不同地理種源的麻瘋樹(shù)ISSR分析.pdf

1、福建師范大學(xué)碩士學(xué)位論文不同地理種源的麻瘋樹(shù)ISSR分析姓名：黃勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：生物化學(xué)及分子生物學(xué)指導(dǎo)教師：黃儒珠20070901摘要應(yīng)用ISSR標(biāo)記技術(shù)對(duì)來(lái)自云南、四川、廣西、貴州和海南5個(gè)省區(qū)的32個(gè)麻瘋樹(shù)種源的遺傳多樣性和親緣關(guān)系進(jìn)行分析，比較不同地理種源麻瘋樹(shù)的遺傳差異，為麻瘋樹(shù)的良種選育以及種質(zhì)資源保護(hù)提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。研究結(jié)果如下：1設(shè)計(jì)了4種改良CTAB法和1種改良SDS法，用于從麻瘋樹(shù)嫩葉中提取DNA。通過(guò)比較實(shí)

2、驗(yàn)，從5種改良方法中，篩選并建立了適合于麻瘋樹(shù)DNA提取的改良CTAB法III。用該法提取的麻瘋樹(shù)DNA質(zhì)量完全能滿足ISSR分析的要求。2通過(guò)對(duì)影響ISSRPCR擴(kuò)增的模板DNA、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶以及M蛇濃度等5因素(不同水平)的優(yōu)化實(shí)驗(yàn)，建立了適合于麻風(fēng)樹(shù)ISSRPCR擴(kuò)增的體系：模板DNA300ng／251aL、dNTP015InmoI／L、引物020gmol／L、TaqDNA聚合酶1OU／251tL及M9230

3、mmol／L，反應(yīng)體積25此；與之相適應(yīng)的擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性3min；94℃變性1min，55℃退火15min，72℃延伸15min，循環(huán)46次；最后在72℃延伸5min。3從96個(gè)ISSR引物中篩選得到21個(gè)引物，用于32個(gè)麻瘋樹(shù)種源的ISSR分析。21個(gè)引物共檢測(cè)到21Q釜芷增條帶，其中多態(tài)性條帶占962％。表明32個(gè)不同地理種源麻風(fēng)樹(shù)具有豐富的遺傳多樣性?；贗SSR擴(kuò)增條帶數(shù)據(jù)建立了Jaeeard遺傳距離矩陣和聚類圖。32

4、個(gè)不同地理種源麻瘋樹(shù)間的遺傳距離值為0108104227，均值為02212。其中來(lái)自海南臨高的種源與海南白沙的種源遺傳距離最大，來(lái)自云南元陽(yáng)城關(guān)的種源與云南元陽(yáng)烏灣的種源遺傳距離最?。?2個(gè)不同地理種源麻瘋樹(shù)的聚類結(jié)果表明，云南的8個(gè)種源和四川的5個(gè)種源，以及貴州(除貴州冊(cè)享的種源外)的7個(gè)種源，基本按地理來(lái)源各聚為一枝，表明其各自呈現(xiàn)與地理位置相對(duì)應(yīng)較近的親緣關(guān)系。而來(lái)自廣西的8個(gè)種源，海南的3個(gè)種源，以及貴州冊(cè)享的種源則與地理來(lái)源的