2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題（含答案詳解+作文范文）_第1頁(yè)
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1、從家蠶蛹期cDNA文庫(kù)中獲得一條序列長(zhǎng)度為50.bp的cDNA，其編碼的166個(gè)氨基酸組成的蛋白質(zhì)與已知的RNA結(jié)合蛋白Y14序列同源性較高，含有一個(gè)保守的RNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域，命名為家蠶類Y14基因BmY1.(Genbank登錄號(hào)為FJ602787)。該蛋白質(zhì)預(yù)測(cè)分子量為18 kDa。我們將其ORF序列克隆到原核表達(dá)載體中，構(gòu)建重組質(zhì)粒，經(jīng)雙酶切鑒定及序列測(cè)定正確后轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)，用IPTG誘導(dǎo)成功表達(dá)該蛋白，并憑質(zhì)譜鑒定

2、確定表達(dá)蛋白為目的蛋白。表達(dá)的融合蛋白經(jīng)親和層析純化后，免疫兔獲得特異性強(qiáng)的多克隆抗體。利用該抗體以ELISA和Wester.blot檢測(cè)家蠶七個(gè)發(fā)育階段和五齡幼蟲(chóng)多種組織或器官中BmY14蛋白的表達(dá)和分布，發(fā)現(xiàn)該蛋白在四齡、五齡幼蟲(chóng)、蛹、蛾四個(gè)發(fā)育階段均有表達(dá)，其中蛹中表達(dá)量最高；各個(gè)組織或器官中，氣囊中表達(dá)量最高，其次是血液和生殖器。利用抗體的免疫熒光標(biāo)記對(duì)家蠶Bm5細(xì)胞定位，觀察到熒光集中分布在細(xì)胞核。證實(shí)BmY14主要存在核中，

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