二倍體馬鈴薯原生質(zhì)體融合創(chuàng)制抗青枯病的新種質(zhì).pdf

1、馬鈴薯(SolanumtuberosumL.)是世界上第四大糧食作物,具有豐富的野生資源。馬鈴薯青枯病是由茄科雷爾氏菌(Ralstoniasolanacearum)引起的毀滅性土傳病害。目前的馬鈴薯栽培種中沒(méi)有發(fā)現(xiàn)高抗青枯病的材料,而少數(shù)具有抗性或耐性的野生種及原始栽培種又與普通栽培種存在雜交障礙。體細(xì)胞雜交技術(shù)為利用這些野生種和原始栽培種資源中的青枯病抗性基因提供了新方法。本研究旨在通過(guò)抗青枯病的馬鈴薯二倍體野生種S.chacoens

2、e和二倍體雜交群體后代BW2與優(yōu)良雙單倍體栽培種DH1、DH3和DH4的原生質(zhì)體融合進(jìn)行優(yōu)良性狀重組,創(chuàng)制抗青枯病的四倍體馬鈴薯新種質(zhì)。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.共配制融合組合6個(gè),BW2與雙單倍體栽培種融合的3個(gè)組合共形成1432個(gè)愈傷組織,未分化出再生植株,而S.chacoense與雙單倍體栽培種融合的3個(gè)組合共形成144個(gè)愈傷組織,分化出20個(gè)再生植株,表明基因型對(duì)愈傷組織的形成和植株再生有影響。
　　 2.將

3、20個(gè)再生株系經(jīng)RAPD和ISSR標(biāo)記鑒定,有11個(gè)株系為真正的體細(xì)胞雜種,雜種植株的比例為55％,其余9個(gè)株系為野生種親本S.chacoense的再生類型。用流式細(xì)胞儀分析再生植株的倍性水平,結(jié)果表明,11個(gè)體細(xì)胞雜種中,有8個(gè)為六倍體,另外四倍體、七倍體、混倍體各有1個(gè)。
　　 3.對(duì)11個(gè)體細(xì)胞雜種株系進(jìn)行胞質(zhì)分析,結(jié)果表明,有7個(gè)株系發(fā)生了細(xì)胞質(zhì)的重組,占雜種株系的63.6％。11個(gè)體細(xì)胞雜種中,有10個(gè)為野生種親本S.

4、chacoense的葉綠體類型；6個(gè)體細(xì)胞雜種為栽培種親本的線粒體類型,3個(gè)為野生種親本的線粒體類型,還有2個(gè)體細(xì)胞雜種同時(shí)融合有雙親的線粒體。
　　 4.利用青枯菌生理小種1號(hào)菌株對(duì)體細(xì)胞雜種及其親本的試管苗進(jìn)行傷根接種,方差分析結(jié)果表明,所有體細(xì)胞雜種的青枯病抗性均顯著高于雙單倍體親本,其中有3個(gè)株系表現(xiàn)出比野生種親本S.chacoense更強(qiáng)的抗病性,6個(gè)株系的抗性水平與S.chacoense沒(méi)有顯著差異,另外2個(gè)株系的抗