蔬菜主要病害生防菌株CAB-1發(fā)酵工藝的優(yōu)化.pdf

1、生防菌株CAB-1是河北農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所植物病害生物防治試驗(yàn)室分離保存的一株生防細(xì)菌，該菌株對(duì)黃瓜白粉病、黃瓜灰霉病、番茄灰霉病和番茄葉霉病等蔬菜主要葉部病害均有較好的防效。
　　 本研究中所使用的黃瓜白粉病病原菌經(jīng)形態(tài)學(xué)鑒定為單絲囊殼屬（Sphaerothecafulginea）。本研究建立了黃瓜白粉病的生測(cè)體系，即通過選擇適當(dāng)培養(yǎng)基質(zhì)和黃瓜感病品種，在子葉完全展開時(shí)噴霧接種生防菌株CAB-1發(fā)酵液，24 h 后用噴霧

2、法接種黃瓜白粉菌分生孢子懸浮液，孢子濃度為3×105/ml -5×105個(gè)/ml，25℃-34℃的溫室培養(yǎng)，濕度保持在45％-75％之間，7 天對(duì)照處理發(fā)病全部達(dá)到9 級(jí)時(shí)，調(diào)查各處理病情并計(jì)算防效。通過CAB-1 菌株在16 種發(fā)酵培養(yǎng)基中的發(fā)酵液對(duì)黃瓜白粉病的防治效果進(jìn)行比較，試驗(yàn)結(jié)果表明：2 號(hào)培養(yǎng)基培養(yǎng)該菌株的無菌體培養(yǎng)液對(duì)黃瓜白粉病的防效優(yōu)于其他培養(yǎng)基。對(duì)2 號(hào)培養(yǎng)基對(duì)菌株CAB-1的發(fā)酵條件進(jìn)一步優(yōu)化，結(jié)果表明，25 ℃、初

3、始pH值7、轉(zhuǎn)速180 r/min、接種量1％、裝液量100 ml/250 ml、培養(yǎng)時(shí)間48 h，所得無菌體培養(yǎng)液對(duì)黃瓜白粉病的防效最高，是2 號(hào)培養(yǎng)基的最佳發(fā)酵條件。
　　 以黃瓜灰霉菌為靶標(biāo)，用生防菌株CAB-1 無菌體培養(yǎng)液制成含藥PDA 平板，比較了16 種發(fā)酵培養(yǎng)基無菌體培養(yǎng)液對(duì)黃瓜灰霉菌的抑制作用。結(jié)果表明，4 號(hào)培養(yǎng)基能夠產(chǎn)生抑菌物質(zhì)完全抑制番茄灰霉菌的生長(zhǎng)，是菌株CAB-1 抑制灰霉菌生長(zhǎng)的最適培養(yǎng)基。對(duì)菌株C

4、AB-1 抑菌物質(zhì)產(chǎn)生的發(fā)酵條件和特性進(jìn)一步優(yōu)化和研究表明，4 號(hào)培養(yǎng)基的最佳發(fā)酵溫度為31 ℃，最佳發(fā)酵時(shí)間為48 h。抑菌物質(zhì)穩(wěn)定性研究結(jié)果表明，菌株CAB-1 所產(chǎn)的抑菌物質(zhì)在60℃及其以下具有熱穩(wěn)定性；超聲波（100W）處理20 min對(duì)抑菌物質(zhì)的活性沒有影響，處理30 min 以上抑菌物質(zhì)的活性顯著下降；紫外線照射20 min、30 min、40 min 對(duì)抑菌物質(zhì)的活性沒有顯著影響，處理50 min 后其抑菌活性顯著降低。菌