2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、本試驗(yàn)旨在從細(xì)胞自噬角度研究四氧化三鐵磁性納米粒子(Fe3O4 Magnetic Nanoparticles,F(xiàn)e3O4-MNP)對(duì)禽源細(xì)胞腸炎沙門(mén)氏菌(Salmonella enteritidis,SE)感染結(jié)局的調(diào)控作用。
  試驗(yàn)一:腸炎沙門(mén)氏菌感染誘導(dǎo)LMH細(xì)胞自噬的研究。選擇雞肝癌細(xì)胞(LMH細(xì)胞)為研究對(duì)象,構(gòu)建了SE感染模型。于感染后24 h(24 hours post infection,24 hpi)收集細(xì)胞,以

2、透射電鏡(Transmission electron microscope,TEM)和Western-blot(WB)方法檢測(cè)自噬的發(fā)生情況,結(jié)果表明:SE SC070株感染條件為感染劑量5×107cfu/mL、感染時(shí)間1h時(shí),大部分LMH細(xì)胞都有SE侵入,而細(xì)胞狀態(tài)不受太大影響,未出現(xiàn)細(xì)胞質(zhì)松散或細(xì)胞崩解;TEM結(jié)果顯示,SE感染組LMH細(xì)胞內(nèi)可見(jiàn)大量包裹SE的的自噬結(jié)構(gòu),而對(duì)照組LMH細(xì)胞內(nèi)未見(jiàn)明顯自噬結(jié)構(gòu);WB結(jié)果顯示SE感染組L

3、C3-Ⅱ/β-actin比值顯著高于對(duì)照組(P<0.05),p62/β-actin比值極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。
  試驗(yàn)二:Fe3O4-MNP對(duì)腸炎沙門(mén)氏菌的調(diào)控作用。在SE SC070株感染LMH細(xì)胞后,添加不同劑量(50、100、200、400μg/mL)的Fe3O4-MNP進(jìn)行處理,同時(shí)設(shè)置不添加Fe3O4-MNP處理的對(duì)照組。于感染后不同時(shí)間點(diǎn)收集LMH細(xì)胞,通過(guò)CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞活性,平板計(jì)數(shù)法計(jì)數(shù)胞內(nèi)菌數(shù)量

4、。結(jié)果顯示:6 hpi時(shí),與對(duì)照組相比,各劑量的Fe3O4-MNP處理均對(duì)胞內(nèi)菌數(shù)量無(wú)顯著影響(P>0.05),200μg/mL和400μg/mL兩組顯著降低了細(xì)胞活性(P<0.05);12 hpi時(shí),與對(duì)照組相比,各劑量的Fe3O4-MNP處理均極顯著降低了胞內(nèi)菌數(shù)量(P<0.01),100μg/mL組有增加細(xì)胞活性的趨勢(shì)(P>005),50μg/mL和200μg/mL兩組對(duì)細(xì)胞活性無(wú)顯著影響(P>0.05),400μg/mL組顯著抑

5、制了細(xì)胞活性(P<0.05);18 hpi時(shí),與對(duì)照組相比,各劑量Fe3O4-MNP均極顯著降低了胞內(nèi)菌數(shù)量(P<0.01),50μg/mL組對(duì)細(xì)胞活性無(wú)顯著影響(P>0.05),而100、200和400μg/mL三組均極顯著降低了細(xì)胞活性(P<0.01);24hpi時(shí),與對(duì)照組相比,各劑量Fe3O4-NPs均極顯著降低了胞內(nèi)菌數(shù)量和細(xì)胞活性(P<0.01),且劑量為400μg/mL時(shí)最低;30hpi時(shí),與對(duì)照組相比,各劑量Fe3O4-

6、MNP均極顯著降低了胞內(nèi)菌數(shù)量和細(xì)胞活性(P<0.01),且劑量越大,胞內(nèi)菌數(shù)量越少,細(xì)胞活性越弱。
  試驗(yàn)三:自噬在Fe3O4-MNP調(diào)控腸炎沙門(mén)氏菌感染中的作用研究。在SE SC070株感染LMH細(xì)胞后,添加100μg/mL的Fe3O4-MNP進(jìn)行處理(SN組),同時(shí)設(shè)置不添加Fe3O4-MNP處理的對(duì)照組(SE組)。于12 hpi收集細(xì)胞,以TEM和WB方法檢測(cè)自噬的發(fā)生情況,結(jié)果表明:WB結(jié)果顯示SN組LC3-Ⅱ/β-a

7、ctin比值顯著高于SE組(P<0.05),p62/β-actin比值顯著低于SE組(P<0.05);TEM結(jié)果顯示,與SE組相比,SN組胞漿內(nèi)除了可見(jiàn)包裹SE的自噬結(jié)構(gòu)外,還可見(jiàn)包裹SE和Fe3O4-MNP的自噬結(jié)構(gòu)。
  綜上所述:本試驗(yàn)中SE感染模型構(gòu)建的合適條件為:感染劑量為5×107 cfu/mL,細(xì)菌和細(xì)胞共培養(yǎng)1 h;SE感染能夠誘導(dǎo)禽源細(xì)胞LMH發(fā)生自噬。Fe3O4-MNP能夠緩解LMH細(xì)胞SE感染,且劑量為100

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