甘草酸單胺鹽制備工藝研究[畢業(yè)設(shè)計+開題報告+文獻綜述]

1、<p>　　本科畢業(yè)設(shè)計(論文)</p><p><b>　?。ǘ?屆）</b></p><p>　　甘草酸單胺鹽制備工藝研究</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級 生物工程 </p&

2、gt;<p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p>　　摘要:本文用甘草酸粗品為原料合成甘草酸單胺鹽，通過單因素試驗和正交試驗對其最佳工藝條件

3、進行研究。運用液相色譜法對甘草酸（單胺鹽）進行定性和定量測定。</p><p>　　甘草酸單胺鹽合成前，選擇了95％乙醇:丙酮=2:1(V/v)做為溶解甘草酸的溶劑，超聲溶解2次，每次的料液比為l:10，即可使甘草酸全部溶出。在甘草酸單胺鹽的合成上，確定甘草酸三胺鹽和甘草酸單胺鹽合成的pH值分別為7.5和4.5。</p><p>　　關(guān)鍵詞: 甘草酸單胺鹽 合成 正交試驗 </p&g

4、t;<p>　　Ammonium Glycyrrhetate synthesis and Technology</p><p>　　Abstract: This paper uses glycyrrhizic acid crude products as raw materials synthesis glycyrrhizic acid single ammonium salt,and to stu

5、dy the optimum extraction process of polysaccharide by a single factor experiment and orthognal experiment in different experimental groups.Using liquid chromatographic method for glycyrrhizic acid (single ammonium salt)

6、 for qualitative and quantitative determination.</p><p>　　Before the synthesis of MAG，95％ ethanol and acetone(v：v=2：1)were made as the extraction solvent of the GA.GA was extracted twice under ultrasonic tre

7、atment(each time the ratio of solid to liquid was l：10).The pH of synthesis of triammonium glycyrrkizinate(TAG) and MAG were 7.5 and 4.5.</p><p>　　Keywords: monoammonium glycyrrhizinate(MAG); synthesis;ort

8、hognal experiment</p><p><b>　　目 錄</b></p><p><b>　　摘要I</b></p><p>　　AbstractII</p><p><b>　　1 緒論1</b></p><p>　　1.1

9、 選題的背景和意義1</p><p>　　1.2 甘草酸純化的研究進展1</p><p>　　1.2.1 泡沫分離法1</p><p>　　1.2.2 反復(fù)結(jié)晶法1</p><p>　　1.2.3 溶劑萃取法2</p><p>　　1.2.4 樹脂法2</p><p>　　1.2.

10、5 混合法2</p><p>　　1.2.6 超過濾法2</p><p>　　1.2.7 雙相萃取法3</p><p>　　1.3 甘草酸的藥理作用3</p><p>　　1.3.1 抗炎3</p><p>　　1.3.2 抗?jié)?</p><p>　　1.3.3 抗病毒3<

11、;/p><p>　　1.3.4 抗癌3</p><p>　　1.3.5 抑菌3</p><p>　　1.3.6 免疫調(diào)節(jié)作用3</p><p><b>　　2 實驗部分5</b></p><p>　　2.1 材料和試劑5</p><p>　　2.1.1 原材料5

12、</p><p>　　2.1.2 試劑5</p><p>　　2.1.3 儀器5</p><p>　　2.2 實驗方法5</p><p>　　2.2.1 實驗流程5</p><p>　　2.2.2 甘草酸（單胺鹽）的定量測定 HPLC法6</p><p>　　2.2.3 甘草酸的提取

13、6</p><p>　　2.2.4 正交試驗7</p><p>　　2.2.5 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定8</p><p>　　2.2.6 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定8</p><p>　　3 結(jié)果與分析9</p><p>　　3.1 甘草酸的溶解9</p><p>　

14、　3.1.1 溶解溶劑的選擇結(jié)果9</p><p>　　3.1.2 料液比的選擇結(jié)果9</p><p>　　3.1.3 超聲時間的選擇結(jié)果10</p><p>　　3.1.4 溶解次數(shù)的選擇結(jié)果10</p><p>　　3.2 超聲波法提取甘草酸的正交實驗結(jié)果12</p><p>　　3.3 合成甘草酸三

15、胺鹽的pH值的確定13</p><p>　　3.4 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定14</p><p>　　3.5 小結(jié)14</p><p><b>　　4 結(jié)論15</b></p><p><b>　　參考文獻16</b></p><p>　　致謝錯誤!未

16、定義書簽。</p><p><b>　　1 緒論</b></p><p>　　1.1 選題的背景和意義</p><p>　　甘草作為一種集藥用、飼用、防風(fēng)固沙為一體的草原植物，其身價越來越高。目前世界上能出口甘草的國家只有伊朗、伊拉克、俄羅斯、阿富汗、±耳其和中國。兩伊戰(zhàn)爭以來，我國甘草更是倍受關(guān)注。目前，我國甘草出口30多個國家

17、和地區(qū)，每年出口量達幾十萬噸，仍然不能滿足國際市場的需求，僅日本年需求就達幾萬噸之多，韓國年需求量也達到萬噸以上，我國自己年需求甘草浸膏也有幾萬噸。我國藥用甘草及其制品主要用于出口創(chuàng)匯，以原材料和附加值低的粗加工產(chǎn)品為主，基本沒有高附加值的精加工產(chǎn)品的出口。日本以低價購買我國的甘草及粗加工產(chǎn)品，將其加工成精品后再以高價出口歐美及東南亞等國，所以很有必要對甘草進行深加工，開發(fā)具有多種藥用功能的衍生物，提高資源的利用率和附加值。而且甘草產(chǎn)區(qū)

18、廣泛分布于我國西北、華北、東北地區(qū)，甘草的深度開發(fā)不但對改變食用甜素的結(jié)構(gòu)、增強人民健康有好處，還能為“三北”廣大貧困地區(qū)開發(fā)鄉(xiāng)鎮(zhèn)工業(yè)，具有重要的經(jīng)濟和社會意義。</p><p>　　甘草酸的許多金屬鹽人體均可適當(dāng)吸收，不易造成元素的積蓄中毒，常被用來配制成健脾開胃、止咳化痰、順氣止喘、治療慢性肝炎、降低血脂的良藥[1]。且能與多種生物堿、抗生素、氨基酸等生成復(fù)鹽或復(fù)方制劑，具有協(xié)同、增溶，增加藥物穩(wěn)定性、提高生

19、物利用率及降低毒副作用的功效[2]。</p><p>　　有關(guān)甘草酸單胺鹽精制方法的報道很多，但由于甘草中除甘草酸外，還含有大量的物理化學(xué)性質(zhì)相近的有色物質(zhì)，苦澀味物質(zhì)及其它成分。如甘草查耳酮、甘草素、甘草異黃酮及阿魏酸等，在提取純化過程中較難簡單的除凈。經(jīng)典的方法有重結(jié)晶法，但此方法產(chǎn)品純度不高，收率偏低。因此本文想進一步研究甘草酸單胺鹽，提高其純度和收率，創(chuàng)造其更大的經(jīng)濟價值。</p><

20、p>　　1.2 甘草酸純化的研究進展</p><p>　　1.2.1 泡沫分離法[3]</p><p>　　泡沫分離是基于表面活性的分離技術(shù)口 。它已被成功的用于礦物浮選、廢水處理以及蛋白質(zhì)和表面活性劑的濃縮。泡沫分離的設(shè)備簡單，造價低廉，即使在工業(yè)規(guī)模上，完成一次泡沫分離的時間也比典型的色譜分離少的多。某些草藥中的三萜皂苷[4]比如甘草酸、人參皂苷具有表面活性，因此它們可以用泡

21、沫分離法來純化富集。</p><p>　　1.2.2 反復(fù)結(jié)晶法[5]</p><p>　　甘草的水浸提液濃縮后滴入硫酸酸析，加丙酮和氫氧化鉀乙醇溶液溶解提取得甘草酸三鉀鹽，然后將甘草酸三鉀鹽溶于95％以上的冰醋酸中，析出甘草酸單鉀鹽，提取率可達95％以上。但此方法步驟較多。</p><p>　　1.2.3 溶劑萃取法[5]</p><p&g

22、t;　　甘草酸浸提液用鹽酸調(diào)節(jié)pH至1.5，磷酸三丁酯、異辛醇、正己醇、異戊醇等萃取，靜置后，采用pH12.0的水反萃，活性炭脫色，酸化沉淀后得到精制甘草酸。王世潤等將甘草的提取液濃縮，95％的乙醇沉淀除去植物蛋白、多糖后，用濃硫酸調(diào)pH值，使甘草酸沉淀析出，用60～70℃的稀乙醇重結(jié)晶，得到含量大于65％的甘草酸。</p><p>　　1.2.4 樹脂法[5]</p><p>　　由于

23、甘草酸分子中含有3個羧基而呈弱酸性，所以可以吸附在陰離子交換樹脂上，再用弱堿性物質(zhì)洗脫。日本專利以弱堿樹臘DuoliteA 374純化甘草酸，2％氨水洗脫即得產(chǎn)品。但離子交換樹脂法處理量小，提取率低。大孔樹脂法是一種較為經(jīng)濟實用的方法，它具有吸附性能好、效率高、再生容易等優(yōu)點。其關(guān)鍵是樹脂對甘草酸及雜質(zhì)的吸附能力差別。雜質(zhì)如黃酮甙等可被吸附且吸附容量大，而甘草酸分子中由于有兩個葡萄糖醛酸，所以親水性較強而僅呈弱吸附，脫附時首先洗脫下來，

24、從而得以與雜質(zhì)分開。傅冬和等用DMl30大孔吸附樹脂吸附，10％的乙醇溶液洗脫，得到純度高達94.68％的甘草酸，得率為35.31％。崔杏雨等先用酸沉淀法制得純度為40％的粗制甘草酸，然后通過AB一8大孔樹脂，依次用水、10％乙醇洗脫，洗脫液加適量的活性炭于冰醋酸中脫色重結(jié)晶，得純度90％以上的無色產(chǎn)品，收率達70％--80％。姚德佳等將用DA-201型大孔樹脂吸附，再以水或低級醇洗脫，得純度為91％的甘草酸，得率為45.7％；若再過一

25、次DA20I樹脂，可得純度為98.3％的精制甘草酸。日本專利報道，將粗甘草酸過XAD4(或XAD8、XADll)樹脂</p><p>　　20％甲醇水溶液洗脫可得純度為82.3％的甘草酸。雖然大孔樹脂的分離效果較好，產(chǎn)品的品質(zhì)很高，但在操作過程中使用大量的乙醇作為洗脫劑和再生劑，且低濃度的乙醇回收成本高，造成一定的浪費[6]。</p><p>　　1.2.5 混合法[5]</p&g

26、t;<p>　　潘福生等將酸析、聚酰胺吸附和國產(chǎn)732強酸型陽離子交換樹脂結(jié)合制得高純度的可用于靜脈注射原料的甘草酸結(jié)晶(99.5％-100％)。</p><p>　　1.2.6 超過濾法</p><p>　　日本專利[7]將36.6％粗甘草酸用pH9.8的氨水溶解，通過NTU一2000在2kg／cm壓力下進行超濾，除去分子量100000的雜質(zhì)，得到52.3％的甘草酸。馬明

27、等采用超濾與大孔樹脂吸附聯(lián)合工藝路線提取甘草酸和甘草黃酮類化合物。但超濾法處理量有限，不易進行大規(guī)模生產(chǎn)，定期更換膜增加了操作費用。</p><p>　　1.2.7 雙相萃取法</p><p>　　雙水相萃取技術(shù)是指親水性聚合物溶液在一定條件下可以形成雙水相，當(dāng)被提取物進入雙水相體系后，由于其表面性質(zhì)、電荷作用和各種力(如疏水鍵、氫鍵和離子鍵等)的存在以及環(huán)境因素等的影響，使其在上下相中

28、的濃度不同而達到分離目的?；羟錥8]等采用環(huán)氧乙烷一環(huán)氧丙烷共聚物(Eoeo)／磷酸鉀(KHP)體系對甘草酸單胺鹽進行提取純化，最大得率為68.4％。雙水相萃取技術(shù)的優(yōu)點是有機溶劑用量少，操作簡單。帶來的問題是使用磷酸鹽對環(huán)境造成了一定的污染。</p><p>　　反復(fù)結(jié)晶法、溶劑萃取法、樹脂法、聚酰胺法、超濾法等這些方法可以制各得到純度較高的甘草酸， 但是工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)成本很高，人工耗時多，而且要使用大量的有機溶

29、劑，對環(huán)境造成污染。以更快速更廉價的方法比如泡沫分離作為柱色譜的前富集方法或柱色譜后的后純化則是一個有效的途徑。</p><p>　　1.3 甘草酸的藥理作用 [9-11] </p><p><b>　　1.3.1 抗炎</b></p><p>　　Abe等用甘草酸治療感染了球蛋白誘導(dǎo)的肝炎的小鼠發(fā)現(xiàn)，與空白對照組相比，甘草酸可以促進抗原肝

30、樹枝狀細胞產(chǎn)生interleukin(IL)-10，從而減輕炎癥。含甘草酸的甘草提取物可以有效治療過敏性皮炎如濕疹、瘙癢癥和皮膚囊腫。</p><p>　　1.3.2 抗?jié)?lt;/p><p>　　甘草酸及其衍生物可以抗由布洛芬引起的大鼠胃潰瘍。</p><p>　　1.3.3 抗病毒</p><p>　　甘草酸在臨床上已被用于治療慢性肝炎

31、。甘草酸在體外可明顯抑制HIV陽性病人血單核細胞中HIV復(fù)制。甘草酸還可以減少感染了致死劑量流感病毒的小鼠的發(fā)病率和死亡率。Cinatl等比較了三唑核苷、6-azauridine、菌酚酸、吡唑呋哺菌素和甘草酸對兩種SARS冠狀病毒FFM一1和FFM-2的抑制，發(fā)現(xiàn)甘草酸對病毒復(fù)制的抑制最強。</p><p><b>　　1.3.4 抗癌</b></p><p>　　

32、甘草酸可以通過調(diào)節(jié)Th2細胞達到抑制B16黑素瘤向肺部轉(zhuǎn)移的效果。Shiota等發(fā)現(xiàn)甘草酸可顯著抑制二乙基亞硝胺(NDEA)介導(dǎo)的肝細胞癌。</p><p><b>　　1.3.5 抑菌</b></p><p>　　當(dāng)甘草甜素的濃度為O.51％時，可以完全抑制牙菌斑的形成。</p><p>　　1.3.6 免疫調(diào)節(jié)作用</p>

33、<p>　　甘草酸類具有非特異性免疫調(diào)節(jié)作用，主要是增強吞噬功能，還可選擇性地增強輔助性T淋巴細胞的增殖能力和活性。</p><p><b>　　2 實驗部分</b></p><p>　　2.1 材料和試劑</p><p>　　2.1.1 原材料</p><p>　　表2-1 原材料規(guī)格</p&g

34、t;<p><b>　　2.1.2 試劑</b></p><p>　　表2-2 試劑種類及規(guī)格</p><p><b>　　2.1.3 儀器</b></p><p>　　表2-3 儀器種類及規(guī)格</p><p><b>　　2.2 實驗方法</b></

35、p><p>　　2.2.1 實驗流程</p><p>　　甘草經(jīng)室溫干燥后磨成粉末，以適量水浸泡20h，過濾，濾渣再用適量水浸泡20h，過濾。合并濾液。在攪拌下緩緩滴加3 mol/L硫酸至溶液的pH為1.9.放置冰箱6h以上（可用離心），傾去上清液[12]。沉淀以適量溶劑提取數(shù)次（超聲波萃取[13]），合并提取液，滴加氨水至pH7.5--8，減壓蒸干，得糖漿狀物。趁熱加入適量冰醋酸使之溶解，

36、室溫靜置，投入甘草酸單胺鹽粗品，翌日吸濾，沉淀用少量冰醋酸洗滌1-2次，得到淺黃色或近白色甘草酸單胺鹽濕粗品。后用75%乙醇進行活性炭脫色重結(jié)晶，得白色針狀結(jié)晶，稱量。[14]</p><p>　　2.2.2 甘草酸（單胺鹽）的定量測定 HPLC法[15-16]</p><p>　　HPLC的分析條件：色譜柱：Supelcosil C柱(5um，25cm4.6mm)</p>

37、<p>　　流動相：甲醇-冰醋酸(75：25)</p><p>　　柱溫：30℃；流速：1.0mL／min</p><p>　　檢測波長：250nm</p><p>　　2.2.3 甘草酸的提取</p><p>　　2.2.3.1 提取溶劑的選擇[17]</p><p>　　準(zhǔn)確稱取100mg甘草酸粉末

38、6份，分別加入2mL以下混合溶液：</p><p>　　表2-4 不同試劑配比</p><p>　　超聲提取1 h后，離心取上清液，按2.2.2 測定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.2 料液比的選擇</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，按以下量加入溶劑溶解：</p>

39、<p>　　表2-5 溶劑體積選取</p><p>　　超聲提取1 h后，離心取上清液，按2.2.2 測定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.3超聲時間</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，分別加入上步確定的等體積溶劑，如下表格要求的超聲時間提?。?lt;/p><p>　　

40、表2-6 超聲時間選取</p><p>　　離心取上清液，按2.2.2 測定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積。</p><p>　　2.2.3.4 提取次數(shù)選擇</p><p>　　準(zhǔn)確稱取500mg甘草酸粉末5份，分別加入上步確定的等體積溶劑，按上步確定的超聲時間超生提取，溶解次數(shù)分別按如下表格：</p><p>　　表2-7 溶

41、解次數(shù)選取</p><p>　　離心取每次的上清液，合并按2.2.2 測定超聲溶解液的甘草酸的含量，得甘草酸的峰面積.</p><p>　　2.2.4 正交試驗</p><p>　　根據(jù)單因素實驗的結(jié)果，分別選取時間、料液比、溫度、提取次數(shù)作為正交試驗的考察因素（見表2-8），做L9(33)正交實驗（見表2-9）。</p><p>　　表2-

42、8 因素水平表</p><p>　　表2-9 超聲波法提取甘草多糖的正交實驗設(shè)計 </p><p>　　2.2.5 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定</p><p>　　準(zhǔn)確吸取5份20ml的按上述純化制得的甘草酸的溶解液，通過磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，攪拌過程中滴加氨水，分別滴加到pH為6.5、7、7.5、8、8.5，攪拌15 min后，離心，傾倒上清液后，于沉淀(即

43、：甘草酸三胺鹽)中馬上滴加冰醋酸至4.5后，離心，沉淀(即：甘草酸單胺鹽)加入10 mL </p><p>　　50％乙醇溶解，過濾，得甘草酸單胺鹽的醇溶液，按2.2.2色譜分析條件測定甘草酸單胺鹽的吸收峰面積，確定合成甘草酸三胺鹽的最佳ph值。</p><p>　　2.2.6 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定</p><p>　　準(zhǔn)確吸取5份20 mL的按上述純化制

44、得的甘草酸的溶解液，通過磁力攪拌器充分?jǐn)嚢?，攪拌過程中滴加氨水，滴加pH至上步所確定的pH值，攪拌15min后，離心，傾倒上清液后，于沉淀(即：甘草酸三胺鹽)中馬上滴加冰醋酸至pH分別為3.5，4，4.5，5，5.5后，離心，沉淀(即：甘草酸單胺鹽)加入10 mL 50％乙醇溶解，過濾，得甘草酸單胺鹽的醇溶液，按2.2.2色譜分析條件測定甘草酸單胺鹽的吸收峰面積，確定合成甘草酸單胺鹽的最佳pH值。</p><p>

45、;<b>　　3 結(jié)果與分析</b></p><p>　　3.1 甘草酸的溶解</p><p>　　3.1.1 溶解溶劑的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-1 不同溶劑萃取甘草酸的液相峰面積</p><p>　　圖1 溶劑對甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表3和圖1上看出，當(dāng)乙醇：丙

46、酮=2：1時，甘草酸的溶解量最多。因此，選擇此溶劑比例的乙醇丙酮混合溶液作為甘草酸的溶解溶劑。</p><p>　　3.1.2料液比的選擇結(jié)果 </p><p>　　表3-2 不同料液比萃取甘草酸的液相峰面積</p><p>　　圖2 料液比對甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表4和圖2看出不同的料液比對甘草酸的溶解有一定的影響。當(dāng)料液

47、比為1：10時，甘草酸的溶解量最大，故此采用此料液比來溶解甘草酸。</p><p>　　3.1.3 超聲時間的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-3 超聲時間對甘草酸溶解的影響</p><p>　　圖3 超聲時間對甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表5和圖3看出，隨著超聲時間的增長，甘草酸的溶解量增大，在超聲時間為60min時，達到最大

48、，隨后隨著超聲時間的增長，對甘草酸溶解的量影響不大，故采用60min的超聲時間來溶解甘草酸。</p><p>　　3.1.4 溶解次數(shù)的選擇結(jié)果</p><p>　　表3-4溶解次數(shù)對甘草酸溶解的影響</p><p>　　圖4溶解次數(shù)對甘草酸溶解的影響</p><p>　　從表6和圖4看出，溶解次數(shù)為兩次以上時，甘草酸的溶解量改變不大，故采用

49、溶解次數(shù)為2次來溶解甘草酸。</p><p>　　甘草酸單胺鹽標(biāo)準(zhǔn)品液相譜圖如下：</p><p>　　圖5 甘草酸單胺鹽的標(biāo)準(zhǔn)液相譜圖</p><p>　　圖6 合成的甘草酸單胺鹽液相譜圖</p><p>　　3.2 超聲波法提取甘草酸的正交實驗結(jié)果</p><p>　　表3-5 超聲波法提取甘草酸正交試驗結(jié)果分析&

50、lt;/p><p>　　通過表7的結(jié)果直觀分析可以看出：各因素的主次順序為料液比（A）>超聲時間（C）>溶解次數(shù)(B)，最佳提取條件是：A2B2C2。</p><p>　　3.3 合成甘草酸三胺鹽的pH值的確定</p><p>　　表3-6 pH值對甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　圖7 pH值對甘草酸三胺鹽合成的影響<

51、;/p><p>　　由于合成的甘草酸三胺鹽易水解而使成分變復(fù)雜，因此不能干燥或久置，要趁濕盡快用冰醋酸處理成甘草酸單胺鹽，根據(jù)最終的甘草酸單胺鹽的含量來確定合成甘草酸三胺鹽的最佳pH值。從圖5可以看出，pH在6.5～7.5時，甘草酸單胺鹽的含量逐漸增大，pH在7.5～8.5時，甘草酸單胺鹽的含量逐漸減小，這與合成的甘草酸三胺鹽水解了有關(guān)，因此，選用pH=7.5為合成甘草酸三胺鹽的最佳pH值。</p>&

52、lt;p>　　3.4 合成甘草酸單胺鹽的pH值的確定</p><p>　　表3-7 pH值對甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　圖8 pH值對甘草酸三胺鹽合成的影響</p><p>　　從圖6可以看出，當(dāng)往合成的甘草酸三胺鹽溶液(pH=7.5)中滴加冰醋酸時，隨著pH值逐漸變小，甘草酸單胺鹽的含量逐漸增大，當(dāng)pH=4.5時，合成的甘草酸單胺鹽含量最大，

53、pH在3.5～4.5范圍內(nèi)，隨著pH值逐漸變小，甘草酸單胺鹽含量減小，表明最后一個胺根也被氫置換生成了其他物質(zhì)，因此，選擇pH=4.5為合成甘草酸單胺鹽的最佳pH值。</p><p><b>　　3.5 小結(jié)</b></p><p>　　在甘草酸單胺鹽的合成上，首先選擇了乙醇：丙酮=2：1(V／V)做為溶解甘草酸的溶劑，超聲溶解2次，每次的料液比為1：10，超聲時間為

54、60min即可使甘草酸溶出量達到最大。在甘草酸單胺鹽合成的pH選擇上，根據(jù)pH值的摸索，在甘草酸三胺鹽的合成上pH選擇為7.5，甘草酸單胺鹽的合成上pH選擇為4.5。</p><p><b>　　4 結(jié)論</b></p><p>　　在甘草酸單胺鹽合成前，先要對甘草酸粉末進行溶解溶劑的選擇，應(yīng)滿足能去除更多的雜質(zhì)，不影響下一步的合成，通過甘草酸的溶解率，選擇的溶劑為

55、乙醇：丙酮(V：V)=2：l，進行超聲波輔助溶解提取，料液比為l：10，溶解提取兩次即可。在甘草酸單胺鹽合成條件的摸索上，通過甘草酸單胺鹽的最終得率，確定甘草酸三胺鹽和甘草酸單胺鹽合成的pH值分別為7.5和4.5。</p><p>　　本論文完成了甘草酸單胺鹽的合成工作，由于研究水平、時間、實驗條件等的限制，還有許多工作需要進一步完善和解決。</p><p><b>　　參考文獻

56、</b></p><p>　　[1] 朱秀萍.甘草及其衍生物的臨床應(yīng)用.航空航天醫(yī)藥[J],2010,21(4):580-583</p><p>　　[2] 賀小賢,陳合.甘草酸提取工藝研究帆.陜西科技大學(xué)學(xué)報,2004,22(6)I:26-29</p><p>　　[3] 付博強,李歡,劉劼,等.泡沫分離對甘草酸的純化和富集[J].現(xiàn)代中

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64、 </p><p><b>　　文獻綜述</b></p><p>　　甘草有效成分的分離與純化的研究進展</p><p><b>　　1 前言</b></p><p>　　甘草是臨床最常應(yīng)用的藥品。生甘草能清熱解毒，潤肺止咳，調(diào)和諸藥性；炙甘草能補脾益氣，臨床用量特大，出口量大。除藥用之外，食品

65、上也大量用甘草做糕點添加劑，它的甜度是蔗糖的百倍。甘草的主要有效成分為甘草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜類化合物、甘草黃酮類化合物以及甘草多糖等[1-2]。研究表明[3]，甘草酸及甘草次酸具有解毒、消炎、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤的作用，還用于防治病毒性肝炎、癌癥以及艾滋病等。</p><p>　　我國甘草資源豐富，具體

66、分布情況如下表1.1[4-5]</p><p>　　表1-1中國甘草資源的分布情況</p><p>　　甘草的主要有效成分為草酸(glycyrrhizic acid)或甘草甜素(glycyrrhizin)及甘草次酸(gly-cyrrhetinic acid)等三萜類化合物、甘草黃酮類化合物以及甘草多糖等。此外，國內(nèi)外對甘草及其制劑藥理與臨床應(yīng)用方面也進行了研究。本文就甘草的有效成分的分離及

67、純化，藥理作用等方面的最新研究加以概述。</p><p>　　2 甘草的化學(xué)成分概述</p><p>　　2.1 地上部分化學(xué)成分研究</p><p>　　2.1.1 黃酮類成分</p><p>　　有研究證明，已發(fā)現(xiàn)了160多種甘草黃酮類化合物，藥用作用優(yōu)于甘草甜素[6]，從云南</p><p>　　甘草中已分離出1

68、2種化合物，刺果甘草中分離得42種化合物用。</p><p>　　2.1.2 其它化學(xué)成分</p><p>　　1989年日本Toshio從黑龍江產(chǎn)烏拉爾甘草的地上部分分離得到1個香豆素類成分，后來又分離到5個其他酚類衍生物。賈世山等從內(nèi)蒙古自治區(qū)西部地區(qū)產(chǎn)烏拉爾甘草葉分離到1個酚酸甙類成分。而且甘草的地上部分租蛋白、粗脂肪含量高，粗纖維含量較低，飼喂效果與紫花苜蓿相似，產(chǎn)出報酬略高于紫花

69、苜蓿，為一種優(yōu)良的豆科牧草，具有其它牧草所不具的雙重作用。</p><p>　　2.2 地下部分化學(xué)成分研究</p><p>　　近年來我國學(xué)者對甘草根及根莖化學(xué)成分作了大量的研究，先后從甘草屬植物中提取、分離、鑒定了200多種化學(xué)成分，其中三萜類化合物和黃酮類化合物是主要成分[7]，此外還有香豆素類，多糖、生物堿、氨基酸等。</p><p>　　2.2.1 三萜類

70、[8-9]</p><p>　　甘草中的三萜類成分絕大多數(shù)為五環(huán)三萜齊墩果烷型，Cz8的取代分為n和8兩大系列，由于E環(huán)構(gòu)象不同，a和B異構(gòu)體生理活性有時存在明顯差異，一般B異構(gòu)體的生理活性明顯大于a的活性。該類化合物具有含量高、生理活性強的特點，據(jù)分析，含量為5％-1 l％不等。到目前為止，在甘草屬植物中已鑒定到60多種三萜類化合物。</p><p>　　常見的甘草三萜類化合物有甘草酸(

71、Glycyrrhizic acid)、甘草次酸(Glycyrrhitinic Acid)、烏拉爾甘草皂苷A、B(UralsaponinA、B)，其結(jié)構(gòu)見圖1--2。</p><p><b>　　甘草次酸：R=H</b></p><p>　　甘草酸：R=2分子葡萄糖醛酸</p><p>　　烏拉爾甘草皂苷A：R=2分子葡萄糖醛酸</p>

72、;<p>　　烏拉爾甘草皂苷B：R=2分子葡萄糖醛酸</p><p>　　圖1-2甘草中三萜類成分的化學(xué)結(jié)構(gòu)</p><p>　　甘草酸一直被認為是甘草中最重要的三萜類化合物，《中國藥典》把甘草酸的量作為評價甘草藥材及其制品質(zhì)量的重要指標(biāo)，通常要求不低于2％。純品甘草酸為白色晶體，</p><p>　　mp220 ℃,[α]+46.2° (乙

73、醇)，易溶于熱的稀乙醇、丙酮，幾乎不溶于無水乙醇和乙醚，其水溶液有微弱的起泡性及溶血性，加熱、加壓及在稀酸作用下可水解為一分予甘草次酸和兩分子葡萄糖醛酸。因甘草酸分子中有3個羧基，因此在植物體中可能以鉀鹽或鈣鹽的形式存在。</p><p>　　為便于食用，一般制成易溶的鹽，稱為甘草甜素(glycyrrhizin，GL)，其甜度約為蔗糖的200--300倍，少量甘草甜素與蔗糖并用可節(jié)省20％蔗糖而其甜味不變，其甜昧

74、特點是甜味來得緩慢，但存留時間長，并具有特殊氣味。甘草甜素已用于處理輸出用的血制品以預(yù)防因輸血而引起的艾滋病病毒(HIV)傳播，已獲美國專利。國際衛(wèi)生和糧農(nóng)組織食品添加劑法規(guī)委員會將甘草甜素列入使用名單。其中甘草酸單鉀鹽有某些抗凝作用，用于乙肝治療的免疫增強劑；甘草酸鈣鹽(經(jīng)脈注射)可增加茶堿的利尿作用，防止膀胱結(jié)石的形成；甘草酸鉍鉀能夠有效地治療潰瘍；甘草次酸及鹽類有明顯的抗利尿作用；乙酰甘草次酸鋁是一種消炎、抗?jié)兊男滤帯?lt;/

75、p><p>　　甘草中甘草酸含量隨產(chǎn)地以及株齡的不同存在差異，烏拉爾甘草中甘草酸的含量相對較高，一般隨株齡的增加甘草酸含量逐漸增加，甘草最佳采取期為4年生株齡。甘草的不同部位甘草酸含量亦有明顯差別，其中根部含量最高，葉次之，莖部的含量最少，分別為:4.5-13.3％，1.26-1.74％，0.58-0.87％。</p><p>　　甘草酸具有促腎上腺皮脂激素作用，能減少尿量及鈉的排出，增加鉀的

76、排出，可用于消炎解毒、鎮(zhèn)咳、抗菌，具有抗變態(tài)反應(yīng)、免疫調(diào)節(jié)、抗病毒、抗?jié)?、抗腫瘤、抗氧自由基等多種藥理生物學(xué)作用，近年的藥理研究還發(fā)現(xiàn)甘草酸具有保肝、防治病毒性肝炎、高血脂癥和癌癥等疾病的作用，引起了國內(nèi)外學(xué)者的廣泛關(guān)注。目前，已臨床應(yīng)用于治療慢性乙型肝炎、胃及十二指腸潰瘍、血小板減少性紫癜、流行性腮腺炎等疾病。</p><p>　　除用作藥物外，還在食品、釀造、飲料、糖果以及調(diào)味品工業(yè)上用作矯味劑，還可作為調(diào)

77、味劑(與食鹽配合使用效果特別明顯)、香味增強劑(乳制品、可可制品、蛋制品、羊肉除膻增香用)等，我國民間慣用予醬及醬制品中。甘草酸作為食品添加劑不僅可以增甜調(diào)味、抗氧化，而且是一種具有生理活性，有抑菌、消炎、解毒、除臭等多種功能的食品添加劑。我國國標(biāo)GB2760-86規(guī)定允許甘草酸作為罐頭、調(diào)味品、糖果、餅干、蜜餞的甜味劑，用量“視正常生產(chǎn)需要而定”。</p><p>　　甘草酸還被廣泛的使用在日用化工中，因其分子

78、中含有親水性基團和親油性基團，能降低水溶液表面張力，有很強的發(fā)泡性，具有乳化、分散、保濕潤發(fā)、軟化皮膚、抗皺、抗皮脂、防治色素沉積、消炎止癢及洗滌去污的效果，適用于高級發(fā)用或膚用化妝品中，既有美容護膚效果，又有消炎、抗變態(tài)反應(yīng)和治療皮膚病的作用，還用作牙膏、洗漱液、沐浴液的原料，是一種優(yōu)良的天然原料。</p><p><b>　　2.2.2 黃酮類</b></p><p&

79、gt;　　甘草黃酮(glycyrrhiza flavonoids，F(xiàn)G)是從甘草提取物中得到的一類生物活性較強的成分，許多學(xué)者對其化學(xué)成分進行了大量的研究工作，在從甘草屬植物中分離出的100多種黃酮類及其衍生物中，苷元70多個。這些黃酮類化合物分別屬于黃酮、黃酮醇、異黃酮、黃酮烷、二氫黃酮、二氫異黃酮等衍生物。黃酮類化合物的基本骨架可大體分為10種，在文獻中有詳細的描述。所得的苷類主要包括：黃酮苷，如夏佛托苷(schaftoside)、

80、二氫酮苷，如甘草苷(1iquiritin)：查耳酮苷，如異甘草苷(isoliquiritia)：異黃酮苷，如芒柄花苷(ononin)等。常見的黃酮及黃酮苷類的結(jié)構(gòu)如圖1-3。</p><p>　　(I)甘草素：R=OH； 甘草苷：R=O-glu</p><p>　　(Ⅱ)異甘草素：R=OH； 異甘草苷：R=O-glu</p><p>　　圖1-3常見黃酮類化合物的結(jié)

81、構(gòu)</p><p>　　研究發(fā)現(xiàn)，與維生素E和甘露醇的抗氧化作用比較，甘草黃酮在清除氧自由基的作用上明顯優(yōu)于維生素E；對Fenton反應(yīng)生成的羥自由基具有較強的直接清除作用，該作用明顯優(yōu)于甘露醇。甘草中黃酮類化合物中抗菌成分較多、作用較強。其中黃酮單體化合licochalcone A,ficochalcone B,glabridln,gIabrene等對革蘭陽性菌中的金葡球菌和枯草桿菌的抑制作用相當(dāng)于鏈霉素：對酵

82、母菌和真菌抑制作用高于鏈霉素：對鏈霉素?zé)o效的白色念球菌有不同程度的抑制作用，對金黃球菌也有抑制作用。另據(jù)日本學(xué)者報道，甘草黃酮能加強人體免疫缺陷病毒(HIV)對ATL2IK(來源于成人T細胞性白血病患者的細胞株)的拮抗作用，其中2種新甘草查兒酮低濃度時顯示出HW增殖的抑制作用。帶抗菌功效的原料是目前美白化妝品的重耍原料，甘草黃酮美白去斑效果顯著，在未來化妝市場會有很大的發(fā)展前景。在消炎和抗變態(tài)作用上，甘草黃酮比磺胺和抗生素的藥效要好，此

83、外，甘草黃酮還有抗腫瘤、抗誘變等廣泛的藥理作用。近年來醫(yī)藥界對甘草中的黃酮類化合物興起了研究熱潮，新黃酮類化合物不斷被研究發(fā)現(xiàn)。</p><p><b>　　2.2.3 多糖</b></p><p>　　在我國六、七十年代仍沒有關(guān)于甘草多糖及其藥理作用的報道，直至1986年史勇等方對甘草多糖對小鼠淋巴細胞的激活增殖效應(yīng)，及其免疫學(xué)活性進行了報道。近年來，植物中活性多糖

84、受到人們的青睞，從甘草藥材中也提取分離出一種活性多糖，其多糖由鼠李糖、葡</p><p>　　萄糖、阿拉伯糖和半乳糖組成。藥理作用初步研究顯示甘草多糖具有免疫調(diào)節(jié)、抗腫瘤、抗病毒作用、無細胞毒性。</p><p><b>　　2.2.4 其它</b></p><p>　　生物堿類成分在甘草屬植物的研究中報道很少。胡金鋒等首先從云南甘草的根莖中分

85、離出一種新的生物堿成分，為吲哚類內(nèi)鹽型生物堿，命名為云甘定(glyyunnanenine)。另外，高發(fā)奎等首次從甘草廢渣提取物中鑒定出了具有生理活性的亞麻酸乙酯。</p><p>　　3 甘草酸單銨鹽(MAG)的制備工藝研究現(xiàn)狀</p><p>　　MAG=甘草酸單銨鹽</p><p>　　圖1-4 從甘草酸中粗提甘草酸單銨鹽流程圖</p><p

86、>　　圖1-5甘草酸單銨鹽分子結(jié)構(gòu)式</p><p>　　3.1 甘草酸的提取方法</p><p>　　甘草酸在植物體中可能以鉀鹽或鈣鹽的形式存在。甘草酸鹽易溶于水和稀氨水，加酸又可析出游離的甘草酸，故作為甘草酸的提取方法。</p><p>　　3.1.1 溶劑提取法</p><p>　　甘草酸為弱酸，骨架為齊墩果烷型，分子中含有多個羧

87、基、羥基等極性基團，傳統(tǒng)的水提法效率很低[10]，所以經(jīng)常采用極性很強的溶劑來強化提取，在極性溶劑中加入氨水，改變甘草酸的電離狀態(tài)，增加甘草酸的水溶性，提高對甘草酸的提取率。采用的手段有加熱回流法、索式提取法、滲漉法、冷浸法等。熱回流法是首選方法之一，由于其工藝成熟，目前工業(yè)中多采用此方法，該法是溶劑不斷蒸發(fā)，然后經(jīng)冷凝循環(huán)利用，能耗較高，對此法的技術(shù)改造一般集中在熱能的循環(huán)利用方面。滲漉法和冷浸法是將樣品裝入適當(dāng)?shù)娜萜髦?，加入提取溶?/p>

88、(一般為水或稀醇)浸提十多個小時，提取過程不需要加熱。此方法適用于遇熱易破壞、揮發(fā)的成分，也適合于含淀粉或粘液質(zhì)多的成分，操作簡單，但提取時間長，一般應(yīng)用于實驗室成分分析方面，此法雖然避免了高溫帶來的影響，但要達到較高的提取效率十分費時。索式提取法由于保持較高的濃度差，所以提取效率高，雜質(zhì)少，但提取時間長。</p><p>　　3.1.2 超聲波輔助提取法[11]</p><p>　　利用

89、超聲波輔助提取甘草酸，利用超聲波的空化作用，對樣品進行破壞，從而促進成分的提取，發(fā)現(xiàn)與傳統(tǒng)的提取方法相比，超聲60min即可達到在較短時間內(nèi)得到較高得率的目的。</p><p>　　3.1.3 微波輔助提取法</p><p>　　甘草酸為極性物質(zhì)，易于吸收微波，在甘草內(nèi)部產(chǎn)生熱量，并將熱量擴散到溶劑中，同時也將有效物質(zhì)溶解到溶劑中。與傳統(tǒng)方法相比，具有高效、快速、完全，節(jié)省時間、溶劑和能源

90、等優(yōu)點，但處理量小，僅適用于少量快速的提取[12]。</p><p>　　3.1.4 超臨界流體萃取[13]</p><p>　　采用超臨界流體萃取的方法提取甘草酸，根據(jù)甘草酸極性的特點，加入乙</p><p>　　醇、甲醇等改性劑，可明顯促進甘草酸的提取。</p><p>　　3.1.5 甘草酸提取最新研究概況[14-15]</p&g

91、t;<p>　　2010年陳雙華在甘草酸提取工藝優(yōu)化文中指出微波提取法的提取率最高，索氏提取法次之，超聲提取法較低。索氏提取法由于保持較高的濃度差，所以提取率較高，但提取時間長，溶劑用量大。比較超聲提取與微波提取，超聲提取時間長，功率消耗大。而微波提取熱效率高，耗時短，提取率也較高，說明微波提取具有快速、節(jié)能的優(yōu)勢。通過比較確定微波提取法為甘草酸的最佳提取方法。同年，張小江等在甘草中甘草酸的提取工藝研究中表明低濃度氨水(

92、0. 1%和0. 3% )溶液的提取率顯著高于高濃度氨水(0. 5% )溶液( P < 0. 01) ，低濃度氨水溶液之間( 0. 1%和0. 3% ) 則差異不顯著( P > 0. 05 ) 。因此，此文作者認為氨水的濃度不宜過高，從節(jié)約成本角度出發(fā)，建議選取0. 1%氨水和10%乙醇溶液作為提取甘草酸的溶媒。</p><p>　　3.2 甘草酸的溶解</p><p>　　該

93、過程是將甘草酸粗提物用乙醇或丙酮等有機溶劑提取，保證一個含水量較小的環(huán)境，便于下一步的氨化，因甘草酸三銨鹽易水解。吳安心等[16]探索了乙醇一丙酮組成的二元溶劑系統(tǒng)，羅晨曲等口刀深入考察提取溶劑和溫度對甘草酸收率的影響，發(fā)現(xiàn)95％乙醇-汽油 (10:4)二元溶劑冷浸提取收率最高，克服了單一溶劑提取工藝的一些缺點。</p><p>　　3.3 甘草酸單銨鹽的純化</p><p>　　3.3

94、.1 有機溶劑法[17]</p><p>　?。?）將制得的MAG放入85％乙醇中，加入適量活性炭回流一段時間，過濾后，冷卻結(jié)晶，得甘草酸單銨鹽純品。</p><p>　?。?）將制得的MAG吸附在聚酰胺粉上，用含水乙醇洗脫，除去甘草酸同系物、甘草黃酮類化合物、鞣質(zhì)等，制得高純度甘草酸單銨鹽。</p><p>　　3.3.2 制備高效液相法[18]</p>

95、;<p>　　采用C柱(10×300)，流動相為甲醇：水：36％醋酸=65:28:7，流速為l0ml／min，檢測波長為252nm，將MAG用流動相溶解后，進樣，收集流分，結(jié)晶得制各樣品，含量≥98％。</p><p>　　3.2 甘草酸單銨鹽制取方法選擇[19]</p><p>　　由甘草酸精制高純度甘草酸單銨鹽的方法較多,有傳統(tǒng)的丙酮提取法、乙醇提取法、離子交換

96、樹脂法和超濾法等。傳統(tǒng)丙酮萃取法工藝簡單,萃取出的成分相對簡單,精制產(chǎn)品純度基本上能達到要求,但缺點有:丙酮毒性大,提純過程容易造成污染,對于要求較高的藥用產(chǎn)品,不適合用它作萃取劑;丙酮能使蛋白變性,毒性大,萃取后殘渣不易進行利用,只能拋棄,造成環(huán)境污染;丙酮沸點低,工業(yè)生產(chǎn)危險性大,采用安全措施比較困難;丙酮萃取后容易造成溶劑混合,回收溶劑困難,尤其是鉀鹽、鈉鹽采用鉀堿醇液中和時,乙醇與丙酮混合在一起,給溶劑回收和再利用造成困難,影響

97、產(chǎn)品質(zhì)量。離子交換法一般用大孔樹脂作吸附劑,用10 %左右稀乙醇洗脫,該法缺點有:吸附劑需用大量溶劑洗脫,洗脫后還需大量溶劑再生,低含量乙醇回收十分困難,回收率低;樹脂吸附一次不易制備達到要求的產(chǎn)品,需多次洗脫,或先用溶劑提純到90 %左右再洗脫,這樣導(dǎo)至工藝設(shè)備復(fù)雜,而且不易進行工業(yè)化生產(chǎn),故我們不予采用。超濾法設(shè)備要求較高,投資較大,而且也不容易大量生產(chǎn)。乙醇萃取法工藝簡單,不會造成溶劑混淆,溶劑回收再利用方便,且乙醇生產(chǎn)較安全,缺

98、點是乙醇萃取物成分相對復(fù)雜,給后續(xù)精制</p><p><b>　　4 藥理作用</b></p><p>　　《中華人民共和國藥典》2005年版對甘草功能敘述為：甘草補脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥。用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心悸氣短，咳嗽痰多，脘腹、四肢孿急疼痛，癰腫瘡毒，緩解藥物毒性、烈性。炙甘草補脾、益氣、復(fù)脈。用于脾胃虛弱，倦怠乏力，心動悸，脈結(jié)

99、代。經(jīng)現(xiàn)代醫(yī)藥科學(xué)研究，甘草藥理作用比較確定的有：腎上腺皮質(zhì)激素樣作用、抗炎及抗變態(tài)反應(yīng)、抗消化系統(tǒng)潰瘍、、鎮(zhèn)咳、抗菌、抗腫瘤、抗艾滋病等。臨床常用于治療胃、十二指腸潰瘍、支氣管哮喘、傳染性肝炎、皮膚炎癥等。</p><p>　　4.1 甘草酸及其衍生物的藥理作用[20]</p><p><b>　　4.1.1 抗炎</b></p><p>　

100、　Abe等用甘草酸治療感染了伴7JN_球蛋白誘導(dǎo)的肝炎的小鼠發(fā)現(xiàn)，與空白對照組相比，甘草酸可以促進抗原肝樹枝狀細胞產(chǎn)生interleukin(IL)-10，從而減輕炎癥。含甘草酸的甘草提取物可以有效治療過敏性皮炎如濕疹、瘙癢癥和皮膚囊腫。</p><p><b>　　4.1.2 抗?jié)?lt;/b></p><p>　　甘草酸及其衍生物可以抗由布洛芬引起的大鼠胃潰瘍。<

101、;/p><p><b>　　4.1.3 抗病毒</b></p><p>　　甘草酸在臨床上已被用于治療慢性肝炎。甘草酸在體外可明顯抑制HIV陽性病人血單核細胞中HIV復(fù)制。甘草酸還可以減少感染了致死劑量流感病毒的小鼠的發(fā)病率和死亡率。Cinatl等比較了三唑核苷、6-azauridine、菌酚酸、吡唑呋哺菌素和甘草酸對兩種SARS冠狀病毒FFM一1和FFM-2的抑制，發(fā)現(xiàn)

102、甘草酸對病毒復(fù)制的抑制最強。</p><p><b>　　4.1.4 抗癌</b></p><p>　　甘草酸可以通過調(diào)節(jié)Th2細胞達到抑制B16黑素瘤向肺部轉(zhuǎn)移的效果。Shiota等發(fā)現(xiàn)甘草酸可顯著抑制二乙基亞硝胺(NDEA)介導(dǎo)的肝細胞癌。</p><p><b>　　4.1.5 抑菌</b></p>&

103、lt;p>　　當(dāng)甘草甜素的濃度為0.51％時，可以完全抑制牙菌斑的形成。</p><p>　　4.1.6 免疫調(diào)節(jié)作用</p><p>　　甘草酸類具有非特異性免疫調(diào)節(jié)作用，主要是增強吞噬功能，還可選擇性地增強輔助性T淋巴細胞的增殖能力和活性。</p><p>　　4.2 甘草黃酮的功能作用</p><p>　　現(xiàn)代藥理研究結(jié)果表明，甘

104、草中黃酮類化合物具有較強的生理活性。自上世紀(jì)60年代以來，人們就發(fā)現(xiàn)甘草屬植物中的黃酮類化合物具有抗炎、抗病毒、強心、鎮(zhèn)靜和鎮(zhèn)痛等作用。后又發(fā)現(xiàn)它們有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤等作用。尤其是近年來還發(fā)現(xiàn)甘草中黃酮類成分對艾滋病病毒(HIV)有很強的抑制增殖作用，使甘草黃酮類化合物的研究和應(yīng)用逐漸成為熱點。</p><p>　　4.2.1 抗自由基、抗氧化作用</p><p>　　生物組織膜因產(chǎn)

105、生過氧化作用而導(dǎo)致結(jié)構(gòu)和功能損傷的自由基是引起癌癥、衰老、心血管疾病的罪惡之源。生物體的常見自由基有，超氧陰離子自由基(O．)、羥基自由基(·OH)、烷氧自由基(RO·)等.研究表明，甘草酮類物質(zhì)能通過消除自由基或淬滅超氧自由基，終止自由基的連鎖反應(yīng)從而達到抗氧化作用。吳碧華等[21]對甘草黃酮與維生素E和甘露醇的抗氧化作用比較發(fā)現(xiàn)，甘草總黃酮具有明顯清除氧自由基和羥自由基的能力，其中清除氧自由基的作用明顯優(yōu)于維生素

106、；清除羥自由基具有較強的直接清除作用，該作用明顯優(yōu)于甘露醇。木合布力.可布力孜等[22]利用兩種體外抗氧化實驗?zāi)Ｐ停瑢Ω什菘傸S酮及其所含的主要異黃酮類成分甘草定的抗氧化活性進行研究，研究表明甘草總黃酮和其重要組分甘草定均有較強的抗氧化活性，其中甘草定的清除自由基活性與常用的自由基清除劑銀杏黃酮類似。</p><p>　　甘草黃酮類物質(zhì)可以防止低密度脂蛋白(LDL)發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，降低病人血漿中的低密度脂蛋白被

107、氧化的易感系數(shù)，提高血漿中的低密度脂蛋白的抗氧化、抗凝聚、抗滯留的能力，可以用來治療各種由于血脂高、脂質(zhì)氧化所引起的疾病。Paulu A等研究了甘草中異黃酮類化合物glabridin對LDL氧化過程的影響，證實其具有較強的抗氧化作用。</p><p>　　4.2.2 抗腫瘤作用</p><p>　　甘草中黃酮類物質(zhì)具有植物雌性激素活性，可以抑制一些癌細胞的增殖，例如異甘草素對前列腺癌細胞的

108、增殖有明顯的抑制作用，而光甘草定可以抑制胸腺癌細胞的增生。二甲基苯并蒽類甘草黃酮可以除去癌物質(zhì)，從而起到預(yù)防癌癥的功效。趙世元等研究發(fā)現(xiàn)甘草黃酮各組能顯著抑SElslsod,鼠體內(nèi)腫瘤的發(fā)生和發(fā)展，能顯著提高腹水瘤小鼠的生命延長率，并且能增加肉瘤小鼠的胸腺指數(shù)，降低小鼠肉瘤的脾指數(shù)。劉強等[23]研究甘草黃酮對荷瘤d、鼠免疫細胞數(shù)量的影響，發(fā)現(xiàn)甘草黃酮增加荷瘤小鼠效應(yīng)免疫細胞的數(shù)量從而達到抗腫瘤作用，其最佳抑瘤率為52．3％。</

109、p><p>　　4.2.3 抗病毒作用</p><p>　　到目前為止，甘草提取物和其衍生物抗病毒研究已涉及17種病毒，除了對脊髓灰質(zhì)炎病毒和麻疹病毒無作用外，通過某種作用機理對其它病毒均顯示了一定作用。日本學(xué)者奧田拓男等發(fā)現(xiàn)甘草中含有3種黃酮類成份(甘草查爾酮)對HW(人體免疫缺陷病毒)增殖的抑制作用是甘草酸的25倍。從甘草質(zhì)活性成分研究中所得到的酚性成分(包括黃酮類成分)加強了HIV對來源

110、于成人T細胞性白血病患者的細胞株ATL．IK的拮抗作用，其中2種新甘草查爾酮低濃度時顯示出抑制HIV增殖的作用。另據(jù)報道，由烏拉爾甘草中提取的甘草素、異甘草素、甘草昔等黃酮類化合物具有抑制HIV．I逆轉(zhuǎn)錄酶的作用。</p><p>　　4.2.4 抗菌作用</p><p>　　據(jù)研究報道，甘草黃酮化合物licochalcone A，licochaicone B，glabridin，glab

111、rene等對格蘭氏陽性菌中的金葡球菌和枯草桿菌的抑制作用相當(dāng)于鏈霉素，對酵母菌和真菌抑制作用高于鏈霉素，對大腸桿菌和綠膿桿菌抑制作用低于鏈霉素，licochaicone A體外對革蘭陽性球菌、桿菌和棒型菌有明顯的抑制作用。曾超珍等[24]研究發(fā)現(xiàn)甘草黃酮對金色葡萄球菌、枯草桿菌、大腸桿菌、黑曲霉、青霉都具有抑菌和殺菌作用。</p><p>　　4.2.5 對酶的抑制作用</p><p>　

112、　近年來，國內(nèi)外學(xué)者大多數(shù)著眼于通過對酶的作用來篩選天然藥物的生物活性，而且一種酶常能表現(xiàn)出多方面的藥理作用。研究表明，甘草黃酮類化合物對多種酶具有抑制作用。如isoliquirit逸enin，glabridin和licoricodin等黃酮類化合物對環(huán)磷酸腺苷磷酸二酯酶(PDE)有較強的抑制作用。而黃酮類化合物isoliquiritin，liquiritin，iiquiritigenin對醛糖還原酶(AR)有抑制作用。另外Hatano