橘小實蠅蛋白餌劑的研究.pdf

1、本論文主要研究了水解蛋白的提取工藝、植物源引誘物質(zhì)的選擇、農(nóng)藥的毒力測定、蛋白餌劑的合成與生物測定、蛋白餌劑的田間應(yīng)用、蛋白餌劑對輻射不育雄蟲的影響、營養(yǎng)對實蠅種群生殖力和生命表的影響共7個方面，結(jié)果如下：
　　 (1)水解蛋白是橘小實蠅蛋白餌劑的核心組成成分，本文采用了過篩、破壁、自溶、濃縮和酶解等方法，研究了從啤酒廢酵母中提取水解蛋白的加工工藝。結(jié)果表明，對原料進行過80目篩預(yù)處理效果較好，溶液均勻，比重和蛋白質(zhì)含量分別為1

2、.02和5.93μg.mL-1；加酶破壁的效果優(yōu)于高溫破壁，研究發(fā)現(xiàn)，添加0.20[％]纖維素酶價格低、效率高，50℃條件下反應(yīng)2 h，蛋白質(zhì)含量增加至13.72μg.mL-1；添加NaCl作為促溶劑的效果明顯優(yōu)于Tween20和乙醇，結(jié)合單因素試驗，對自溶反應(yīng)進行正交實驗設(shè)計，結(jié)果顯示，最佳自溶條件為：溫度35℃，pH值6.0，時間4 h，NaCl添加量為3[％]。濃縮反應(yīng)的實驗結(jié)果表明，90℃條件下，濃縮48 h效果最佳，溶液呈棕褐

3、色、香味醇厚，蛋白質(zhì)含量達32.50μg.mL-1；通過正交試驗，對酶解溫度、pH、時間和加酶量4個影響因素進行了分析，結(jié)果顯示，最佳工藝條件為：pH值6.0，溫度50℃，時間18h，加酶量為2.0 mg/mL。室內(nèi)生物測定的結(jié)果表明，水解蛋白對橘小實蠅的引誘率可達60.00[％]，其中雌性和雄性的引誘率分別為63.30[％]和56.70[％]。總糖與蛋白質(zhì)含量的比例是影響引誘率的重要因素，當(dāng)二者之比為200:1時，引誘率最高。

4、　　 (2)植物源引誘物質(zhì)是橘小實蠅蛋白餌劑的重要組成成分，本文測試了柑橘、木瓜、芒果、番石榴、楊桃的葉片提取物、果實以及已知植物次生物質(zhì)對橘小實蠅的引誘效果。植物提取物的生物測定結(jié)果表明，楊桃的二氯甲烷提取物的引誘效果最佳，平均引誘劑為20.83[％]，對于不同的萃取劑而言，二氯甲烷、乙醇提取物效果明顯優(yōu)于石油醚，三者提取物的平均引誘率分別為15.67[％]、15.17[％]和10.50[％]；對于不同寄主植物而言，柑橘提取物的效果

5、最佳，三種有機溶劑提取物的平均引誘率為18.33[％]，其中石油醚、二氯甲烷和乙醇提取物的引誘率分別為20.00[％]、15.83[％]和19.17[％]，其他植物提取物的引誘效果為楊桃＞木瓜＞芒果＞番石榴，三種有機溶劑提取物的平均引誘率分別為17.22[％]、11.67[％]、11.11[％]和10.56[％]。寄主果實的生物測定結(jié)果表明，柑橘的平均引誘率為65.83[％]，其中雌蟲和雄蟲的引誘率分別為61.67[％]和70.00[％

6、]，明顯高于楊桃、番石榴和木瓜，三者的引誘率分別為31.67[％]、31.67[％]和21.67[％]，與柑橘引誘率差異顯著(p＜0.05)。已知植物次生物質(zhì)的生物測定結(jié)果表明，甲基丁香酚的引誘效果最佳，平均引誘率為45.00[％]，其中雄蟲和雌蟲的引誘率分別為86.67[％]和3.33[％]；乙酸乙酯和番石榴香精的引誘效果次之，平均引誘率分別為32.50[％]和28.33[％]，其中雌蟲的引誘率均為36.67[％]；楊桃香精和檸檬酸的

7、引誘效果較差，平均引誘率分別為25.00[％]和26.67[％]。
　　 (3)在實驗室條件下，采用藥膜法和餌劑加毒法分別測定了多殺菌素、馬拉硫磷、阿維菌素、蟲螨腈和乙蟲腈5種農(nóng)藥對橘小實蠅的觸殺和胃毒作用。觸殺實驗結(jié)果表明，多殺菌素的觸殺效果最好，LC50是72.33 mg·L-1，95[％]置信區(qū)間為52.84～101.48 mg·L-1。其他農(nóng)藥的觸殺作用效果順序為：阿維菌素>馬拉硫磷>乙蟲腈>蟲螨腈，LC50分別為237

8、.06 mg·L-1、711.04 mg·L-1、1229.92 mg·L-1和1483.62 mg·L-1。胃毒實驗結(jié)果表明，阿維菌素和多殺菌素的胃毒作用效果較好，LC50分別是13.99 mg·L-1和15.76 mg·L-1，95[％]置信區(qū)間范圍分別為11.72～16.97 mg·L-1和13.09～19.23 mg·L-1。其他農(nóng)藥的胃毒作用效果順序為：蟲螨腈>乙蟲腈>馬拉硫磷，LC50分別為135.01 mg·L-1、150

9、.41 mg·L-1和261.52 mg·L-1。生物測定結(jié)果表明，添加農(nóng)藥后，水解蛋白的引誘效果會不同程度的下降，添加Spinosad后引誘效果最好，引誘率達到55.83[％]，與水解蛋白原液相比，引誘率僅下降了4.17[％]；添加阿維菌素和乙蟲腈的引誘效果間差異不顯著，引誘率分別為52.50[％]和49.17[％]；添加馬拉硫磷和蟲螨腈與其他處理間差異顯著，引誘率分別為35.83[％]和26.67[％]，與水解蛋白原液相比，下降幅度

10、分別達到40.28[％]和55.55[％]。
　　 (4)水解蛋白是蛋白餌劑的核心成分，本文主要測試了水解蛋白對不同日齡橘小實蠅的引誘活性，且結(jié)合應(yīng)用，研究了稀釋倍數(shù)、添加引誘物質(zhì)和多殺菌素對其引誘率的影響。室內(nèi)生物測定結(jié)果表明，水解蛋白對5日齡橘小實蠅的引誘效果最佳，平均引誘率可達60.00[％]，其中雌蟲和雄蟲的引誘率分別為63.30[％]和56.70[％]，與其他蛋白餌劑商品比較發(fā)現(xiàn)，其效果與Prima相當(dāng)，優(yōu)于GF-12

11、0，后兩者的引誘率分別為62.50[％]和44.20[％]。稀釋后引誘率會不同程度地下降，稀釋2倍的應(yīng)用效果最佳，引誘率為53.30[％]，僅下降了6.70[％]。添加一定量乙酸乙酯、番石榴香精和甲基丁香酚可顯著提高引誘率，三者的最佳比例分別是3.00[％]、4.00[％]和5.00[％]，引誘率分別為71.70[％]、63.30[％]和71.70[％]。隨著多殺菌素添加比例的增大，水解蛋白的引誘效果逐漸下降，添加0.05[％]的多殺菌

12、素時影響效果較低，平均引誘率為49.17[％]。室外生物測定結(jié)果表明，蛋白餌劑12 h內(nèi)的引誘率可達80.00[％]，最佳使用環(huán)境溫度為25～28℃。點噴的實驗結(jié)果表明，添加0.20[％]多殺菌素時誘殺效果最佳，12h的平均死亡率為36.67[％]。
　　 (5)應(yīng)用蛋白餌劑主要有懸掛誘集瓶和點噴兩種方式。本文主要研究了使用方法、使用量和周期等因素對引誘效果的影響，實驗結(jié)果表明，懸掛誘集瓶和點噴使用時，稀釋2倍的效果最佳，引誘和

13、死亡數(shù)量分別為5.33頭和6.67頭；引誘效果均隨著使用量的增加而增加，兩種方式的最佳使用量分別是15mL和30mL；使用周期均是5d，前2d的效果較為明顯，引誘和死亡數(shù)量分別是12.33頭和13.33頭，各占總數(shù)的71.15[％]和85.07[％]。懸掛誘集瓶實驗結(jié)果中發(fā)現(xiàn)：適當(dāng)增加pH值可提高引誘效果，pH值為6時引誘效果最佳，引誘數(shù)量為6.67頭，其中雌蟲和雄蟲的引誘數(shù)量分別為4.67頭和2.00頭；比較不同寄主果園、不同蛋白餌劑

14、和不同地點中應(yīng)用效果時發(fā)現(xiàn)，楊桃果園里的引誘效果比柑橘和蜜柚果園好，引誘數(shù)量為5.00頭；自制蛋白餌劑和Prima引誘數(shù)量間差異不顯著，分別為7.33頭和9.33頭，明顯高于GF-120；公園、果園和校園的引誘數(shù)量分別為11.73頭、7.00頭和5.33頭。點噴應(yīng)用的實驗結(jié)果表明，添加量為0.20[％]馬拉硫磷效果最佳，成蟲死亡數(shù)量為7.67頭。
　　 (6)應(yīng)用蛋白餌劑和昆蟲不育技術(shù)是防控實蠅類害蟲的兩個重要方法，本研究對如何

15、協(xié)調(diào)利用蛋白餌劑和不育雄蟲防治橘小實蠅具一定的指導(dǎo)意義。本文研究了蛋白餌劑對不同日齡、不同釋放密度的不育雄蟲的引誘作用，以及蛋白餌劑應(yīng)用后不同時間、添加農(nóng)藥對不育雄蟲的引誘效果。室內(nèi)生物測定結(jié)果表明，蛋白餌劑對不育雄蟲的引誘率明顯低于同日齡正常雄蟲，5日齡時最高分別為36.24[％]和48.93[％]，且隨著日齡的增加，引誘率會不同程度下降。室外生物測定結(jié)果表明，蛋白餌劑對不育雄蟲的引誘率隨著釋放密度的增加而上升，當(dāng)釋放密度為1.00頭

16、/m2時，蛋白餌劑12h的引誘率最高為58.30[％]，但不同釋放密度條件下的引誘率差異不顯著。蛋白餌劑對不育雄蟲的引誘效果隨著天數(shù)的增加而逐漸下降，第1、2天的引誘效果較好，引誘率分別為73.30[％]和51.70[％]，引誘數(shù)量占全部引誘數(shù)量的65.27[％]，5d后沒有引誘效果。當(dāng)混入0.02[％]多殺菌素點噴后，蛋白餌劑對不育雄蟲的誘殺效果隨著天數(shù)的增加而逐漸下降，第1、2天的誘殺效果較好，死亡率分別為63.30[％]和30.0

17、0[％]，誘殺數(shù)量占全部誘殺數(shù)量的80.26[％]，至第5天時已完全沒有效果，連續(xù)觀察發(fā)現(xiàn)殘留農(nóng)藥對不育雄蟲無觸殺作用。
　　 (7)蛋白質(zhì)和糖是實蠅生長發(fā)育過程中的兩個重要營養(yǎng)因素，本文研究取食不同比例蛋白質(zhì)和糖對實蠅實驗種群生殖力及生命表的影響，目的是為了解蛋白餌劑的作用機理提供理論指導(dǎo)。生殖力的研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)或糖含量較高時，實蠅種群的產(chǎn)卵量都很低，蛋白質(zhì)：糖為1：3組的產(chǎn)卵量大且穩(wěn)定，前6d的產(chǎn)卵量達1.10mL，

18、占10d產(chǎn)卵總量的68.32[％]。對于同一處理組而言，實蠅開始產(chǎn)卵后第1d和2d產(chǎn)卵量較大，其中第1d的產(chǎn)卵量最大為0.22mL，第3 d開始會不同程度地下降。種群生命表的研究結(jié)果表明，22日齡前，取食人工飼料的實驗種群前期的存活數(shù)量和生命期望高于取食白糖的種群的種群，但在產(chǎn)卵后15d，種群大量死亡速度迅速增加，25～28日齡間死亡數(shù)量高達76頭，相反，雖然取食白糖的種群的前期死亡數(shù)量較多，但死亡過程總體上較為平緩，25～28、28～