四個脂肪沉積相關(guān)基因的多態(tài)性、表達(dá)特征及其與豬背膘厚的關(guān)系.pdf

1、豬是與人類關(guān)系最為密切的家畜之一，它與人們的日常生活息息相關(guān)。豬肉是世界上消耗量最大的肉類，豬肉產(chǎn)量及豬肉的品質(zhì)在很大程度上關(guān)系著人們的正常生活。脂肪沉積的能力與豬的生長速度及豬肉品質(zhì)有著密切的聯(lián)系，本研究在以前工作的基礎(chǔ)上對二?；视王；D(zhuǎn)移酶(DGAT)基因、瘦素(leptin)基因及蘋果酸酶1(ME1)基因在分子和蛋白水平上進(jìn)行了研究。 DGAT酶是一種微粒體酶，催化二?；视图由现舅狨；纬扇８视?即甘油三酯)，是

2、合成甘油三酯的限速酶。DGAT酶有兩種類型DGAT1和DGAT2。兩者的作用機(jī)制的差別尚未研究清楚。已發(fā)現(xiàn)DGAT1基因翻譯起始位點(diǎn)(ATG)上游241bp處存在由于A堿基的缺失造成的SNP。本試驗采用PCR-SSCP的方法分別對大白豬、杜洛克、長白豬、萊蕪豬、大蒲蓮豬、魯萊黑豬和商品豬群體進(jìn)行了基因型頻率和基因頻率的檢測。x2檢測顯示除商品豬外其它豬種均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。將三種基因型與背膘厚進(jìn)行了關(guān)聯(lián)分析，并用

3、熒光定量PCR的方法對不同基因型間mRNA的表達(dá)量進(jìn)行了檢測。結(jié)果顯示，大白豬ins(A)/ins(A)與ins(A)/+之間背膘厚差異顯著(P<0.05)，其它豬種各基因型間生產(chǎn)性狀及mRNA表達(dá)的差異均不顯著(P>0.05)，ins(A)等位基因有利于脂肪的沉積和mRNA的表達(dá)，可能是脂肪沉積的有利基因。 比較了杜洛克和萊蕪豬成年豬和3日齡仔豬脂肪組織中DGAT1和DGAT2基因的表達(dá)量差別，結(jié)果顯示同一時期杜洛克兩種DGA

4、Ts基因的表達(dá)水平高于萊蕪豬，生長過程中萊蕪豬DGATs基因表達(dá)量的增長高于杜洛克豬，各豬種DGAT2基因表達(dá)量的增長高于DGAT1基因。對揭示中西方豬種脂肪沉積機(jī)制的不同提供一定的理論基礎(chǔ)。 Leptin基因是一個與攝食和能量代謝有關(guān)的基因，leptin基因敲除的ob/ob小鼠表現(xiàn)出肥胖的特征。Leptin通過作用于下丘腦的特殊受體OB-Rb來調(diào)節(jié)機(jī)體的攝食和能量代謝，從而影響脂肪的沉積。本研究發(fā)現(xiàn)豬的leptin基因啟動子

5、區(qū)-2825位點(diǎn)存在G→A的突變。PCR-SSCP的方法檢測并計算了杜洛克、大白豬、萊蕪豬、魯萊黑豬和商品豬群體的基因型頻率和基因頻率，結(jié)果表明西方豬種以G等位基因為主，本地豬種中則以A等位基因為主，X2檢測顯示除魯萊黑豬外，其它豬種均處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。對有背膘厚記錄的商品豬和魯萊黑豬進(jìn)行了G-2825A的多態(tài)性與生產(chǎn)性狀的相關(guān)分析。熒光定量PCR的方法檢測了不同基因型魯萊黑豬脂肪組織中l(wèi)eptin基因mRNA的

6、表達(dá)量。ELISA的方法檢測了不同基因型魯萊黑豬血清中l(wèi)eptin蛋白的表達(dá)量。無論是背膘厚、mRNA水平還是蛋白表達(dá)水平，三種基因型間差異均不顯著，僅存在GG>GA>AA的趨勢。推測這一位點(diǎn)的突變沒有影響到leptin基因及其蛋白leptin的表達(dá)。 蘋果酸酶1(ME1)是機(jī)體內(nèi)源性脂肪酸合成的關(guān)鍵酶，可催化蘋果酸氧化脫羧生成丙酮酸和CO2，并使NADP+還原成NADPH，而NADPH是脂肪酸合成及其碳鏈延長的重要輔酶。MEl