(wǎng)狀細(xì)胞增生，紅髓血竇擴(kuò)張充血（圖4）。高劑量組部分病例脾臟白髓淋巴細(xì)胞出現(xiàn)壞死。</p><p>　　肺：在中劑量和高劑量組中小血管和毛細(xì)血管明顯擴(kuò)張，內(nèi)充滿紅細(xì)胞 (圖5)。高劑量組中部分肺泡腔內(nèi)有少量紅染漿液，部分肺泡擴(kuò)張出現(xiàn)肺泡性肺氣腫(圖6)。</p><p>　　

33、腎臟：低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄（圖7），間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型（圖8）。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。圖 4 肌纖維腫脹和細(xì)微顆粒</p><p>　　圖 4 肌纖維腫脹和細(xì)微顆粒</p><p><b>　　4 討論</

34、b></p><p>　　本實(shí)驗(yàn)采用三組不同濃度的銅對小白鼠進(jìn)行攻毒，分別為低劑量、中劑量和高劑量，時(shí)間為半個(gè)月。高劑量組小鼠在試驗(yàn)期間有死亡現(xiàn)象，臨床病理癥狀表現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，縮頭，全身震顫，臥地不起，排黑褐色糞，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，質(zhì)脆易碎，膽囊膨大充滿藍(lán)綠色膽汁，死亡病例還可見腎輕度腫大。中等劑量變現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，

35、低劑量眼觀無明顯變化。本實(shí)驗(yàn)所獲結(jié)果為動(dòng)物銅中毒的系統(tǒng)研究提供了動(dòng)物模型，也可供臨床或發(fā)病現(xiàn)場診斷和治療銅中毒做參考，從小白鼠發(fā)病時(shí)間、病程經(jīng)過、死亡情況的綜合分析，作者認(rèn)為銅中毒低劑量和中劑量的引起慢性銅中毒。銅中毒高劑量引起小白鼠的急性銅中毒，表明銅的中毒病理表現(xiàn)因動(dòng)物種類和銅中毒劑量各異。</p><p>　　病理形態(tài)學(xué)的研究表明，小白鼠銅中毒病變靶器官是肝臟、腎臟、消化道和免疫器官，與銅鹽的刺激和腐蝕作用

36、，銅在體內(nèi)組織分布及蓄積特點(diǎn)和銅排出密切相關(guān)。由于銅鹽具有強(qiáng)烈的刺激和腐蝕作用，銅鹽進(jìn)入消化道便引起劇烈反應(yīng)和造成嚴(yán)重的病理損害，表現(xiàn)為肌胃角質(zhì)層增厚、龜裂乃至呈絨毛狀，腸黏膜上皮變性壞死，腸絨毛斷裂，這是銅鹽直接作用于胃腸道黏膜的結(jié)果，導(dǎo)致胃腸功能受損，銅被吸收進(jìn)入體內(nèi)后主要在肝臟蓄積，隨著時(shí)間的增長銅的蓄積量大幅度增加。銅的蓄積一旦超過肝臟對其的利用，在釋放入血之前便對肝細(xì)胞造成直接的損害作用，引起肝細(xì)胞腫大，顆粒變性和脂肪變性，肝

37、細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆?；驁A形空泡,細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀。至于臟臟中蓄積的銅大量釋放入血引起血銅升高時(shí)，肝銅含量仍未降低，且表現(xiàn)出極強(qiáng)的時(shí)間-劑量效應(yīng)，故肝銅可作為評價(jià)銅狀態(tài)的一個(gè)敏感指標(biāo)。肝銅蓄積到一定程度時(shí)則大量釋放入血引起血銅升高，同時(shí)。腎銅濃度也隨之升高，造成腎小管上皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致腎功能受損。</p><p><b>　　5 結(jié)論</b></p><

38、;p>　　本研究結(jié)合當(dāng)前銅中毒的研究進(jìn)展，從病原學(xué)、臨床癥狀以及中毒后對機(jī)體各臟器的結(jié)構(gòu)的影響等多角度詳細(xì)的闡述了人工復(fù)制銅中毒的病理形態(tài)學(xué)，為人工復(fù)制銅中毒的預(yù)防及診斷提供了極其重要的技術(shù)依據(jù)。</p><p>　　發(fā)生銅中毒時(shí)，造成了廣泛性實(shí)質(zhì)臟器的損傷和出血，尤其是肝臟、腸道和腎臟的病理性損傷更明顯，肝臟：低劑量組和中劑量組肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒，中央靜脈、肝竇以及間質(zhì)小血管內(nèi)充滿紅細(xì)胞

39、。高劑量組肝臟出現(xiàn)明顯顆粒變性和脂肪變性，肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆粒或圓形空泡,細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀，部分病例可見局灶性壞死，內(nèi)肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞胞漿紅染，細(xì)胞核出現(xiàn)固縮和碎裂，中央靜脈內(nèi)紅細(xì)胞不清楚，只見紅染絲網(wǎng)狀物質(zhì)充滿血管。腎臟：腎臟：低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄，間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)

40、構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。因此在銅離子作為飼料的添加劑，要確定好銅的含量。</p><p><b>　　參考文獻(xiàn):</b></p><p>　　[1] 王長青，李靖愛.宋茜.育成豬微量元素銅中毒的診治[J].當(dāng)代畜牧，2003，4(3):31-33.</p><p>　　[2] 王宗元.動(dòng)物營養(yǎng)代謝病和中毒病學(xué)[J]

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47、es[J] .Agriculture-Practice.2005.17 :3- 4,36 -40.</p><p><b>　　致 謝</b></p><p>　　論文完成的前提是李德亮老師給我提供了舒適的工作、學(xué)習(xí)環(huán)境，并給予我悉心的關(guān)懷與指導(dǎo)，在這表示衷心地感謝。老師認(rèn)真負(fù)責(zé)的工作態(tài)度、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)闹螌W(xué)風(fēng)格，使我深受啟發(fā)。論文的寫作中，受病理教研室的老師及師兄師姐們