小黑楊單倍體耐鹽基因（Bet-A）遺傳轉(zhuǎn)化的研究.pdf

1、土壤鹽漬化是影響農(nóng)林業(yè)生產(chǎn)和生態(tài)環(huán)境的嚴重問題.植物耐鹽機理和耐鹽植物的選育研究已成為當(dāng)今研究的熱點.甘氨酸甜菜堿（glycine betaine）是一種重要的調(diào)滲物質(zhì),在鹽脅迫下有些植物能通過體內(nèi)甘氨酸甜菜堿的積累保護細胞內(nèi)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)和功能,降低細胞水熱,從而來增加自身的耐鹽能力.因此甜菜堿合成酶基因被認為是最重要和最有希望的鹽脅迫抗性基因.源于大腸桿菌（Escherichia coli）的膽堿脫氫酶（cholinedehydrog

2、enase,CDH）能有效催化甘氨酸甜菜堿的合成.該實驗以農(nóng)桿菌（Agrobacteriumtumefaciens）為介導(dǎo)進行遺傳轉(zhuǎn)化,將編碼CDH的耐鹽基因（Bet-A）導(dǎo)入小黑楊（Populussimonii×P.nigra)單倍體植株（haploid)的基因組內(nèi),以期獲得耐鹽植株.實驗中對小黑楊單倍體組培系統(tǒng)進行了優(yōu)化,并探討了影響轉(zhuǎn)化率的幾個因素如pH值等.最終得到四個轉(zhuǎn)化株系,經(jīng)PCR檢測,全部產(chǎn)生特異性擴增譜帶,證明Bet-