中國(guó)部分地區(qū)草坪絲核菌的融合群鑒定及生防木霉菌株的篩選.pdf

1、隨著城市化進(jìn)程的不斷加快，草坪在城市綠化中的作用也越來越明顯。然而由于不當(dāng)?shù)乃使芾砗托藜?，草坪絲核菌病害的發(fā)生也越來越嚴(yán)重。目前，在對(duì)病害的防治中，提倡綜合防治，而生物防治，尤其是拮抗木霉在土傳病害防治中的作用尤為顯著。本研究對(duì)山東省青島、東營(yíng)、泰安、上海市、廣東省廣州等地的草坪絲核菌進(jìn)行了系統(tǒng)研究并篩選出了對(duì)優(yōu)勢(shì)融合群具有明顯拮抗作用的生防木霉菌株。具體結(jié)果有如下幾個(gè)方面：
　　 1．從山東省青島、東營(yíng)、泰安、上海市、廣東省

2、廣州等地采集草坪絲核菌病害標(biāo)本，采用常規(guī)組織分離法分離菌株獲得48個(gè)絲核菌菌株。融合群測(cè)定結(jié)果表明，這些菌株分別屬于多核絲核菌的WAG-Z、AG1-IA、AG4-HG-I融合群及雙核絲核菌的AG-A、AG-P、AG-L融合群構(gòu)成，其中WAG-Z群出現(xiàn)頻率最高，占全部菌株的70.83％，為優(yōu)勢(shì)融合群；其次是AG-A群，占14.59％；再依次為AG1-IA群，占分離菌株的8.34％；AG4-HG-I、AG-P和AG-L群均有1個(gè)菌株，均占分

3、離菌株的2.08％。另外AG-P群、AG-L群和AG-A群是國(guó)內(nèi)外首次從草坪上分離得到的三個(gè)融合群。
　　 2．分離獲得的草坪絲核菌，其菌絲經(jīng)DAPI染色后制成玻片，置于熒光顯微鏡下觀察，發(fā)現(xiàn)草坪絲核菌的細(xì)胞核相大致分兩種：多核和雙核，其中AG1-IA融合群的菌株細(xì)胞核數(shù)目多為5-11個(gè)；AG4-HG-I融合群的菌株細(xì)胞核數(shù)目為3-10個(gè)；WAG-Z融合群的菌株核相較為復(fù)雜，有單核細(xì)胞、雙核細(xì)胞及多核細(xì)胞，其中以多核為主；AG-

4、P、AG-L和AG-A融合群的菌株均為雙核。
　　 3．利用5.8SrDNA-ITS區(qū)序列分析法，對(duì)草坪絲核菌不同融合群菌株進(jìn)行了分子鑒定。結(jié)果表明，所有測(cè)試菌株其5.8S rDNA序列高度保守，ITS1、ITS2區(qū)存在不同程度的差異，隸屬不同融合群或不同亞群的菌株其5.8S rDNA-ITS區(qū)序列存在較大的差異，而相同融合群或亞群菌株的一致性較高，利用此基因序列對(duì)絲核菌不同融合群或亞群的菌株可以進(jìn)行有效區(qū)分和鑒定。
　　

5、 4．運(yùn)用灰色關(guān)聯(lián)度分析法，對(duì)10個(gè)初篩木霉菌株的生長(zhǎng)速度、耐性、產(chǎn)孢量、抗生作用等8個(gè)主要性狀指標(biāo)進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)和分析。結(jié)果表明，木霉菌株T05-037的灰色關(guān)聯(lián)度ri=0.9064最大，其次是T05-066和T05-048菌株，其灰色關(guān)聯(lián)度分別為0.8714和0.8712。表明T05-037、T05-066、T05-048這三個(gè)木霉菌株的綜合性狀與構(gòu)建的理想的參考菌株接近程度大，是比較理想的拮抗絲核菌的木霉生防菌株。其中，T05-0

6、37菌株的綜合評(píng)價(jià)結(jié)果最好。
　　 5．本試驗(yàn)篩選獲得的優(yōu)良木霉菌株T05-037，利用形態(tài)分類學(xué)的方法初步將其鑒定為綠色木霉（Trichoderma viride）。利用室內(nèi)平板對(duì)峙方法評(píng)價(jià)木霉菌株T05-037對(duì)隸屬不同融合群絲核菌的抑制作用。結(jié)果表明，T05-037木霉菌對(duì)供試的分屬4個(gè)不同融合群的絲核菌菌株都有較強(qiáng)的抑制作用（抑制率為55.52％－64.49％），其中T05-037菌株對(duì)屬于WAG-Z融合群的絲核菌菌株抑