不同品種豬繁殖軸Kiss1-GPR54表達差異及能量水平對母豬初情日齡的影響.pdf

1、本試驗旨在研究早熟和晚熟母豬品種(梅山和長大母豬)繁殖軸(下丘腦-垂體-卵巢組織)kiss1/GPR54基因表達差異及其激素的變化,并進一步考察日糧能量水平對晚熟品種母豬初情啟動的影響。研究內(nèi)容如下:
　　 試驗一、分別選取70日齡、初情啟動的梅山和長大母豬(n=4),采用ELISA法測定母豬血液中Leptin和E2水平,采用RT-PCR法克隆兩品種Kiss1基因序列,熒光定量PCR法檢測母豬繁殖軸上Kiss1/GPR54基因,

2、下丘腦LeptinR和Erα,以及卵巢上LHR基因表達的情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn):
　　 (1)基因分析發(fā)現(xiàn),梅山和長大母豬品種Kiss1基因序列一致。
　　 (2)梅山和長大母豬平均初情日齡分別為100天和199天,梅山母豬繁殖軸Kiss1表達量顯著高于長大母豬(P＜0.05),但受體GPR54 mRNA表達量差異不顯著(P＞0.05)。兩個品種母豬繁殖軸Kiss1/GPR54 mRNA表達量均隨其日齡增加而升高(P＜0.05)

3、。
　　 (3)梅山母豬血液中Leptin濃度在70日齡時顯著高于長大母豬(P＜0.05),但初情啟動時差異不顯著(P＞0.05);梅山豬血液中E2濃度初情啟動時顯著高于長大母豬,70日齡未發(fā)現(xiàn)兩品種存在差異(P＞0.05);隨日齡的增加,母豬血液中l(wèi)eptin和E2濃度都顯著升高(P＜0.05)。
　　 (4)基因檢測發(fā)現(xiàn),梅山母豬下丘腦Erα mRNA表達顯著高于長大母豬(P＜0.05);而下丘腦LeptinR mR

4、NA表達量僅顯著高于70日齡長大母豬(P＜0.05),初情時LeptinR mRNA表達量無顯著差異(P＞0.05);梅山母豬卵巢LHR mRNA表達量顯著高于70日齡與初情長大母豬(P＜0.05);兩品種母豬下丘腦LeptinR、ErαmRNA及卵巢LHR mRNA表達量均隨其日齡增加而升高(P＜0.05)。
　　 (5)Person相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),除卵巢上GPR54基因外(P＞0.05),母豬血液中l(wèi)eptin水平與HPG軸

5、上Kiss1和GPR54基因表達之間存在顯著正相關(guān)關(guān)系(P＜0.05)。除下丘腦Kiss1基因外(P＜0.05),母豬血液中E2水平與HPG軸上Kiss1和GPR54基因表達之間不存在顯著正相關(guān)關(guān)系(P＞0.05)。
　　 試驗二、選取體重50±4.5kg,日齡和體況相近的LY母豬20頭,按照配對試驗設(shè)計原則分配到兩個處理組,能量限飼組和NRC水平組(10個重復(fù)/處理,每個重復(fù)/1頭豬)。NRC水平組日糧能量水平參照NRC(19

6、98)后備母豬推薦水平,能量限飼組能量供給為NRC水平組70％,其它養(yǎng)分?jǐn)z入量均一致。母豬50kg,80kg,100 kg和初情啟動時收集血液,采用ELISA法測定血液中E2和leptin水平。母豬超過80kg后,每天兩次進行發(fā)情觀察,母豬首次出現(xiàn)陰戶紅腫并伴有稀薄粘液定義為初情啟動。分別考察兩個處理組母豬的初情日齡以及初情期的體重和P2點背膘厚度,結(jié)果如下:
　　 (6)與能量限飼組相比,NRC水平組母豬能及早啟動初情期(17

7、7.7±3.4 d VS190.1±10.2 d,P＜0.05),并具有較高的初情體重、日增重和P2背膘厚度(122.6±7.3kg VS108.4±4.1 kg、0.85±0.02 kg/d VS0.65±0.15 kg/d和13.50±1.38 mm VS10.57±1.27 mm;P＜0.05)(7)母豬血液中Leptin和E2水平隨日齡的增加而提高,母豬在100 kg階段和初情期時顯著高于50 kg和80 kg體重階段(P＜0.

8、05);能量水平對80 kg后母豬血液Leptin和E2水平有影響,能量限飼組顯著低于NRC水平組(P＜0.05)。同時NRC水平組母豬下丘腦Kiss1基因表達量顯著高于能量限飼組(P＜0.05),但兩能量水平組GPR54基因表達無顯著差異(P＞0.05)。
　　 根據(jù)以上結(jié)果,可以得到以下結(jié)論:
　　 (1)梅山與LY母豬Kiss1基因序列一致,但母豬不同品種和日齡在繁殖軸上kiss1基因的表達存在差異,繁殖軸kiss