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1、分類號(hào)VDC碩士學(xué)位論文密級(jí)基因敲除HPVl6E6對(duì)宮頸癌細(xì)胞p63蛋白的影響Effectsofp63proteinincervicalcancercellswithknockoutingm)v16E6gene研究生姓名:學(xué)科專業(yè):學(xué)院(系、所):導(dǎo)師:李瑛花婦產(chǎn)科湘雅醫(yī)院李新國(guó)教授論文答辯日期:投絲車圭直!l魚答辯委員會(huì)主席:1i沲。中南大學(xué)二O一二年五月碩士學(xué)位論文中文摘要摘要目的:通過(guò)分析不同HPV感染狀態(tài)的宮頸癌細(xì)胞株在siRN
2、A沉默HPVl6E6后細(xì)胞內(nèi)p63蛋白的異構(gòu)體TAp63a和ANp63a在mRNA和蛋白水平上的表達(dá)變化,為宮頸癌的發(fā)生機(jī)制研究提供新的理論依據(jù),為使用RNA干擾技術(shù)治療宮頸癌的可行性提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:Westernblotting檢測(cè)不同宮頸癌細(xì)胞內(nèi)p63的表達(dá)水平;構(gòu)建HPVl6E6的siRNA,轉(zhuǎn)染HPVl6,18陽(yáng)性的CaSki細(xì)胞,HPVl6陽(yáng)性的SiHa細(xì)胞及HPVl8陽(yáng)性的HeLa宮頸癌細(xì)胞;realtimePCR檢測(cè)沉
3、默前后TAp63a和ANp63amRNA的表達(dá)變化;Westernblotting檢測(cè)沉默前后TAp63a和ANp63a,p53和p21的蛋白表達(dá)變化;使用SPSSl70進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:1p63在C33A,CaSki,SiHa和HeLa細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平:Westernblotting檢測(cè)結(jié)果顯示,ANp63a在C33A,CaSki,SiHa和HeLa細(xì)胞內(nèi)的表達(dá)水平分別為154860037,115230048,049670058,0
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