蛹蟲草人工培養(yǎng)技術(shù)及其主要有效成分調(diào)控的研究.pdf

1、蛹蟲草(Cordyceps militaris)是一種重要的中藥，也是名貴中藥冬蟲夏草(Cordycepssinensis)的常用替代品。蛹蟲草含有蟲草多糖、蟲草素、核苷類物質(zhì)、麥角甾醇、蟲草酸等多種有效成分，這些有效成分含量是蛹蟲草子實體品質(zhì)的重要指標。蛹蟲草的人工培養(yǎng)方式包括液體發(fā)酵和固體發(fā)酵，有關(guān)蛹蟲草有效成分含量的影響因素的研究在液體發(fā)酵中較多，而固體發(fā)酵中大多僅限于對子實體生長條件優(yōu)化。本文研究了培養(yǎng)條件及培養(yǎng)基對蛹蟲草子實體

2、生長及有效成分合成的影響，為高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的蛹蟲草子實體和主要活性物質(zhì)生產(chǎn)提供一定的基礎(chǔ)依據(jù)。
　　 1.研究了培養(yǎng)條件(光照、溫度、培養(yǎng)時間)對蛹蟲草原基形成、子實體生長及有效成分含量的影響，主要結(jié)果如下：
　　 (1)光照(光強、光照時間及光質(zhì))是影響蛹蟲草子實體生長及有效成分合成的重要因素。光照越強，蟲草多糖、腺苷及類胡蘿卜素含量越高。較弱的光照則更有利于子實體產(chǎn)量提高和蟲草素、麥角甾醇、可溶性蛋白及游離氨基酸合成。延長

3、每天光照時間對原基形成、類胡蘿卜素、多糖、腺苷及蟲草酸的合成有促進作用，而對子實體生長及可溶性蛋白合成則有抑制作用。對于多糖、蟲草素及類胡蘿卜素的合成，白熾光顯著優(yōu)于黃光和紅光，而對麥角甾醇和游離氨基酸則相反。綜合考慮，確定蛹蟲草培養(yǎng)適宜的光照條件為：白熾光、光照強度為2001x，每天光照時間分階段設(shè)置，原基形成階段為24 h/d，子實體生長階段16 h/d為最佳。
　　 (2)不同培養(yǎng)溫度(20℃、22℃、24℃和26℃)對蛹

4、蟲草子實體產(chǎn)量和不同的有效成分含量的影響不同。當(dāng)溫度從20℃升高到26℃時，蛹蟲草原基不能正常形成。從20-24℃間，子實體產(chǎn)量和蟲草酸含量隨著溫度的升高而顯著下降；對于多糖、蟲草素含量，3種培養(yǎng)溫度間都有顯著性差異，22℃為最佳；20℃與22℃溫度條件下培養(yǎng)的子實體腺苷、類胡蘿卜素含量顯著高于24℃條件下的，可溶性蛋白則相反；對于游離氨基酸的合成，22℃顯著優(yōu)于20℃與24℃。綜合分析子實體產(chǎn)量及有效成分含量，確定蛹蟲草子實體培養(yǎng)的嚴

5、格溫度區(qū)間為20-22℃。
　　 (3)子實體產(chǎn)量及有效成分含量隨培養(yǎng)時間的變化而變化。子實體在接種后第40 d達到最大產(chǎn)量，除了多糖外，其他有效成分均能在子實體生長旺盛期大量積累，但隨著培養(yǎng)時間延長蟲草素含量增加幅度較大。除蟲草素、可溶性蛋白及游離氨基酸外，其他5種成分含量達到最高后隨著培養(yǎng)時間的延長而下降，培養(yǎng)時間超過40 d后子實體顏色開始變黑。綜合子實體產(chǎn)量及顏色、蟲草素含量及其他成分，確定最佳采收時間應(yīng)選擇子實體達最大

6、產(chǎn)量后5 d即接種后培養(yǎng)45 d左右。
　　 2.研究了培養(yǎng)基(碳源、氮源、無機鹽、維生素、pH)對子實體生長及有效成分含量的影響，主要結(jié)果如下：
　　 (1)不同的碳源對子實體生長及其不同有效成分含量的影響不同。對子實體生長，麥芽糖與甘露醇最好。在保證子實體產(chǎn)量的前提下，分析對比麥芽糖與甘露醇對蟲草素、腺苷及蟲草酸等各種有效成分的合成與積累作用，確定最合適的碳源為甘露醇。
　　 (2)各種氮源添加物對蛹蟲草生長

7、及不同有效成分合成的作用不同。對子實體產(chǎn)量、游離麥角甾醇、蟲草素和可溶性蛋白的含量，有機氮源的作用要顯著優(yōu)于無機氮源，而對蟲草酸的合成則相反。有機氮源中鮮蛹能促進5種有效成分(多糖、蟲草素、蟲草酸、可溶性蛋白及類胡蘿卜素)合成，無機氮源中磷酸氫二銨對4種有效成分(蟲草酸、腺苷、游離氨基酸及類胡蘿卜素)的積累有明顯促進作用。則最佳的有機氮源添加物為鮮蛹，無機氮源為磷酸氫二銨。
　　 (3)維生素作為微量生長因子對蛹蟲草生長有明顯影

8、響，但對有效成分的合成影響作用不大。相比其他維生素，VB1能促進3種有效成分(蟲草酸、游離氨基酸及類胡蘿卜素)的合成，對子實體生長也有促進作用，最終選VB1作為最佳添加物。
　　 (4)不同的無機鹽對不同的有效成分積累影響不同。添加的所有無機鹽中，KH2PO4和NaNO3能促進合成的有效成分種類最多，KH2PO4能促進蟲草多糖、蟲草素、腺苷、可溶性蛋白及類胡蘿卜素的合成，對子實體生長也有促進作用，NaNO3對多糖、腺苷、蟲草酸、