太平洋牡蠣三倍體培育及生長研究.pdf

1、本研究以太平洋牡蠣(Crassostrea gigas)為研究對(duì)象,對(duì)誘導(dǎo)三倍體群體和雜交三倍體的生長性狀進(jìn)行比較。同時(shí)通過對(duì)中、美兩地理群體的太平洋牡蠣雜交子代生長性狀的分析,驗(yàn)證雜交三倍體兼具雜種優(yōu)勢(shì)和三倍體優(yōu)勢(shì)。本實(shí)驗(yàn)采用低滲抑制太平洋牡蠣受精卵第二極體的釋放,誘導(dǎo)三倍體。探索低滲誘導(dǎo)太平洋牡蠣三倍體的最佳誘導(dǎo)條件,并與其他三倍體誘導(dǎo)方法的進(jìn)行比較,進(jìn)一步驗(yàn)證低滲在誘導(dǎo)三倍體貝類中的可行性及可廣泛應(yīng)用性。為多倍體育種開辟一條新的途

2、徑,加快貝類育種研究及養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。
　　 研究主要分為以下三個(gè)部分:
　　 1太平洋牡蠣雜交三倍體與誘導(dǎo)三倍體群體的生長比較實(shí)驗(yàn)以中國太平洋牡蠣二倍體自交作為對(duì)照,比較誘導(dǎo)三倍體群體及雜交三倍體組的早期表型性狀。通過對(duì)各實(shí)驗(yàn)組卵裂率、D幼率、D形幼蟲大小、生長、存活率和倍性等指標(biāo)進(jìn)行測(cè)定,進(jìn)一步評(píng)估了2種誘導(dǎo)方法的有效性。結(jié)果表明:雜交三倍體表現(xiàn)出明顯優(yōu)勢(shì),D幼率、D形幼蟲大小均大于誘導(dǎo)三倍體群體,且差異顯著(P＜0.

3、05);稚貝期殼長和殼高生長也顯著快于誘導(dǎo)三倍體群體(P＜0.05)。雜交三倍體的存活率很高,顯著優(yōu)于誘導(dǎo)三倍體群體。就三倍體率而言,雜交三倍體達(dá)到100％,而誘導(dǎo)三倍體群體僅為(51.OO±11.79)％。
　　 2中、美兩地理群體太平洋牡蠣的雜交效應(yīng)與三倍體優(yōu)勢(shì)的研究實(shí)驗(yàn)將太平洋牡蠣中國群體二倍體分別與美國群體二倍體和四倍體進(jìn)行雜交,共設(shè)置5個(gè)組,分別為雜交二倍體組、雜交三倍體組、中國二倍體組、美國二倍體組和美國三倍體組,通

4、過前4組卵裂率、D幼率、D形幼蟲大小及幼蟲期、稚貝期的生長性狀、存活率等生物學(xué)指標(biāo)的比較,并計(jì)算雜交三倍體的三倍體優(yōu)勢(shì)率。結(jié)果表明:雜交三倍體的D形幼蟲大小、幼蟲和稚貝的生長、存活率均表現(xiàn)出三倍體優(yōu)勢(shì),D形幼蟲大小的三倍體優(yōu)勢(shì)率為5.19％,幼蟲期殼高生長和存活的平均三倍體優(yōu)勢(shì)率分別為4.00％和19.92％,稚貝殼高生長和存活的平均三倍體優(yōu)勢(shì)率分別為30.18％和54.43％,200日齡,雜交三倍體鮮重的三倍體優(yōu)勢(shì)率為202.96％,

5、存活三倍體優(yōu)勢(shì)率為73.6％。此外,稚貝期雜交三倍體的三倍體優(yōu)勢(shì)率均高于幼蟲期的優(yōu)勢(shì)率。中、美兩地理群體雜交獲得的三倍體太平洋牡蠣子代生長和存活性狀都比二倍體優(yōu)良。雜交三倍體的優(yōu)良形狀主要是三倍體優(yōu)勢(shì),雜交優(yōu)勢(shì)的貢獻(xiàn)率還有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)證實(shí)。
　　 3低滲誘導(dǎo)太平洋牡蠣三倍體以及與其他誘導(dǎo)方法的比較通過低滲方法抑制受精卵第二極體(PB2)的釋放,誘導(dǎo)太平洋牡蠣三倍體。在水溫為23～25℃的條件下,分別采用不同低滲海水(鹽度分別為4

6、、6、8、10、12、14、16),在不同處理時(shí)機(jī),即第一個(gè)第一極體(PB1)出現(xiàn)、30％的PB1出現(xiàn)、40％的PB1出現(xiàn)、50％的PB1出現(xiàn)以及第一個(gè)第二極體(PB2)出現(xiàn)時(shí),對(duì)太平洋牡蠣受精卵進(jìn)行10 min、15 min、20 min、25 min持續(xù)處理。處理后,于正常鹽度海水中孵化。收集D形幼蟲,通過流式細(xì)胞儀進(jìn)行倍性測(cè)定,確定最佳誘導(dǎo)條件。結(jié)果表明,當(dāng)太平洋牡蠣受精卵PBl出現(xiàn)40％時(shí),在鹽度為8的低滲海水中,持續(xù)處理15

7、min,得到最高三倍體誘導(dǎo)率為(89.16±1.39)％。與對(duì)照組相比,低滲誘導(dǎo)獲得的三倍體幼蟲表現(xiàn)出明顯的生長優(yōu)勢(shì)。將低滲方法同高溫(32℃)、低溫(2℃)和6-DMAP(450μmol/L)等多倍體誘導(dǎo)方法進(jìn)行誘導(dǎo)結(jié)果比較。顯示出低滲組的卵裂率和孵化率顯著高于高溫、低溫和6-DMAP方法誘導(dǎo)的太平洋牡蠣三倍體(P＜0.05)。低滲誘導(dǎo)的三倍體率雖略低于6-DMAP誘導(dǎo),差異不顯著(P＞0.05),但顯著高于高溫和低溫方法的誘導(dǎo)率(P