中藥復(fù)方宮炎凈中主要有效成分的提取及抗炎活性研究.pdf

1、目的:本試驗(yàn)通過不同溶劑對(duì)中藥復(fù)方宮炎凈進(jìn)行提取,測定各提取物不同濃度下的體外抑菌作用,確定體外抑菌較好的提取物及其濃度;通過活性試驗(yàn),確定用于提取中藥復(fù)方宮炎凈的溶劑以及最佳的用藥劑量;確定中藥復(fù)方宮炎凈有效成分,采用L9(34)設(shè)計(jì)正交實(shí)驗(yàn)優(yōu)化復(fù)方宮炎凈的提取工藝。為中藥復(fù)方宮炎凈的進(jìn)一步開發(fā)利用、研制新劑型奠定基礎(chǔ)。
　　方法:試驗(yàn)一:采用滲漉法,分別用石油醚、70％乙醇、蒸餾水對(duì)復(fù)方宮炎凈進(jìn)行提取,采用瓊脂打孔法,通過比較

2、抑菌圈的大小來判斷不同溶劑提取物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、沙門氏菌、鏈球菌的抑菌活性大小。以金黃色葡萄球菌、大腸桿菌為供試菌,測定復(fù)方宮炎凈醇提物、水提物的最小抑菌濃度,同時(shí)探討了培養(yǎng)基pH、培養(yǎng)基含糖量以及溫度和紫外線對(duì)醇提物、水提物抑菌活性的影響。
　　試驗(yàn)二:分別給予小鼠生理鹽水、地塞米松及高、中、低劑量的石油醚提取物、乙醇提取物、水提取物,用二甲苯致炎,測定小鼠耳廓腫脹率。此外,腹腔注射體積分?jǐn)?shù)為0.7%的冰醋酸致炎,于

3、590 nm波長處測腹腔液OD值。
　　試驗(yàn)三:建立二甲苯所致耳廓腫脹、蛋清所致足趾腫脹、棉球所致肉芽腫小鼠炎癥模型,通過測定小鼠耳廓腫脹率、足趾腫脹率以及棉球所致肉芽組織重來判定乙醇提取物的抗炎效果。
　　試驗(yàn)四:通過探究乙醇體積分?jǐn)?shù)、超聲提取時(shí)間、超聲提取次數(shù)以及料液比等單因素對(duì)提取效果的影響試驗(yàn),以鹽酸水蘇堿為標(biāo)準(zhǔn)品,采用 L9(34)正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選復(fù)方中總生物堿的提取工藝。
　　結(jié)果:試驗(yàn)一:醇提物、水提物抑菌

4、效果較好。醇提物對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度為0.00625 g/mL,對(duì)大腸桿菌和枯草桿菌的最低抑菌濃度為0.125 g/mL;水提物對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸桿菌的最低抑菌濃度為0.125 g/mL。溫度和紫外線處理對(duì)乙醇提取物、水提物抑菌效果沒有明顯影響;隨培養(yǎng)基的 pH值增大兩種溶劑提取物抑菌活性均減弱,隨培養(yǎng)基含糖量的增加,兩種溶劑提取物的抑菌活性均呈現(xiàn)增強(qiáng)趨勢。
　　試驗(yàn)二:乙醇提取物各劑量組的耳廓腫脹率均顯著低于生理鹽

5、水組和石油醚組(P<0.01),并以乙醇中劑量提取物效果最佳;乙醇提取物各組和地塞米松組的腹腔毛細(xì)血管通透性均極顯著低于除地塞米松組外的各組(P<0.01),并且乙醇中劑量組顯著低于地塞米松組(P<0.05)。顯示乙醇可作為提取該復(fù)方有效成分的最佳提取溶劑。
　　試驗(yàn)三:中劑量乙醇提取物能夠顯著抑制二甲苯所致小鼠耳廓腫脹率,顯著低于高、低劑量乙醇提取物組(P<0.05),與地塞米松組差異不顯著(P>0.05);各組均能明顯降低蛋清

6、所致小鼠足趾腫脹率,其中中劑量乙醇提取物組顯著低于高、低劑量乙醇提取物組(P<0.05),極顯著低于生理鹽水組(P<0.01),與地塞米松組差異不顯著(P>0.05);中劑量乙醇提取物能明顯抑制棉球所致小鼠肉芽組織增生且顯著低于高、低劑量乙醇提取物組(P<0.05),極顯著低于生理鹽水組(P<0.01),與地塞米松組差異不顯著(P>0.05)。
　　試驗(yàn)四:乙醇體積分?jǐn)?shù)為70%,超聲提取時(shí)間為25 min,超聲提取3次,料液比為1