bCAT通過(guò)減少白色念珠菌的粘附抑制生物被膜形成的機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　明確bCAT是否具有抑制白色念珠菌生物被膜形成的作用，并探索該作用與粘附基因HWP1表達(dá)的關(guān)系。
　　方法：
　　白色念珠菌標(biāo)準(zhǔn)菌株ATCC10231及臨床菌株作為研究對(duì)象，XTT法檢測(cè)其形成生物被膜的能力，通過(guò)CLSI-M27-A3方法確定bCAT抗浮游狀態(tài)MIC值，XTT法及菌落計(jì)數(shù)檢測(cè) bCAT抑制生物被膜形成作用，并計(jì)算代謝活性確定BIC50，bCAT減少白色念珠菌的粘附作用經(jīng)倒置顯微鏡下觀察及菌落

2、計(jì)數(shù)法確定，并采用RT-PCR檢測(cè)HWP1的表達(dá)，空白對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組使用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，并通過(guò)2-ΔΔCt法計(jì)算相對(duì)表達(dá)量。統(tǒng)計(jì)方法為單因素方差分析，組內(nèi)比較采用Dunnett T3檢驗(yàn)。
　　結(jié)果:
　　標(biāo)準(zhǔn)菌株及臨床菌株均有強(qiáng)生物被膜形成能力。bCAT抗浮游狀態(tài)的白色念珠菌MIC值為40-80μmol/L，抑制白色念珠菌生物被膜形成BIC50為80-160μmol/L；并且 bCAT能減少白色念珠菌的粘附作用,空白對(duì)照組

3、菌落計(jì)數(shù)為27822.22±2472.74cfu，bCAT濃度為160、80、40、20、10μmol/L時(shí)的菌落個(gè)數(shù)分別為5355.55±1264.03cfu、11377.78±2232.58cfu、17488.89±1136.27cfu、22377.78±3521.99cfu、26044.44±1329.57cfu。組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=147.018，P=0.000），組內(nèi)比較發(fā)現(xiàn)160、80、40μmol/L處理組與不含b

4、CAT時(shí)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。RT-PCR發(fā)現(xiàn)160μmol/L處理組HWP1相對(duì)表達(dá)量為不含bCAT的空白對(duì)照組的12.24±11.55%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=58.985，P＜0.05）。
　　結(jié)論:
　　bCAT能夠有效抑制白色念珠菌形成生物被膜，其機(jī)制可與降低HWP1基因的表達(dá)從而減少白色念珠菌的粘附有關(guān)。以上研究結(jié)果為了解CGA衍生的天然抗菌多肽的先天性免疫作用增加了新的數(shù)據(jù)，并且為臨床白色念珠菌