豬DCD供胰不同熱缺血時(shí)間的病理變化.pdf

1、糖尿病已成為嚴(yán)重威脅人類健康的重大公共衛(wèi)生問題，患病率逐年增加，經(jīng)過人們不懈努力，胰腺/胰島移植已成為治療糖尿病的有效手段，但由于供者的短缺，限制了器官移植手術(shù)的大量開展，同時(shí)也造成相當(dāng)一部分病人由于無法及時(shí)施救而在等待移植期間死亡。目前，心死亡供者(donors of cardiac death，DCD)已成為國(guó)際上公認(rèn)的供者三大來源之一。在我國(guó)，DCD是供胰的主要來源。但供胰不可避免地經(jīng)歷了一段熱缺血損傷，熱缺血時(shí)間指心臟停搏至低溫

2、灌注開始前的一段時(shí)間，缺血時(shí)間與灌注保存方法均影響移植并發(fā)癥的發(fā)生和預(yù)后。因此，進(jìn)一步尋找更加有效的供胰保護(hù)措施，是當(dāng)今胰腺移植研究領(lǐng)域亟待解決的問題。
　　 目的:
　　 建立豬DCD模型，觀察不同熱缺血時(shí)間DCD供胰的病理變化。
　　 方法:
　　 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選取杜洛克大白長(zhǎng)白三元雜交豬(n=10)。心臟死亡模型采用窒息法。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉為復(fù)合麻醉:誘導(dǎo)麻醉采用速眠新Ⅱ(0.1ml/kg)聯(lián)合丙泊酚(2m

3、g/kg)鎮(zhèn)靜催眠。氣管插管后丙泊酚聯(lián)合羅庫(kù)溴銨維持麻醉。呼吸機(jī)設(shè)置:潮氣量10mL/kg，呼吸頻率15次/分。手術(shù)過程中保持中心體溫在37.8-38.3℃，維持PaCO2在35-45mmHg，氣道峰壓(Peak inspiratory Pressure，PIP)＜25cm H2O。手術(shù)過程持續(xù)監(jiān)測(cè)心率、有創(chuàng)動(dòng)脈壓、中心靜脈壓、末梢血氧飽和度。基礎(chǔ)數(shù)據(jù)穩(wěn)定后，在深度麻醉下撤除呼吸機(jī)，PaO2急劇下降，PaCO2逐漸增加，出現(xiàn)高碳酸血癥，

4、導(dǎo)致反射性高血流動(dòng)力學(xué)改變，5min內(nèi)出現(xiàn)反應(yīng)性血壓升高和心動(dòng)過速，隨后出現(xiàn)血壓逐漸下降、心臟停跳。撤除呼吸機(jī)后11-28min后死亡，平均時(shí)間為19.25min。撤除呼吸機(jī)后30分鐘內(nèi)每5分鐘取胰腺組織，切取后器官10％甲醛固定，蠟塊包埋，行HE染色觀察病理改變情況。
　　 結(jié)果:
　　 出血:0-10min無出血，10min開始，血管內(nèi)可見微小血栓形成，至20min，血管內(nèi)可見紅細(xì)胞聚集，但無出血，25min開始有出

5、血傾向，血管壁完整性破壞，30min，出血突然加重，紅細(xì)胞成片密集分布，廣泛小葉間出血。水腫:0-10min無水腫，10min輕度水腫，15-30min中度水腫，部分細(xì)胞胞體擴(kuò)大，胞漿淡染，細(xì)胞界限不清，水腫明顯。腺細(xì)胞破壞:0-15min未見腺細(xì)胞破壞，從20min開始，破壞逐漸加重，30min破壞嚴(yán)重，見胰腺結(jié)構(gòu)破壞，腺泡結(jié)構(gòu)消失，細(xì)胞解離。炎癥:炎癥反應(yīng)在熱缺血0-30min內(nèi)均不明顯，未見炎性細(xì)胞浸潤(rùn)。
　　 討論:

6、r>　　 通過豬DCD供胰不同熱缺血時(shí)間的病理變化，可以看出，DCD供胰在不可避免的熱缺血時(shí)間內(nèi)，出血，水腫，腺細(xì)胞破壞都隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，進(jìn)行性加重。如何避免器官的熱缺血損失，提高器官利用率，讓器官移植造福于更多人，是我們接下來研究的重點(diǎn)。低溫機(jī)械灌注可以連續(xù)給臟器細(xì)胞提供基本必需的底物，例如糖，氨基酸，核苷酸，氧等，可以持續(xù)處理毒性代謝產(chǎn)物，阻斷生物降解的過程。同單純低溫保存相比，低溫機(jī)械灌注保存主要優(yōu)點(diǎn)是能持續(xù)給臟器細(xì)胞提供維持其