天府肉羊種質(zhì)特性及重要候選功能基因研究.pdf

1、天府肉羊是在成都麻羊與薩能、努比亞,吐根堡、波爾山羊復(fù)雜雜交基礎(chǔ)上,按品系培育要求,采用群體繼代選育法進行同質(zhì)選配和橫交固定,輔助分子生物技術(shù)育成的專門化肉用山羊品系。本試驗對該品系的種質(zhì)特性進行了系統(tǒng)研究,并以CAST、POU1F1、MyoG、MSTN、PRLR、PRL作為其生產(chǎn)性狀的候選功能基因,篩選出了與該品系的肌肉品質(zhì)、生長發(fā)育、繁殖與泌乳性k狀顯著相關(guān)的遺傳效應(yīng)位點和分子標(biāo)記,結(jié)果表明:
　　 天府肉羊生產(chǎn)性能優(yōu)良,肉

2、用特征明顯,胸部寬深,肋骨開張良好,背腰平直,臀、股部肌肉豐滿,四肢粗壯,鼻梁稍隆起,耳大下垂,公、母羊均有角,頭部為黃色或黑色或白色,體軀被毛白色。公羊的初生、6月齡和成年體重分別為3.70kg、29.36kg、77.38kg,母羊分別為3.32kg、26.41kg、54.15kg,公羊的生長拐點時間和體重分別為4.7月齡、24.39kg,母羊分別為4.3月齡、19.36kg。經(jīng)產(chǎn)母羊哺乳期(60d)產(chǎn)奶量83.49kg,產(chǎn)羔率197

3、.5％。6月齡和周歲閹羊的胴體重分別為13.90kg、22.46kg,屠宰率分別為51.25％、52.64％,肌纖維直徑分別為28.14μm、31.44μm,嫩度剪切力分別為2.79kg、3.98kg。肌肉必需氨基酸含量9.90％,不飽和脂肪酸含量51.94％,C6、C8、C10等低級揮發(fā)性肪酸含量低,肉質(zhì)好,肉用性能突出,具有生產(chǎn)肥羔優(yōu)勢。
　　 首次成功克隆出天府肉羊鈣蛋白酶抑制蛋白基因(CAST),該基因(Genbank:

4、GU944861)cDNA全長2435bp,完整開放閱讀框為31～2217bp,編碼728個氨鑒酸,與綿羊、牛、猜的CAST基因同源性分別為88.8％～95.6％、83.8％～'92.2％、73.3％～81.8％。經(jīng)熒光定量檢測。該基因在多個組織中均有表達(dá),肌肉組織的表達(dá)最顯著高于內(nèi)臟組織,在背最長肌中的表達(dá)量最高。生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn),該蛋白氨基酸序列中存在4個保守結(jié)構(gòu)域,二級結(jié)構(gòu)以無規(guī)卷曲為主,富含親水區(qū)域,存在多個磷酸化位點。

5、>　　 天府肉羊CAST基因外顯子6具有豐富的多態(tài)性,存在AA,BB,CC,FF4種純合基因型和AB、AC,BD、EF4種雜合基因型。AA型為72位TG缺失,BB型為59位G→C突變、65位G→T突變,CC型為153位A→C突變,FF型為52位C→G突變、66位G→T突變、68位GTG插入。同時。該基因內(nèi)含子6第943位T堿基缺失,造成XmnⅠ酶切位點改變,形成MM、MN,NN3種些因型。FF基因型個體的嫩度剪切力和肌纖維直徑比CC型

6、分別高1.35kg和8.05μm,NN型比MM型分別高1.06kg和6.96μm,均達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)。試驗提示,CAST基因突變對天府肉羊肌肉品質(zhì)有顯著影響,其中CC和MM基因型個體的肌肉品質(zhì)更好。
　　 POU1F1基因內(nèi)含子4存存2個變異位點,分別為528位G→A突變和708何A缺失,形成GG,GK、KK3種基因型。GG基因型個體的2月齡胸圍顯箸大于GK型,GK型個體的2月齡體高顯著大于KK型,GG型個體的初

7、生重和2月齡體重、休K,體高、胸圍比KK型分別高0.61kg、2.83kg、4.01cm、4.75cm、5.41cm。均達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)。試驗提示,該基因突變對天府肉羊早期生長發(fā)育有顯著影響,其中GG基因型個體的生長性能更突出。
　　 MyoG基因同含子1第422位C→T突變,形成PP、PQ.QQ3種基因型,PP基因型個體的2月齡體重平和成年體重顯著高于FPQ、QQ型,PP、PQ型個體的6月齡休重顯著高于QQ型。

8、PP基因型個體的2月齡、6月齡和成年體重比QQ型分別高2.37kg、4,05kg、9.76kg,均達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)。試驗提示,該基因位點突變對天府肉羊生長發(fā)育有顯著影響,PP基因型個體的生長性能更突出。
　　 MSTN基因內(nèi)含子2的第3783位T→C顛換突變,導(dǎo)致EcoRV酶位點缺失,形成WW、WX、XX3種基因型。WW、WX基因型個體的2月齡胸顯顯著高于XX型,WW型個體的成年體重顯著高于WX、XX型,WW型個

9、體的成年胸圍顯著高于XX型。WW基因型個體的2月齡、6月齡和成年體重分別比XX型個體高3.17kg、4.91kg、10.71kg,均達(dá)到差異顯著水平(P＜0.05)。試驗提示,該基因位點突變對大府肉羊生長發(fā)育有顯著影響,WW基因型個體的生長性能更突出。
　　 PRLR基因外顯子10發(fā)現(xiàn)2個突變位點,52bp處G→A突變形成HH、HL、LL型3種基因型,220bp處T→C突變形成了SS、ST、TT另3種基因型。HH基因型經(jīng)產(chǎn)母羊的

10、產(chǎn)羔數(shù)比LL型高0.39只(P＜0.05),產(chǎn)奶量比LL型高11.53kg(P＜0.05):SS基因型經(jīng)產(chǎn)母羊的產(chǎn)羔數(shù)比ST型高0.68只(P＜0.05),產(chǎn)奶最比TT型高13.35kg(P＜0.05)。試驗提示。該基因突變對天府肉羊繁殖和泌乳性能有顯著影響,HH和SS基因型母羊的繁殖和泌乳性能更突出。
　　 PRL基因外顯子5的576bp發(fā)生C→A突變,檢測到RR、RZ,ZZ3種基因型。RR基因型經(jīng)產(chǎn)母羊的產(chǎn)羔數(shù)和產(chǎn)奶量顯著高

11、于RZ、ZZ型,RR基因型個體的產(chǎn)羔數(shù)比ZZ型高0.60只(P＜0.05),RR基因型個體的產(chǎn)奶量比RZ型高7.88kg(P＜0.05)。試驗提示,該基因位點對繁殖和泌乳性能有顯著影響,RR基因型母羊的繁殖和泌乳性能更突出。
　　 試驗表明:天府肉羊CAST,POU1F1,MyoG,MSTN、PRLR、PRL基因中分別存在與其生產(chǎn)性狀顯著相關(guān)的遺傳效應(yīng)位點和分子標(biāo)記.可以作為候選基因用于該品系生產(chǎn)性能的進一步選育提高。同時,研究