藥學(xué)畢業(yè)論文蜈蚣藻中多酚的提取及抗氧化研究

1、<p><b>　　本科畢業(yè)論文</b></p><p><b>　?。?0 屆）</b></p><p>　　蜈蚣藻中多酚的提取及抗氧化研究</p><p>　　所在學(xué)院 </p><p>　　專業(yè)班級 藥學(xué)

2、 </p><p>　　學(xué)生姓名 學(xué)號 </p><p>　　指導(dǎo)教師 職稱 </p><p>　　完成日期 年 月 </p><p><b>　　目錄</b>&

3、lt;/p><p><b>　　中文摘要3</b></p><p><b>　　英文摘要4</b></p><p><b>　　1 前言5</b></p><p>　　2 實(shí)驗(yàn)材料、主要儀器與試劑6</p><p>　　2.1 材料與試劑6<

4、/p><p>　　2.2 主要儀器6</p><p><b>　　3 實(shí)驗(yàn)方法7</b></p><p>　　3.1 紅蜈蚣藻多酚的提取7</p><p>　　3.2 紅蜈蚣藻多酚含量的測定7</p><p>　　3.3 紅蜈蚣藻多酚抗氧化活性的測定7</p><p>

5、;　　3.3.1 清除DPPH 自由基能力的測定(DPPH法) 7</p><p>　　3.3.2 清除羥自由基能力的測定8</p><p>　　3.3.3 鐵還原力能力的測定8</p><p>　　4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論8</p><p>　　4.1紅蜈蚣藻多酚含量8</p><p>　　4.2 紅蜈蚣藻多酚的

6、抗氧化活性9</p><p>　　4.2.1 清除DPPH自由基能力的測定9</p><p>　　4.2.2 清除羥自由基能力的測定9</p><p>　　4.2.3 鐵還原力能力的測定10</p><p><b>　　4.3 討論10</b></p><p><b>　　5

7、結(jié)論11</b></p><p><b>　　參考文獻(xiàn)11</b></p><p><b>　　致 謝13</b></p><p>　　蜈蚣藻中多酚的提取及其抗氧化研究</p><p>　　[摘要]目的：研究蜈蚣藻中多酚的體外抗氧化能力。方法：采用工業(yè)甲醇浸泡提取，依次用石油醚、乙

8、酸乙酯、正丁醇萃取蜈蚣藻多酚，分別利用三種體系，通過對二苯基苦味肼基自由基(DPPH·)、羥自由基(·OH)和鐵還原力能力來評價其抗氧化活性。采用Folin–Ciocalteau試劑測定總多酚含量。結(jié)果：蜈蚣藻多酚對DPPH的清除率隨著多酚濃度的增加清除能力增強(qiáng)：石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物；對羥自由基的清除率：石油醚相>粗提物>乙酸乙酯相>正丁醇相；Fe還原力的大?。菏?/p>

9、油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物，即石油醚相抗氧化活性最好。當(dāng)5 mg/ml濃度時，粗提物、石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相萃取物對DPPH·的清除率分別為50.51%、83.58%、64.82%、55.70%，對·OH的清除率分別75.95%、93.99%、51.86%、30.94%，且其鐵還原力測定為0.1425、0.6204、0.3497、0.1725，且總酚含量與蜈蚣藻各提取物的抗氧化活性

10、之間具有一定的相關(guān)性。結(jié)論：蜈蚣藻的石油醚相在清除羥自由基和DPPH自由基方面表現(xiàn)出較強(qiáng)的抗氧化活性。這些數(shù)據(jù)表明:甲醇提</p><p>　　[關(guān)鍵詞] 多酚；抗氧化活性；DPPH；OH；Fe還原力</p><p>　　Evaluation of Antioxidant Activity of Polyphenol Obtained from Grateloupia filicina&l

11、t;/p><p>　　[Abstract] Objective: To investigate the antioxidation capacity of the polyphenol in vitro extracted from Grateloupia filicina. Methods: The antioxidant activities of methanol (MC) extracts and fract

12、ions （petroleum ether、ethyl acetate、n-butyl alcohol and water fraction） from Grateloupia filicina were evaluated through DPPH/hydroxyl radical-scavenging activity and reducing power. Total phenolic content was investigat

13、ed using Folin–Ciocalteau reagent. Result: DPPH radical-scavenging activity of po</p><p>　　Antioxidant activities of crude extract and fractions showed an increase with increasing concentration indicating th

14、e dose dependency of these properties. Conclusion: Polyphenol of Grateloupia filicina had strong antioxidation activity, which can scaveng DPPH and hydroxyl free radical. These data suggest that the methanolic extracts a

15、nd fractions may be useful as antioxidant supplements due to its high phenolic content.</p><p>　　[Key words] Grateloupia filicina; Polyphenol; Anitioxidation activity</p><p><b>　　1 前言</

16、b></p><p><b>　　1.1 蜈蚣藻</b></p><p>　　海藻生活在特殊生態(tài)環(huán)境（高鹽度，高壓，低氧，避光）下，普遍含有特殊功能的生物活性物質(zhì)如酚類、吲哚類、萜類等化合物，是海洋天然藥物的重要來源。蜈蚣藻屬于紅藻門、真紅藻綱、隱絲藻目、海膜科、蜈蚣藻屬[1]。藻體紫紅色，粘滑，叢生，線形或略扁壓，單一及頂，主干明顯，規(guī)則或不規(guī)則的羽狀分枝，生

17、長在低潮帶附近巖石和貽貝養(yǎng)殖架上。蜈蚣藻為世界性的暖溫帶型海藻，產(chǎn)于我國南北各地，在我國的青島、大連等沿海地區(qū)有著廣泛的分布。多可食用或作制膠原料，廣東潮陽等地居民常用作驅(qū)蛔蟲藥[2]。中國蜈蚣藻屬共報道32種[3]。該屬海藻種類的外部形態(tài)各種各樣，變異很大，如帶形蜈蚣藻為黏滑的葉片狀，而繁枝蜈蚣藻為硬的革質(zhì)的線形，同一種類的形態(tài)也因生態(tài)環(huán)境、地域的不同變化很大[4]。</p><p><b>　　1.

18、2 多酚</b></p><p>　　多酚是植物的莖、葉、花等部分所含有的色素、苦味和澀味成分的總稱。它是通過光合作用合成的，種類多，其中還有一部分不為人所了解。雖然多酚類物質(zhì)不是人體每日所必需的營養(yǎng)素，但現(xiàn)在的醫(yī)學(xué)研究中發(fā)現(xiàn)這類物質(zhì)卻具有超強(qiáng)的抗氧化能力。其主要包括類黃酮化合物和酚酸類化合物，具有很強(qiáng)的消除有害自由基能力，抗衰老、抗輻射、抗菌、殺菌作用，以及對癌細(xì)胞和艾滋病病毒的抑制作用[5]。多酚

19、作為一種強(qiáng)抗氧化劑、自由基清除劑，可以使機(jī)體內(nèi)源性的抗氧化酶活性增加，或通過膳食補(bǔ)充外源抗氧化劑起到預(yù)防腫瘤等疾病發(fā)生的作用。但它的抗氧化機(jī)制比較復(fù)雜，一般認(rèn)為：清除自由基、酚羥基的離解，絡(luò)合有催化作用的金屬離子，吸收紫外光是起主要作用的因素。</p><p><b>　　1.3 自由基</b></p><p>　　生物機(jī)體內(nèi)絕大多數(shù)分子是由氫離子和其它基團(tuán)組成的,

20、常?？梢园l(fā)生其它基團(tuán)與氫離子的解離, 形成帶一個電子的其它基團(tuán)與氫離子, 稱為氧自由基。常見的有: 氧離子自由基、羥自由基、脂質(zhì)自由基、過氧化氫自由基、氫自由基、有機(jī)自由基、烷氧基自由基、有機(jī)過氧自由基、氧化脂質(zhì)自由基等。自由基極其不穩(wěn)定, 容易與其它物質(zhì)反應(yīng)生成新的自由基, 因而往往產(chǎn)生連鎖反應(yīng)。自由基連鎖反應(yīng)一開始, 所生成的新自由基就進(jìn)一步與基質(zhì)反應(yīng), 從而導(dǎo)致基質(zhì)的大量消耗, 及多種自由基產(chǎn)物的生成。機(jī)體新陳代謝產(chǎn)生自由基, 可

21、以造成機(jī)體的損傷, 致使疾病的發(fā)生。正常情況下, 機(jī)體有完善的自由基清除系統(tǒng), 控制著自由基的產(chǎn)生與清除。隨著機(jī)體的老化, 自由基清除系統(tǒng)逐漸功能減弱, 造成自由基大量聚集, 最終造成不可逆轉(zhuǎn)的損傷, 生命從而走向凋亡。隨著年齡增長, 機(jī)體內(nèi)自由基水平呈增長趨勢, 同時自由基清除機(jī)制卻逐步退化, 結(jié)果造成體內(nèi)自由基大量積聚。所以自由基對機(jī)體的健康危害日益加重, 引發(fā)了多種生理功能的障礙, 促進(jìn)多種老年疾病的發(fā)生發(fā)展,導(dǎo)致機(jī)體的衰老, 直

22、至死亡。在整個衰老過程中, 自由基引起大量細(xì)胞衰老、死亡, 近年來有</p><p><b>　　1.4 抗氧化劑</b></p><p>　　抗氧化劑是一類能幫助捕獲且中和自由基，從而去除自由基對人體損害的一類物質(zhì)，不僅可以能防止油脂和食品氧化延長保質(zhì)期，且還有許多防病保健功能[7]。因此，抗氧化劑廣泛用于食品工業(yè)，需求量逐年不斷增加。由于合成抗氧化劑像植物酸（BH

23、A）、2，6- 二叔丁基對甲酚（BHT）和特丁基對苯二酚（TBHQ）等其的毒性問題[8]，以及人們越來越追求綠色環(huán)保消費(fèi)，故開發(fā)安全、高效的天然抗氧化劑已成為食品工業(yè)的一項(xiàng)重大課題。海藻是人類在食品、工業(yè)、藥用等方面的重要資源[9]。近年來，海藻中次生代謝物質(zhì)，如萜類、甾醇類、大環(huán)內(nèi)酯類和酚類等已成為研究的熱點(diǎn)，特別是多酚物質(zhì)因其所具有的抗氧化特性而備受矚目[10-12]。</p><p>　　因此，本論文以蜈蚣

24、藻多酚為研究對象，對其提取工藝和抗氧化活性進(jìn)行評價，為其后續(xù)開發(fā)提供參考依據(jù)。</p><p>　　2 實(shí)驗(yàn)材料、試劑與主要儀器</p><p><b>　　2.1 材料與試劑</b></p><p>　　蜈蚣藻于2009年12月購于江蘇昆山一弘藻業(yè)有限公司，由浙江海洋學(xué)院趙盛龍教授鑒定蜈蚣藻（Grateloupia filicina）。<

25、;/p><p>　　工業(yè)甲醇；Folin-Ciocalteu 試劑；碳酸鈉；沒食子酸；甲醇；石油醚；乙酸乙酯；正丁醇；二苯代苦味?；杂苫?DPPH)；鄰二氮菲；磷酸二氫鈉；磷酸氫二鈉；硫酸亞鐵；雙氧水（30%）；鐵氰化鉀；氯化鐵；三氯乙酸；（以上試劑除工業(yè)甲醇外，均為分析純，并購買于國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）。</p><p><b>　　2.2 主要儀器</b><

26、;/p><p><b>　　3 實(shí)驗(yàn)方法</b></p><p>　　3.1 蜈蚣藻多酚的提取</p><p>　　提取：取粉碎的蜈蚣藻粉末用3倍量工業(yè)甲醇浸泡三次(每次72小時)，合并浸提液。減壓濃縮，用甲醇脫鹽三次，抽濾，合并三次濾液，減壓濃縮后得浸膏，備用。</p><p>　　萃取：浸膏加水懸浮，依次用石油醚、乙酸乙

27、酯和正丁醇各萃取三次，每次萃取溶劑與水溶液體積比1:1，分別合并石油醚層、乙酸乙酯層和正丁醇層，減壓濃縮，得萃取物。</p><p><b>　　操作流程：</b></p><p>　　樣品處理→超聲波→抽濾→減壓濃縮→脫鹽→減壓濃縮→粗浸膏→濃縮物用水溶解→石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取→石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相萃取物減壓濃縮→浸膏。</p>&l

28、t;p>　　3.2 蜈蚣藻多酚含量的測定</p><p>　　多酚含量測定[13]：以AOAC(1970)的標(biāo)準(zhǔn)分析方法測定，即用Folim-Denis試劑在堿性條件下與多酚類物質(zhì)形成藍(lán)色復(fù)合物后，用紫外-可見分光光度計作比色分析[14]。</p><p>　　3.2.1沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制</p><p>　　取濃度為0.05 mg/mL的沒食子酸溶液（稱

29、取 0.05g沒食子酸，用蒸餾水定容于1000 mL容量瓶中）0.1 mL、0.3 mL、0.5 mL、0.7 mL、0.9 mL在10 mL分別加入試管內(nèi)，然后加入0.1mL福林酚試劑，放置3 min后加入2%的Na2CO3 2 mL，轉(zhuǎn)移至5ml容量瓶中，用蒸餾水定容到5 mL，在25℃下反應(yīng)30 min后，于760 nm測其吸光度，每個濃度平行測定3次，分別記錄吸光值，以平均值做標(biāo)準(zhǔn)曲線。</p><p>

30、　　調(diào)零：加0.1ml福林酚試劑，2%碳酸鈉溶液2ml，后用蒸餾水定容至5ml。</p><p>　　3.2.2 蜈蚣藻多酚含量測定</p><p>　　取蜈蚣藻粗提物、石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相萃取物各10mg，各用1ml甲醇溶解，配制成10 mg/mL的樣品溶液。取樣品溶液0.5 mL，置于10 mL的試管內(nèi)，然后加入0.1 mL福林酚試劑，3 min后加入2％碳酸鈉溶液2 mL，

31、再用蒸餾水定容到5 mL，25 ℃下反應(yīng)30 min，在760 nm處測定吸光度，平行測3次。</p><p>　　調(diào)零：加0.1ml福林酚試劑，2%碳酸鈉溶液2ml，后用蒸餾水定容至5ml。</p><p>　　3.3 蜈蚣藻多酚抗氧化活性的測定</p><p>　　3.3.1 清除DPPH 自由基能力的測定（DPPH 法）[15]</p><

32、p>　　分別取蜈蚣藻取粗提物和各相萃取物3ml加3mL DPPH（甲醇溶液，0.2 mmol/L，該溶液需現(xiàn)用現(xiàn)配），混合均勻后室溫暗處放置30 min，于517 nm處測定吸光度Asample；分別取粗提物和各相萃取物3ml加入3 mL甲醇溶液于517 nm處測定吸光度Asample blank；3 mL DPPH中加入3 mL甲醇于517 nm處測定吸光度Acontrol； 6 ml甲醇于517 nm處測定吸光度Ablank。

33、平行測定三次，計算平均值。蜈蚣藻多酚樣品對DPPH的清除率按下式計算[16] ，用Ablank管調(diào)零。</p><p>　　清除率(%)=[1–(Asample–Asampleblank)/(Acontrol–Ablank)]×100%</p><p>　　3.3.2 清除羥自由基能力的測定[17]</p><p>　　取濃度為0.75mmol/ L 鄰二

34、氮菲1 mL于試管中，加入0.2mol/L磷酸緩沖溶液（PBS，pH值為7.40）2 mL，充分混勻后，加入濃度為0.75 mmol/ L的硫酸亞鐵1 mL，混勻，加質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1% 的H2O2 1 mL，再加1 mL蒸餾水至6 mL，于37 ℃水浴60 min，于536 nm處測其吸光度，為A536損傷；用1 mL蒸餾水代替1 mL H2O2，為A536空白；分別用蜈蚣藻粗提物和各相萃取物代替1 mL的蒸餾水，為A536加樣。蜈蚣藻

35、多酚樣品對羥自由基的清除率(E)按下式計算[16]，用甲醇調(diào)零。</p><p>　　E(%)=(A536加樣-A536損傷)/(A536空白-A536損傷)×100%</p><p>　　3.3.3 Fe還原力的測定[18]</p><p>　　分別取蜈蚣藻取粗提物和各相萃取物1ml，加0.2mol/L PBS（PH=6.6）1ml，再加1%鐵氰化鉀1m

36、l，置于50°C水浴中20min，加入10%三氯乙酸（TCA）1ml混合后，以8000r/min離心5min，取其1ml上清液，加蒸餾水1ml，再加入0.1%FeCl3 0.2ml，混合均勻靜置10min，于700nm下測其吸光度。調(diào)零：甲醇1ml+0.2mol/L PBS（PH=6.6）1ml+1%鐵氰化鉀1ml。</p><p><b>　　4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論</b></

37、p><p>　　4.1 蜈蚣藻多酚的含量</p><p>　　4.1.1 沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線</p><p>　　以吸光度為縱坐標(biāo)，沒食子酸濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。回歸方程y=74.127x + 0.0689，R2 =0.9960，結(jié)果表明沒食子酸濃度在0.001—0.01mg/ml范圍內(nèi)與其吸光度值呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。</p><p>　　4

38、.1.2 蜈蚣藻取粗提物和各相萃取物多酚的含量[19]</p><p>　　蜈蚣藻取粗提物和各相萃取物測得的吸光度值與沒食子酸標(biāo)準(zhǔn)曲線比較，總酚含量（GAE）表示為每克樣品干重相當(dāng)于沒食子酸的量（GAE：mg沒食子酸/g樣品干重)。</p><p>　　表一 蜈蚣藻取粗提物和各相萃取物多酚的含量</p><p>　　表一可看出蜈蚣藻的粗提物和各相萃取物均含有一定量的

39、多酚成分，其中乙酸乙酯相萃取物酚類含量最高（10.32 mg/g），粗提物分類含量最低（2.484 mg/g）。</p><p>　　4.2 蜈蚣藻多酚的抗氧化活性</p><p>　　4.2.1 清除DPPH自由基能力的測定</p><p>　　DPPH 在有機(jī)溶劑中是一種穩(wěn)定的以氮為中心的自由基，其結(jié)構(gòu)中有1 個孤對電子，其溶液在517 nm處具有紫紅色特征吸收

40、峰。當(dāng)存在自由基清除劑時，與其單電子配對而使其顏色變淺，在最大吸收波長處的吸光度變小，而且這種顏色變淺的程度與配對電子數(shù)是成量效關(guān)系的，因此可用于檢測自由基的清除情況，從而評價實(shí)驗(yàn)樣品的抗氧化能力。 </p><p>　　從圖二可得出各相萃取物和粗提物對DPPH的清除隨濃度的增大清除率增大，且石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物。石油醚相對DPPH的清除在10mg/ml時甚至達(dá)到100%。此外

41、，在這個實(shí)驗(yàn)中所做的空白實(shí)驗(yàn)是在不加樣品的情況下，用測定樣品相同的方法、步驟進(jìn)行定量分析，把所得結(jié)果作為空白值，從樣品的分析結(jié)果中扣除，從而消除由于試劑不純或試劑干擾等所造成的系統(tǒng)誤差，進(jìn)而減小實(shí)驗(yàn)誤差。</p><p>　　4.2.2 清除羥自由基能力的測定</p><p>　　鄰二氮菲-Fe2+是常用的氧化還原指示劑，其顏色變化可敏銳地反映溶液氧化還原狀態(tài)的改變。H2O2/Fe2+體系

42、通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基，鄰二氮菲-Fe2+水溶液可被羥自由基氧化為鄰二氮菲-Fe3+，從而使鄰二氮菲-Fe2+在536nm處的最大吸收峰消失。當(dāng)加入還原性物質(zhì)后，它可以與羥自由基反應(yīng)，從而使Fe2+免遭氧化，吸光度比原來增大，因此可用于檢測自由基的清除情況，從而評價實(shí)驗(yàn)樣品的抗氧化能力。</p><p>　　由圖三可知對羥自由基的清除：石油醚相>粗提物>乙酸乙酯相>正丁醇相。而其中石油

43、醚相對羥自由基的清除率增幅最大，且石油醚相對羥自由基的清除在5g/ml時甚至達(dá)到100%。正丁醇相對羥自由基的清除隨濃度（1-5mg/nl）的增大其清除率增幅很小。</p><p>　　4.2.3 鐵還原力能力的測定</p><p>　　鐵還原力的測定通常用來評價天然抗氧化劑的供電子能力，抗氧化劑通過自身的還原作用給出電子而使自由基變?yōu)榉€(wěn)定的分子，從而失去活性。Fe3+溶液呈淡黃色，當(dāng)Fe

44、3+被樣品中的抗氧化劑還原為Fe2+時，溶液的顏色就變?yōu)樗{(lán)色,藍(lán)色越深表示樣品還原能力越強(qiáng)。通過測定反應(yīng)混合物700nm處吸光度來評價化合物的還原力，吸光度越大，還原力越強(qiáng)。</p><p>　　由圖四可得出Fe還原力的大?。菏兔严?gt;乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物，其中正丁醇相和粗提物的對Fe還原力的大小和增幅都很相近，與石油醚相和乙酸乙酯相相差甚遠(yuǎn)。</p><p>&

45、lt;b>　　4.3 討論</b></p><p>　?。?）比較三種不同抗氧化方法得出的結(jié)果：對DPPH的清除（1-10mg/ml）：石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物；對羥自由基的清除（1-5mg/ml）：石油醚相>粗提物>乙酸乙酯相>正丁醇相；Fe還原力的大?。?-25mg/ml）：石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物。可綜合得出

46、，抗氧化能力的大小：石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相>粗提物。鄰二氮菲法對于測定抗氧化能力靈敏度較高，但可能也因此得出的結(jié)果相對不是特別穩(wěn)定，故需與其他抗氧化方法一起使用以得出較精準(zhǔn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。</p><p>　　（2）DPPH具有刺激性，吸入、口服或皮膚接觸有害，而且在使用時須現(xiàn)用現(xiàn)配，用棕色瓶裝，并且避光。因?yàn)樗诃h(huán)境中不穩(wěn)定，所以此操作是在暗處進(jìn)行的，否則會影響到抗氧化能力的測定。<

47、/p><p>　　（3）Fenton反應(yīng)是體內(nèi)產(chǎn)生羥自由基的重要機(jī)理，羥自由基是造成組織脂過氧化、蛋白質(zhì)解聚與聚合、核酸斷裂、多糖解聚的重要活性氧。羥自由基清除率是反應(yīng)藥物抗氧化作用的重要指標(biāo)。該文采用的羥自由基模型體系中，加入的雙氧水自身會產(chǎn)生氣體，所以在測紫外時，使得吸光度值不穩(wěn)定，一直在變化，使得到的數(shù)據(jù)存在一定的誤差，從而影響到清除率的計算。因此反應(yīng)液需要在37℃水浴中充分反應(yīng)1 h 以后再測紫外。</

48、p><p>　?。?）在減壓濃縮過程中，壓強(qiáng)如果能降到-1以下，此時溶劑能很快地被蒸餾出來，說明真空度越高，溶劑越快達(dá)到沸點(diǎn)；如果抽濾泵工作時間過長，真空度就會下降，從而蒸餾速度會變慢，所以要及時更換抽濾泵中的水，以確保有較高的真空度；如果外界氣溫較高，可以在循環(huán)真空泵水泵中加入適量冰塊來降低水溫或者使用循環(huán)水式多用真空泵，可以使冷凝管中的水溫控制在8℃以下，從而獲得較高的真空度，進(jìn)而加快溶劑的蒸餾；如果把旋轉(zhuǎn)的速度

49、加快，則使得圓底燒瓶的每一個部位的溫度都幾乎一致，此時也會加快蒸餾。</p><p>　?。?）在蒸餾過程中如果要中斷蒸餾，應(yīng)先關(guān)掉熱源，再打開活塞，使系統(tǒng)與大氣相通，待系統(tǒng)內(nèi)外壓力平衡后方可關(guān)掉抽濾泵開關(guān)，否則會引起倒吸；在蒸餾時，液體裝至瓶子體積的1/2到2/3為好，液面太高將過早沸騰，會把需要的東西一起蒸餾出去；為了更好的蒸餾，在連接裝置與圓底燒瓶之間，加一個防沸球，這樣可以預(yù)防溶液未提純而直接沖到蒸餾液中

50、。</p><p><b>　　5結(jié)論</b></p><p>　　在粗提物、石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相中，石油醚相有最高的DPPH清除率、羥自由基清除率、Fe還原能力，且其清除能力與濃度成量效關(guān)系。總酚含量與蜈蚣藻各提取物的抗氧化活性之間具有一定的相關(guān)性。因此，多酚類物質(zhì)可能是蜈蚣藻各提取物的主要抗氧化成分之一，石油醚相抗氧化能力最強(qiáng)，是一類潛在的海洋生物天然抗

51、氧化劑，從而為蜈蚣藻多酚的進(jìn)一步開發(fā)利用提供依據(jù)。 </p><p><b>　　[參考文獻(xiàn)]</b></p><p>　　[1] 夏邦美.中國海藻志第二卷紅藻門第三冊[M].北京:科學(xué)出版社,2004:81-140.</p><p>　　[2] 盛建春,楊方美,胡秋輝. 海藻多糖生物活性研究[J]. 食品科學(xué),2005,26（3）：262-2

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