轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜T-,1-代的遺傳穩(wěn)定性與抗病生理特性鑒定.pdf

1、甜菜是世界上重要的糖料作物，甜菜在生產(chǎn)中遇到立枯病、褐斑病、叢根病、根腐病等諸多病害，嚴重制約了其產(chǎn)量和品質(zhì)。在防治甜菜諸多病害的方法中，抗病品種的選育是最有效的。核糖體失活蛋白（RIPs）是一類對真菌、細菌、病毒等具有廣譜抗性的可以抑制病菌生長增殖能力的蛋白質(zhì)。本實驗采用PCR、RT—PCR方法對第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜進行了分子檢測，并對經(jīng)過分子檢測鑒定為陽性的植株進行抗病性鑒定及生理特性的研究，從而在第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜中篩選

2、出具有遺傳穩(wěn)定性、抗病性兼具其他性狀優(yōu)良的轉(zhuǎn)基因株系，為甜菜抗病育種提供基礎材料和理論依據(jù)。本實驗取得的主要研究結果如下： 1、對第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜進行PCR和RT—PCR檢測，表明RIPs基因已成功轉(zhuǎn)入甜菜并能穩(wěn)定遺傳； 2、對獲得的轉(zhuǎn)化植株進行抗褐斑病性鑒定，采用噴霧接種法接種甜菜褐斑病菌，濃度為7000-10000個孢子（菌絲、菌絲斷裂體）/ml，接種第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜植株6株，獲得對甜菜褐斑病具有抗性

3、的植株4株； 3、對獲得的轉(zhuǎn)化植株進行抗叢根病性鑒定，采用摩擦接種的方法接種甜菜壞死黃脈病毒（BNYW），接種第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜植株4株，獲得對BNYW病毒具有抗性的植株2株； 4、對經(jīng)過分子檢測呈陽性和經(jīng)過抗病性鑒定的第一代轉(zhuǎn)RIPs基因甜菜植株的光合作用、呼吸作用、氮代謝、防御酶系相關生理指標進行研究與分析，結果表明RIPs基因的轉(zhuǎn)入并沒有對甜菜植株的生長和生理代謝產(chǎn)生負面影響。 5、通過分子檢測與抗病