川渝地區(qū)HP-PRRS分子流行病學(xué)調(diào)查及自然病例豬血清IL-1和TNF-α含量測(cè)定.pdf

1、豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS)是由PRRSV(PRRS virus，PRRSV)引起的以懷孕母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)和死胎等繁殖障礙及仔豬呼吸道癥狀等為主要征候群的高度接觸傳染性疾病。2006年下半年以來(lái)，高致病力豬繁殖與呼吸綜合征(highpathogenic PRRS，HP-PRRS)自江西首次爆發(fā)以來(lái)，已在全國(guó)流行，給我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。研究

2、證實(shí)，我國(guó)分離的HP-PRRSV屬于美洲型變異株，其Nsp2基因出現(xiàn)部分缺失。 采用RT-PCR方法，對(duì)重慶及周邊地區(qū)自然病例的檢測(cè)工作，以了解PRRS的周期性流行規(guī)律。通過(guò)調(diào)查，我們發(fā)現(xiàn)，重慶及周邊地區(qū)于2006年12月傳入HP-PRRS，2007年5月后出現(xiàn)流行高峰，6月中旬開(kāi)始應(yīng)用HP-PRRSV滅活苗后，年底該病流行有所遏制。本文對(duì)2008年1月以來(lái)的HP-PRRS自然病例進(jìn)行了更加深入的研究，取得了如下結(jié)果：

3、1、2008年1月劍2009年1月一年中，重慶市的巴南、榮昌、大足、璧山、長(zhǎng)壽、銅梁、渝北、合川、開(kāi)縣等和四川省的瀘縣、自貢、內(nèi)江、宜賓、渠縣、犍為、西昌、大竹、大英、鄰水縣共計(jì)19個(gè)區(qū)(市、縣)31個(gè)豬場(chǎng)發(fā)生了‘無(wú)名高熱’病，臨床癥狀及病變均與HP—PRRS相似，采集的238份血清、肺、脾、淋巴結(jié)等病料，RT-PCR檢測(cè)Nsp2部分序列，HP-PRRSV陽(yáng)性134份，陽(yáng)性率為56.3％。其中，四川省樣品HP-PRRSV陽(yáng)性率為54.9

4、％。重慶市樣品HP—PRRSV陽(yáng)性率為59.6％。隨機(jī)選擇QX，YB，RC，QW和LS共計(jì)5份樣品的RT-PCR產(chǎn)物，克隆后在上海生工測(cè)序，結(jié)果是，QX，YB，RC，LS序列完全相同，與JXA1株同源性為96％，OW與JXA1株同源性為98％。 2、鑒于HP-PRRS防控中仍然有較大規(guī)模的發(fā)病，為降低死亡率，減少因病造成的經(jīng)濟(jì)損失，我們期望尋找到更加有效的治療和緊急防治措施，我們探索了自然病例持續(xù)體溫高的原因。查閱資料發(fā)現(xiàn)，促致

5、炎因子IL-1和TNF-α與體溫升高有密切關(guān)系。為此，我們?cè)?個(gè)發(fā)病豬場(chǎng)采集病豬(含2頭瀕死豬)血清73頭份，RT-PCR檢測(cè)出HP-PRRSV陽(yáng)性42份。從中隨機(jī)選20頭病豬進(jìn)行體溫與血清IL-1和TNF-α含量相關(guān)性分析測(cè)定。結(jié)果是，血清中TNF-α含量在發(fā)病豬與健康對(duì)照豬之間無(wú)顯著差異，與體溫升高無(wú)關(guān)，血清中IL-1含量在病豬組顯著高于健康對(duì)照組，但與體溫升高的相關(guān)性不能明確。HP-PRRSV感染的病豬血清中IL-1和TNF-α以

6、100 pg/mL為標(biāo)準(zhǔn)，大于者分別為14份(占70％)和5份(占25％)，低于者6份(占30％)和15份(75％)。2份瀕死豬血清IL-1和TNF-α含量均很低，小于20pg/mL。采自3個(gè)無(wú)發(fā)病豬場(chǎng)的外觀健康豬41份血清，HP—PRRSV RT—PCR檢測(cè)陽(yáng)性7份(占17％)，陰性34份(占83％)，IL-1和TNF-α含量以100 pg/mL為標(biāo)準(zhǔn)，大于者分別為9份(占21.95％)和10份(占24.39％)，低于者32份(占78

7、.05％)和31份(75.61％)。健康豬群中HP—PRRSV陽(yáng)性的7份血清樣品中IL-1和TNF-α含量以100pg/mL為標(biāo)準(zhǔn)，大于者分別為2份(占21.95％)和1份(占24.39％)，低于者5份(占78.05％)和1份(75.61％)。無(wú)論是病豬還是健康豬，綜合分析，IL-1在病豬、隱性感染和健康豬血清中含量分別為271.9±53.4pg/mL、46.74±19.1pg/mL和75.4±24.0pg/mL；TNF-α在病豬、隱性

8、感染和健康豬血清中含量分別為74.3±23.2pg/mL、52.4±29.5pg/mL和77.3±13.4pg/mL。方差分析表明，血清IL-1含量，病豬組明顯高于健康豬組，差異極顯著；病豬組高于隱性感染組，差異極顯著；隱性感染組與健康豬組差異不顯著。TNF-α在病豬、隱性感染和健康豬血清中含量變化不大，差異不顯著。試驗(yàn)結(jié)果顯示，HP—PRRSV自然病例中血清IL-1明顯升高，TNF-α含量無(wú)明顯變化。 3、采用在飼料中添加IL