基因槍和農(nóng)桿菌介導(dǎo)耐鹽基因EhHOG對小麥品種的遺傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、土壤鹽堿化是影響世界上作物生產(chǎn)的重要環(huán)境脅迫因素，嚴(yán)重影響了我國小麥的生產(chǎn)，培育耐鹽的小麥新品種對有效利用鹽堿地，擴(kuò)大小麥種植面積，提高小麥產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益具有重要意義。傳統(tǒng)育種方法在改良作物耐鹽堿性上存在諸多困難，使得小耐鹽堿麥育種進(jìn)展緩慢。而通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)將優(yōu)良的外源耐鹽基因?qū)氲叫←溒贩N之中，從而培育出耐鹽的小麥新品種已有可能。源于以色列死海絲狀真菌E.herbariorum的EhHOG為編碼絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)的基因，對

2、鹽有很強(qiáng)的耐性。本研究利用基因槍和農(nóng)桿菌兩種介導(dǎo)方法將EhHOG耐鹽基因?qū)氲讲煌男←溒贩N中，以期獲得耐鹽性強(qiáng)的小麥種質(zhì)，主要結(jié)果如下:
　　(1)大腸桿菌和農(nóng)桿菌EhHOG基因載體的獲得:本研究分別對大腸桿菌感受態(tài)菌株E.coli DH5α和農(nóng)桿菌感受態(tài)菌株AGL1進(jìn)行了EhHOG基因質(zhì)粒表達(dá)載體的轉(zhuǎn)化，PCR和雙酶切的驗(yàn)證結(jié)果表明轉(zhuǎn)化取得了成功;
　　(2)基因槍介導(dǎo)的小麥遺傳轉(zhuǎn)化:以普通小麥品種華麥2566、華麥21

3、52、鄭麥9023和硬粒小麥品種LDN這4個基因型的小麥品種為受體，采用基因槍法對耐鹽基因EhHOG進(jìn)行了遺傳轉(zhuǎn)化，最終獲得24株小麥抗性植株，初步檢測結(jié)果表明，其中有3株華2566和14株LDN呈現(xiàn)出EhHOG基因陽性;
　　(3)小麥農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系的建立和EhHOG基因的遺傳轉(zhuǎn)化:在查閱相關(guān)資料和結(jié)合相關(guān)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上建立了小麥的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化體系;在此基礎(chǔ)上，以普通小麥品種華麥2668、隴春23、科農(nóng)199和硬粒小麥品種LDN這4