降眼壓藥物在微球誘導的小鼠高眼壓模型中的作用比較.pdf

1、研究目的：隨著微球誘導的小鼠高眼壓模型在眼科基礎(chǔ)研究中被廣泛地接受和采用，本研究利用該模型檢測各種目前臨床上常用的青光眼藥物的降眼壓和視神經(jīng)保護作用，用于進一步探究該模型在未來青光眼新藥篩選中的應(yīng)用潛力，并嘗試使用頻域光學相干斷層掃描無創(chuàng)性地測量小鼠高眼壓模型中的視網(wǎng)膜厚度改變。
　　 材料和方法：在氯胺酮(120mg/kg)和甲苯胺噻嗪(12 mg/kg)腹腔麻醉下，采用單側(cè)前房注射2微升聚苯乙烯微球懸浮液(5.0×106微球

2、/毫升)的方法在成年C57BL/6J小鼠上建立高眼壓模型。比較常用的幾種青光眼降眼壓藥物(0.5％馬來酸噻嗎洛爾滴眼液、0.15％酒石酸溴莫尼定滴眼液、1％布林佐胺滴眼液、2％鹽酸毛果蕓香堿滴眼液和0.005％拉坦前列素滴眼液)在這個高眼壓模型中的作用。使用TonoLab眼壓計監(jiān)測眼壓變化來評價藥物的短期和長期降眼壓作用。通過對視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞和視神經(jīng)軸突計數(shù)的方法對視神經(jīng)損害進行定量分析，比較青光眼藥物的視神經(jīng)保護作用。同時采用頻域光

3、學相干斷層掃描技術(shù)配合自主開發(fā)的圖像分析軟件測量小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞復合體的厚度(包括視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層、視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞層以及內(nèi)叢狀層)，利用該厚度變化比較這青光眼藥物的治療作用。同時分析視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞復合體厚度變薄率和視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞丟失率之間的關(guān)系。P<0.05被認為具有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)果：微球注入前房后散布在前房水中，隨后逐漸堆積到房角附近，導致了房水外流通道阻塞。眼壓隨之逐漸升高，在第8天時達到高峰，并且高眼壓一

4、直維持到第3周或更長時間。微球注射眼的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞和軸突的數(shù)量較對側(cè)眼明顯減少。我們通過單側(cè)前房注射聚苯乙烯微球的方法成功地建立了小鼠高眼壓模型。以抑制房水生成為主要作用機制的降眼壓藥物(0.5％馬來酸噻嗎洛爾滴眼液、0.15％酒石酸溴莫尼定滴眼液和1％布林佐胺滴眼液)可以有效降低微球?qū)е赂哐蹓耗Ｐ褪蟮难蹓海c對照組相比視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞和視神經(jīng)軸突的存活率有明顯改善。同時，頻域光學相干斷層掃描配合自主開發(fā)的圖像分析軟件可以成功地測量

5、小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞復合體的厚度。測量結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對照組相比，以抑制房水生成為主要作用機制的三種降眼壓藥物均能明顯降低由高眼壓導致視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞復合體厚度變薄的幅度。然而以促進房水外流為主要作用機制的降眼壓藥物(0.005％拉坦前列素滴眼液和2％鹽酸毛果蕓香堿滴眼液)對微球?qū)е赂哐蹓耗Ｐ褪蟮难蹓簞t完全沒有影響。另外，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞復合體厚度變薄率與視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞丟失率之間有明顯的相關(guān)性。
　　 結(jié)論：前房注射微球的方法可以