鴨生長(zhǎng)曲線擬合及MC4R、PPARγ基因與肌內(nèi)脂肪沉積的相關(guān)研究.pdf

1、黑素皮質(zhì)素受體-4（melanocortin-4 receptor,MC4R）和過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators activated receptor-γ，PPARγ)作為兩個(gè)調(diào)節(jié)動(dòng)物體內(nèi)脂肪代謝的重要基因，其mRNA表達(dá)量和基因多態(tài)性可能與肌內(nèi)脂肪含量密切相關(guān)。本研究以金陵白鴨、連城白鴨、櫻桃谷鴨和莆田黑鴨四個(gè)鴨種作為實(shí)驗(yàn)材料，采用分子數(shù)量遺傳學(xué)候選基因法，把肌內(nèi)脂肪性狀的表型信息與分子信

2、息結(jié)合起來(lái)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。通過(guò)改進(jìn)的索氏抽提法測(cè)定不同鴨種在4、6、8、10周齡時(shí)胸、腿肌中的肌內(nèi)脂肪含量。將MC4R和PPARγ基因作為影響鴨肌內(nèi)脂肪含量的候選基因，通過(guò)對(duì)其在鴨胸肌、腿肌中mRNA相對(duì)表達(dá)量的測(cè)定，分析其mRNA相對(duì)表達(dá)量與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)性;并對(duì)MC4R和PPARγ基因部分序列進(jìn)行PCR-RFLP分析，旨在探尋鴨MC4R和PPARγ基因的多態(tài)性，并對(duì)這些多態(tài)位點(diǎn)與肌內(nèi)脂肪含量之間進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析，確定所檢測(cè)的多態(tài)位點(diǎn)作

3、為分子輔助選擇標(biāo)記的科學(xué)性。主要結(jié)果如下:
　　1)采用Gompertz、Logistic、von Bertalanffy三種非線性數(shù)學(xué)模型擬合金陵白鴨、連城白鴨、櫻桃谷鴨、莆田黑鴨0～10周齡的體重增長(zhǎng)曲線，結(jié)果表明:上述三種曲線均能較好擬合4個(gè)鴨群的體重增長(zhǎng)過(guò)程，擬合度(R2)均在0.98以上，并在不同鴨群中挑選出相應(yīng)的最佳曲線，建立合理的體重增長(zhǎng)擬合方程，為提高選育和保種質(zhì)量提供了理論依據(jù)。
　　2)通過(guò)改進(jìn)的索氏抽提

4、法測(cè)定了4種鴨胸肌、腿肌中的肌內(nèi)脂肪含量，并對(duì)比分析了不同生長(zhǎng)點(diǎn)、不同品種的含量差異，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示在相同日糧水平下，不同品種的肌內(nèi)脂肪含量差異較顯著，整體上表現(xiàn)為地方品種高于雜交種，雜交種高于外來(lái)品種。另外腿肌中肌內(nèi)脂肪含量顯著高于胸肌中(P＜0.05)。
　　3)通過(guò)Real-time PCR分析MC4R和PPARγ基因在胸肌、腿肌中的表達(dá)量，結(jié)果顯示同一生長(zhǎng)階段，不同品種之間相同基因的表達(dá)量存在著顯著差異(P＜0.05)。4種

5、鴨胸肌中MC4R基因的表達(dá)量在后三個(gè)生長(zhǎng)階段均顯著高于腿肌中(P＜0.05)，在4廚齡時(shí)差異不顯著(P＞0.05);PPARγ基因的表達(dá)量表現(xiàn)為前兩個(gè)觀測(cè)點(diǎn)時(shí)胸肌中顯著高于腿肌中(P＜0.05)，后兩個(gè)觀測(cè)點(diǎn)時(shí)腿肌中顯著高于胸肌中(P＜0.05)。通過(guò)與相應(yīng)組織中肌內(nèi)脂肪含量的對(duì)比分析，發(fā)現(xiàn)MC4R和PPARγ基因的相對(duì)表達(dá)量與肌內(nèi)脂肪含量呈高度的負(fù)相關(guān)，可以為今后家禽育種工作提供分子標(biāo)記輔助選擇參考。
　　4)以4種鴨肌肉組織為

6、實(shí)驗(yàn)素材提取基因組DNA，針對(duì)MC4R和PPARγ基因CDS區(qū)設(shè)計(jì)7對(duì)特異性引物，并對(duì)其進(jìn)行PCR擴(kuò)增。測(cè)序結(jié)果顯示僅在引物MC4R-S1擴(kuò)增片段中發(fā)現(xiàn)多態(tài)位點(diǎn)，即MC4R基因CDS區(qū)197bp處發(fā)生了T→A的單堿基突變，導(dǎo)致了第66位氨基酸由纈氨酸變成了谷氨酸，屬于錯(cuò)義突變。通過(guò)PCR-RFLP法分析了S1擴(kuò)增片段，檢測(cè)到TT、TA、AA3種基因型，該多態(tài)位點(diǎn)多態(tài)信息含量(PIC)介于0.25到0.5之間，屬于中度多態(tài)，具有較高的遺傳