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文檔簡介
1、育種實踐中系譜錯誤會造成近交、種質(zhì)退化以及遺傳多樣性的丟失。為探討通過分子手段構(gòu)建分子系譜來修正錯誤系譜記錄的可行性,本研究以嶗山奶山羊和萊蕪黑山羊兩個品種,分別選擇具有系譜記錄的212只和61只個體為材料,從25個微衛(wèi)星位點中篩選了13個多態(tài)性較高的微衛(wèi)星位點,用于親權(quán)鑒定和分子系譜的構(gòu)建并對其可靠性進行評價。Cervus2.0軟件計算這13個微衛(wèi)星標記基因座位上的等位基因數(shù)及頻率、多態(tài)性信息含量(PIC)、群體觀察雜合度(Ho)、期
2、望雜合度(He)、單個位點的排除概率(EP)和多個位點的累積排除概率(CEP),并做了Hardy-Weinberg平衡檢測。用Pedigraph2.2軟件,構(gòu)建了以父系為基礎(chǔ)的半同胞家系系譜圖、各群體分子系譜圖,用SPSS軟件分析了每個位點的單親排除概率和雙親排除概率與PIC、He、Ho、K等多態(tài)性參數(shù)的關(guān)系,并對位點數(shù)及不同親本信息等影響親權(quán)鑒定的因素進行了模擬分析,用Molkin、MEGA4及GENECLASS2軟件對所構(gòu)建的分子系
3、譜進行遺傳特征分析。結(jié)果表明:
(1)所選用的13個微衛(wèi)星位點在嶗山奶山羊和萊蕪黑山羊兩個群體中,分別檢測到92和69個等位基因,平均等位基因數(shù)分別為5.75和7.67個,除BM302在黑山羊中PIC為0.452外,其它所有位點PIC值在兩個群體中均超過0.5,平均PIC含量分別為0.687和0.675,屬高度多態(tài)性位點。兩個群體的平均期望雜合度均較高,分別為0.71.2和0.730。所用的13個微衛(wèi)星位點可用于本研究親子
4、鑒定分析。
(2)親子關(guān)系排除概率在雙親都未知時,累積非父排除概率分別為0.992072和0.991889,置信度都在80%以上;在父本已知的基礎(chǔ)上進行母子親權(quán)鑒定,累積排除概率分別為0.999819和0.999796,置信度都在95%以上,最終從109個候選母親中找出152個后裔的母親,并用Pedigraph2.2構(gòu)建了5個以父系為基礎(chǔ)的家系分子系譜圖以及群體分子系譜圖,通過分子系譜與系譜記錄進行比較,在兩個山羊群體中共
5、發(fā)現(xiàn)5個個體與原有系譜記錄不符。
(3)位點刪除結(jié)果表明,在PIC較高的情況下隨位點數(shù)的減少,排除率降低的幅度比PIC較低時變化小,位點的多態(tài)信息含量保持在0.7左右時,僅用9個位點其CEP1和CEP2就能達到99%,位點PIC在0.6左右時,則需要11個微衛(wèi)星位點,位點數(shù)相同,排除概率因PIC的降低而降低。親權(quán)鑒定中各參數(shù)相關(guān)分析表明,單位點單親排除概率和單位點雙親排除概率跟PIC、He、Ho和K均相關(guān)極顯著,其中與PI
6、C的相關(guān)系數(shù)最大(0.99以上),其次為He和Ho,與位點的等位基因數(shù)目K相關(guān)系數(shù)最?。?.6)。減少親本信息結(jié)果表明,當(dāng)母本信息全部知道、父本信息在50%以上時,子代的親權(quán)鑒定成功率可以達到100%,而當(dāng)父本信息已知、母本信息在50%時,成功率僅為50%左右。
(4)利用Molkin vs3.0軟件分析了家系間的遺傳距離和5個家系的遺傳參數(shù),利用MEGA4遺傳分析軟件,基于親緣系數(shù)距離矩陣和共享等位基因距離矩陣,繪制了萊
7、蕪黑山羊和嶗山奶山羊的5個家系的NJ系統(tǒng)發(fā)育樹。利用GENECLASS2軟件,在99%的水平上,探測到5個家系中共13只第一世代遷移者,占總分配樣本的4.76%??傮w上講,在同品種中家系之間均保持一定的遺傳距離,5個家系都具有較為豐富的遺傳變異,家系內(nèi)個體間的親緣距離均在0.4以上。嶗山奶山羊個體與家系內(nèi)其他個體間的平均親緣關(guān)系明顯大于萊蕪黑山羊,這與萊蕪黑山羊品種每年從社會群體購買補充、保留有多個家系有關(guān)的實際情況相符。
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