麻瘋樹再生體系的建立與優(yōu)化研究.pdf

1、麻瘋樹(Jatropha curcas L.),也稱小桐子,是大戟科(Euphobiaceae)麻瘋樹屬(Jatrophal)落葉灌木或小喬木,目前因其種子油應(yīng)用前景廣闊而備受關(guān)注。本實(shí)驗(yàn)以麻瘋樹為研究對(duì)象,優(yōu)化麻瘋樹組織培養(yǎng)再生的條件,建立麻瘋樹的再生體系。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.麻瘋樹組織培養(yǎng)再生條件的優(yōu)化
　　 本研究探討麻瘋樹種子最佳消毒方法為,依次用75％酒精消毒1分鐘,0.1％HgCl2消毒20分鐘,3

2、％NaClO消毒30分鐘,無菌水沖洗6-8次,污染率為6.7％,萌發(fā)率為97.8％;消毒后的種子去種皮保留胚乳播種于MS培養(yǎng)基中是最優(yōu)萌發(fā)無菌苗的方式,萌發(fā)出的無菌苗根系發(fā)達(dá)粗壯,葉片肥厚,較大,顏色較深,適宜作為麻瘋樹組織培養(yǎng)的外植體;15日苗齡的無菌苗葉片最適宜作為麻瘋樹組織培養(yǎng)的外植體,切割成1cmx1cm,葉背接觸培養(yǎng)基是最優(yōu)接種方式;每天16小時(shí)光照,40μmol m-2 s-1光照強(qiáng)度的光照最有利于麻瘋樹葉片再生。
　

3、　 2.麻瘋樹高效組織培養(yǎng)體系的建立
　　 本實(shí)驗(yàn)對(duì)麻瘋樹組織培養(yǎng)再生的兩條途徑即通過愈傷組織誘導(dǎo)不定芽的再生途徑和直接再生不定芽途徑做了研究。途徑一是以15日苗齡的無菌苗葉片為外植體誘導(dǎo)愈傷組織,再誘導(dǎo)愈傷組織分化不定芽,從而建立再生體系。在這條途徑中,IBA對(duì)葉片誘導(dǎo)愈傷組織起主導(dǎo)作用,MS+6-BA0.4 mg/L+IBA0.5 mg/L+TDZ0.1mg/L最有利于麻瘋樹葉片愈傷組織的誘導(dǎo),誘導(dǎo)率為77.8％,該培養(yǎng)基

4、上誘導(dǎo)的愈傷組織在進(jìn)行不定芽的分化時(shí)時(shí)間短,分化率高;在愈傷組織誘導(dǎo)過程中,褐化現(xiàn)象較為嚴(yán)重,在培養(yǎng)基中添加0.1g/L活性炭可有效降低褐化率,且不會(huì)影響愈傷組織的誘導(dǎo);6-BA對(duì)愈傷組織進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo)起主要作用,6-BA濃度越高,分化率越高,但6-BA濃度達(dá)到1.2mg/L時(shí)誘導(dǎo)出的不定芽形態(tài)多畸形,培養(yǎng)基MS+6-BA0.8mg/L+IBA0.1mg/L最有利于愈傷組織不定芽的分化,分化率較高,55.6％,且芽苗形態(tài)正常。

5、　　 途徑二是以15日苗齡的無菌苗葉片為外植體直接進(jìn)行不定芽的誘導(dǎo),該試驗(yàn)中,6-BA起主導(dǎo)作用,6-BA濃度越高,分化率越高,MS+6-BA1.2mg/L+IBA0.05mg/L最有利于葉片直接誘導(dǎo)不定芽,誘導(dǎo)率為35.5％,MS+6-BA1.2mg/L+IBA0.05mg/L+GA30.4mg/L最有利于直接分化不定芽,分化率為41.8％,MS+6-BA0.1mg/L+IBA0.2mg/L對(duì)不定芽的伸長效果最好。最佳生根培養(yǎng)基為M