人類心臟發(fā)育候選基因hLBH的克隆與功能研究.pdf

1、　　心臟是脊椎動物器官發(fā)生過程中最早形成的器官之一。心臟發(fā)育是一個復(fù)雜的過程，它受一系列基因的精確調(diào)控。鑒定在心臟發(fā)育過程中起調(diào)控作用的基因和分子途徑，將促進(jìn)人們從分子水平認(rèn)識心臟發(fā)育和先天性心臟病發(fā)生的機制。在心血管系統(tǒng)疾病的研究中已發(fā)現(xiàn)，某些基因在時空上的表達(dá)紊亂可導(dǎo)致先天性心臟病，而對部分心血管系統(tǒng)病癥高發(fā)人群的研究也證明部分后天形成的心臟病與遺傳因素有關(guān)。通過人類胚胎心臟文庫克隆到了一個重要的人類基因hLBH。hLBH的cDNA

2、長3053bp，編碼一個105個氨基酸殘基的蛋白。其蛋白質(zhì)在進(jìn)化上從斑馬魚，小鼠到人類高度保守。Northernblot結(jié)果檢測到了一個3.1kb的轉(zhuǎn)錄本，hLBH在胚胎和成人時期在心臟有強烈的表達(dá)。在COS-7細(xì)胞中，與綠色熒光蛋白共轉(zhuǎn)染實驗表明該蛋白定位于胞核與胞質(zhì)之中。隨后將hLBH與Gal4-DNA結(jié)合區(qū)域形成融合蛋白后，與VP16一起共轉(zhuǎn)染，通過熒光素酶檢測實驗表明，hLBH是一個轉(zhuǎn)錄激活因子。hLBH蛋白在COS-7細(xì)胞中過