長(zhǎng)牡蠣凈化技術(shù)及赤潮甲藻對(duì)其性成熟和早期發(fā)育的影響研究.pdf

1、長(zhǎng)牡蠣(Crassostrea gigas)又稱太平洋牡蠣,為廣溫廣鹽性,具有營(yíng)養(yǎng)豐富、味道鮮美,生長(zhǎng)速度快、經(jīng)濟(jì)效益高等優(yōu)點(diǎn),現(xiàn)已成為世界上最重要的經(jīng)濟(jì)貝類之一。我國(guó)長(zhǎng)牡蠣年產(chǎn)量達(dá)到近百萬噸,不僅滿足了國(guó)人的需求,而且出口國(guó)外多個(gè)國(guó)家和地區(qū)。
　　隨著經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,我國(guó)沿海水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)規(guī)模與產(chǎn)量不斷提高,但是同時(shí)近海海域環(huán)境不斷惡化,導(dǎo)致了大量有害物質(zhì)的滋生;同時(shí)排放的N、P等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)使得水體富營(yíng)養(yǎng)化,極大地增加了有害赤潮的爆發(fā)。貝

2、類為濾食性生物,且活動(dòng)性不強(qiáng),有害物質(zhì)的滋生與赤潮爆發(fā)會(huì)使貝類大量富集周圍水體中的有害微生物與毒素,這些貝類一旦被人類食用會(huì)極大地威脅著人類的健康。同時(shí)赤潮的爆發(fā)可能會(huì)對(duì)養(yǎng)殖貝類造成不利影響。在此背景下,本研究開展了長(zhǎng)牡蠣凈化技術(shù)及赤潮甲藻對(duì)其性成熟和早期發(fā)育影響的研究。
　　1.長(zhǎng)牡蠣對(duì)大腸桿菌的的積累與消除研究
　　分別將長(zhǎng)牡蠣置于接種了不同濃度大腸桿菌(Escherichia coli)的海水中,研究牡蠣對(duì)大腸桿菌的積

3、累與消除情況,同時(shí)通過研究積累與消除過程中各組織內(nèi)大腸桿菌濃度變化,探討牡蠣對(duì)微生物的積累與消除模式。結(jié)果顯示,牡蠣體內(nèi)大腸桿菌的濃度積累量約為周圍水體的兩個(gè)對(duì)數(shù)值左右,而36 h后消除效果約為2-3個(gè)對(duì)數(shù)值。牡蠣體內(nèi)大腸桿菌在最初的1h內(nèi)迅速積累,之后積累速度漸緩并達(dá)到最高值,最高值處于波動(dòng)狀態(tài)。而消除模式與積累模式類似,都是在最初快速消除,之后速度顯著降低并在24 h后處于波動(dòng)狀態(tài)。牡蠣感染與凈化過程中不同組織的積累與消除模式可能是

4、不同的,肌肉生物富集系數(shù)最低但消除后殘留百分比是最高的;消化腺、性腺的生物富集系數(shù)最高,消除最快且殘留百分比最低。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明牡蠣消除效果與初始濃度有關(guān),一般牡蠣體內(nèi)大腸桿菌的濃度在不超過105 MPN/mL的情況下,經(jīng)36 h消除后,牡蠣便可達(dá)到安全食用標(biāo)準(zhǔn)。通過各組織中微生物含量變化,我們推測(cè)牡蠣體內(nèi)有害微生物的積累與消除可能與其攝食與消化有關(guān)。
　　2.長(zhǎng)牡蠣大腸桿菌的凈化技術(shù)研究
　　靜水中人工污染長(zhǎng)牡蠣,使其

5、體內(nèi)大腸桿菌濃度達(dá)到5 log MPN/100g,放入紫外線循環(huán)系統(tǒng)中對(duì)其進(jìn)行凈化,研究不同環(huán)境因子對(duì)牡蠣體內(nèi)大腸桿菌凈化的影響。在前6 h內(nèi)大腸桿菌迅速凈化,之后速度減慢,到36 h時(shí)基本能凈化2個(gè)甚至是3個(gè)對(duì)數(shù)值。而不同環(huán)境因子的實(shí)驗(yàn)結(jié)果則表明:當(dāng)貝水比為1:6,水交換律為3次/h,溫度為15 oC或25 oC,凈化層數(shù)為上層時(shí)凈化效果最佳。
　　3.鏈狀亞歷山大藻對(duì)長(zhǎng)牡蠣性成熟及繁殖力的影響
　　本研究模擬產(chǎn)毒藻鏈狀亞

6、歷山大藻(Alexandrium catenella)赤潮,研究其對(duì)長(zhǎng)牡蠣性成熟的影響。長(zhǎng)牡蠣從2012年4月到6月期間投喂鏈狀亞歷山大藻,檢測(cè)其攝食率、組織學(xué)變化、生化成份及后代發(fā)育,并將投喂等鞭金藻(Isochrysis galbana)的牡蠣做為對(duì)照組。結(jié)果表明,鏈狀亞歷山大藻可以作為一種食物來源,但是會(huì)抑制長(zhǎng)牡蠣對(duì)等鞭金藻的濾食。在投喂甲藻組中,長(zhǎng)牡蠣閉殼肌、外套膜、卵巢及腸小管等組織出現(xiàn)了顯著的病理學(xué)變化。鏈狀亞歷山大藻的存在

7、會(huì)對(duì)牡蠣的同化作用、生化成份及后代產(chǎn)出產(chǎn)生不利影響。同時(shí),本研究結(jié)果證明該藻會(huì)影響牡蠣卵子的質(zhì)量,并可能會(huì)使之后的受精、胚胎發(fā)育及幼蟲成活率等受到影響。
　　4.鏈狀亞歷山大藻對(duì)長(zhǎng)牡蠣早期發(fā)育的影響
　　將胚胎及幼蟲置于不同濃度的鏈狀亞歷山大藻中,研究其對(duì)長(zhǎng)牡蠣早期發(fā)育的影響。鏈狀亞歷山大藻在濃度為100 cells/mL時(shí)便會(huì)對(duì)牡蠣胚胎及新孵化幼蟲的發(fā)育產(chǎn)生抑制作用。擔(dān)輪幼蟲發(fā)育至D形幼蟲時(shí)較遲緩,在甲藻濃度超過1000

8、cells/mL時(shí)甚至無法發(fā)育為D形幼蟲。鏈狀亞歷山大藻濃度超過300 cells/mL時(shí)會(huì)對(duì)可攝食幼蟲的發(fā)育及幼蟲的附著產(chǎn)生不利影響。胚胎及擔(dān)輪幼蟲對(duì)該藻較敏感,其成活率在濃度超過300 cells/mL時(shí)顯著降低;D形幼蟲的存活率在該藻濃度超過600 cells/mL時(shí)顯著降低;而殼頂期幼蟲及眼點(diǎn)幼蟲只有在2000 cells/mL的高濃度組中,其成活率才受到顯著影響。本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明鏈狀亞歷山大藻會(huì)嚴(yán)重影響長(zhǎng)牡蠣早期階段的生長(zhǎng)發(fā)

9、育,但是對(duì)不同發(fā)育階段其影響程度不同。
　　5.鏈狀亞歷山大藻作為餌料對(duì)長(zhǎng)牡蠣早期發(fā)育的影響
　　大多數(shù)海洋貝類的幼蟲是浮游的,這類幼蟲為階段性浮游生物,以周圍水體中的微藻為食。同時(shí)這一階段也是甲藻赤潮的高峰期,因而貝類浮游幼蟲極有可能會(huì)受到赤潮甲藻的影響。本研究以鏈狀亞歷山大藻作為單一餌料或者混合餌料投喂不同階段的長(zhǎng)牡蠣幼蟲與稚貝,研究其對(duì)長(zhǎng)牡蠣幼蟲與稚貝生長(zhǎng)發(fā)育及存活的影響。結(jié)果表明,鏈狀亞歷山大藻作為單一餌料時(shí)對(duì)幼蟲及

10、稚貝的發(fā)育與存活具有明顯的不利影響,對(duì)D形幼蟲的影響尤為顯著。鏈狀亞歷山大藻作為混合藻,比例超過1/2時(shí),餌料會(huì)抑制D形幼蟲、殼頂期幼蟲的存活率,同時(shí)對(duì)眼點(diǎn)幼蟲的附著產(chǎn)生顯著的不利影響。而隨著甲藻比例的增高,餌料對(duì)貝類早期發(fā)育的其它階段的不利影響也隨之增強(qiáng)。本研究顯示,貝類幼蟲能夠?yàn)V食鏈狀亞歷山大藻并將其作為餌料,但是對(duì)其利用率不高,幼蟲的營(yíng)養(yǎng)儲(chǔ)備明顯受到影響,發(fā)育遲緩且個(gè)體較小。同時(shí)本研究也表明,貝類不同時(shí)期受該藻影響程度不同,D形幼