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文檔簡介
1、本研究以來自全國12個省(自治區(qū))96個縣的棉花黃萎病菌(Verticillium dahliae)為研究對象,從培養(yǎng)性狀、SSR和ISSR指紋圖譜等方面對其進行了群體遺傳多樣性的研究,并結合致病力測定結果及地理來源進行了全面分析。對其中部分培養(yǎng)性狀特殊的菌株進行了生理特性和分子鑒定;選擇致病力不同的菌株,研究了生理特性與致病力的關系。為進一步研究我國棉花黃萎病菌的遺傳變異、致病機理、棉花的抗病育種、抗性品種的合理布局、抗性喪失的原因,
2、品種與病菌的互作等提供依據(jù)。得到的主要研究結果如下:
1.我國的棉花黃萎病菌在PDA培養(yǎng)基上存在5種不同的培養(yǎng)類型,B型菌株表現(xiàn)為菌核多,均勻密布,菌落邊緣有白色圓環(huán),占72.9%;C型菌株表現(xiàn)為菌核較少,大多分布在菌落周圍,形成黑色圓環(huán),菌落中間為白色,散生少量或極少菌核,占23.6%。長江流域菌株變異最大,其次是黃河流域,新疆棉區(qū)的變異最小。野生菌株均為雜合體,其單孢后代在培養(yǎng)性狀上也存在明顯的變異。
2
3、.分離的308個野生菌株中,有14個菌株在PDA培養(yǎng)基上培養(yǎng)性狀特殊,對其進行溫度反應鑒定和特異性引物的分子檢測。結果表明,供試菌株均為大麗輪枝菌。采用落葉型特異引物D-1/D-2和非落葉性特異引物ND-1/ND-2對供試菌株進一步檢測,結果表明供試菌株中落葉型菌株為155個,約占91.2%;非落葉型菌株為15個,其中11個新疆菌株,約占新疆菌株總數(shù)的45.8%,表明我國的棉花黃萎病菌絕大多數(shù)為落葉型棉花黃萎病菌。
3.在
4、一致的生長條件下,測定了12個致病力不同菌株的生長速率、分生孢子產(chǎn)量和毒素分泌量。結果表明,不同菌株的生長速率、分生孢子產(chǎn)量及毒素分泌量存在很大的差異,而且與菌株的致病力均有一定的正相關性;菌株的生長速率和分生孢子產(chǎn)量與是否落葉不存在相關性,而菌株的毒素分泌量與是否落葉存在一定的相關性。
4.依據(jù)萵苣黃萎病菌(Verticillium dahliae)全基因組序列設計SSR引物,建立并優(yōu)化SSR反應體系,篩選出13對多態(tài)性
5、較高的引物,選擇170個代表菌株,進行SSR指紋圖譜分析。UPGMA聚類結果顯示,170個供試菌株明顯劃分為2個群體,群體Ⅰ共包括26個菌株,其中18個為新疆菌株,約占69.2%;群體Ⅱ包括144個菌株,內(nèi)地菌株有138個,約占95.8%。分析表明菌株的親緣關系與地理來源存在一定的相關性,即新疆菌系與內(nèi)地的菌系親緣關系較遠,而新疆菌株之間及內(nèi)地各省份的菌株之間的親緣關系很接近;結合菌株致病力測定的結果分析表明,SSR指紋圖譜與菌株致病力
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