2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
已閱讀1頁,還剩61頁未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡介

1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述
  第一部分:BⅡB021對CML細(xì)胞株抑制生長、誘導(dǎo)凋亡的作用及其機(jī)制
  目的:研究BⅡB021對CML細(xì)胞株抑制生長和誘導(dǎo)凋亡的作用,并探索BⅡB021誘導(dǎo)CML凋亡的分子機(jī)制。
  方法:MTT法檢測BⅡB021對CML細(xì)胞株生長抑制的作用,AV/PI流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡,Western-blot法檢測Caspase-3、Caspase-9和PARP蛋白的表達(dá)變化。Wester

2、n-blot法檢測線粒體凋亡相關(guān)蛋白表達(dá)變化。Real-Time PCR檢測BⅡB021作用后BCR-ABL mRNA水平,Western-blot法檢測BCR-ABL蛋白水平及其下游的Jak/Stat通路、Akt/mTOR通路、Erk通路以及β-Catenin/c-Myc通路的蛋白表達(dá)量變化。激光共聚焦檢測BⅡB021作用后β-Catenin表達(dá)量的變化。
  結(jié)果:(1)BⅡB021能顯著抑制CML細(xì)胞株K562、K562/G

3、、32Dp210、32Dp210-T315I增殖,呈時(shí)間和濃度梯度依賴,48小時(shí)IC50分別是:513.99、603.53、110.08、148.07 nmol/L。(2)BⅡB021作用24小時(shí)后能明顯誘導(dǎo)CML細(xì)胞發(fā)生凋亡。Caspase-3、Caspase-9和PARP激活,Bak、Bad的蛋白表達(dá)量增加,Bid、Mcl-1、Survivin表達(dá)量減少,Bcl-2、Bcl-XL、Bax不變。(3)BⅡB021能在蛋白水平抑制BCR

4、-ABL和p-BCR-ABL的表達(dá),而在mRNA水平?jīng)]有減少,蛋白酶體抑制劑MG-132能逆轉(zhuǎn)BⅡB021誘導(dǎo)的BCR-ABL下降,而自噬溶酶體抑制劑氯喹則不能。(4) BⅡB021能在蛋白水平下調(diào)磷酸化的Stat3、Stat5、Erk1/2,下調(diào)總的Jak2和Akt。(5)BⅡB021能下調(diào)β-catenin/c-Myc通路的蛋白表達(dá)量。激光共聚焦顯微鏡觀察及分別提取胞核、胞漿蛋白,均顯示BⅡB021能同時(shí)減少胞核和胞漿中的β-cat

5、enin。
  第二部分: BⅡB021對CML細(xì)胞株誘導(dǎo)自噬的作用及其機(jī)制
  目的:研究BⅡB021誘導(dǎo)CML細(xì)胞發(fā)生自噬及其分子機(jī)制,探討B(tài)ⅡB021誘導(dǎo)的自噬在凋亡中的作用,與自噬抑制劑聯(lián)合應(yīng)用,為臨床CML治療提供新的方案。
  方法:Monodansylcadaverine染色、吖啶橙染色后熒光顯微鏡觀察嗜酸性小體。用攜帶mRFP-GFP標(biāo)記LC3的腺病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞,激光共聚焦顯微鏡觀察自噬小體。Wester

6、n-blot法檢測LC3Ⅰ/Ⅱ、p62、Beclin-1,mTOR-Ulk1通路蛋白水平變化。MTT法檢測生長抑制作用。用攜帶shRNA的慢病毒轉(zhuǎn)染細(xì)胞沉默Caspase-3。采用SPSS20統(tǒng)計(jì)處理軟件分析,以p<0.05作為有差別統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
  結(jié)果:(1)BⅡB021誘導(dǎo)CML細(xì)胞產(chǎn)生自噬小體。(2)BⅡB021促進(jìn)LC3Ⅰ向LC3Ⅱ轉(zhuǎn)化,減少p62和Beclin-1的表達(dá)量。(3)BⅡB021通過Akt-mTOR-Ulk

7、1通路誘導(dǎo)自噬。(4)BⅡB021與自噬抑制劑3-methyladenine或bafilomycinA1聯(lián)合應(yīng)用后顯著增加BⅡB021誘導(dǎo)的CML細(xì)胞凋亡,證明BⅡB021誘導(dǎo)保護(hù)性自噬。
  結(jié)論:通過一系列體外實(shí)驗(yàn),證明小分子抑制劑BⅡB021具有抗慢性粒細(xì)胞白血病的作用。它能激活線粒體通路誘導(dǎo)凋亡,并且對伊馬替尼耐藥株,特別是32Dp210-T315I也有明顯誘導(dǎo)凋亡的作用。BⅡB021主要通過蛋白酶體途經(jīng)誘導(dǎo)BCR-ABL

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論