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文檔簡介
1、糖原是牡蠣生長和發(fā)育的主要能源物質,并且影響長牡蠣貝肉的質地和味道。糖原合酶和糖原磷酸化酶是參與糖原代謝的一對關鍵酶。糖原代謝的短期調節(jié)主要是通過反饋機制而進行的各種酶的調控作用,而長期調節(jié)則是由參與糖原代謝通路編碼酶基因的表達水平而調控的。糖原合酶基因和糖原磷酸化酶基因的表達水平已被發(fā)現(xiàn)與長牡蠣糖原含量在糖原代謝中的季節(jié)性變化相一致,符合牡蠣將糖原作為主要能量物質用于配子發(fā)生和性腺成熟過程的自然生理現(xiàn)象。
長牡蠣基因組中存在
2、的大量SNPs標記為候選基因的多態(tài)性與長牡蠣經濟性狀之間的相關性研究提供了豐富的材料基礎。單倍型是同一染色體上多個SNPs位點中核苷酸堿基的線性排列,以其為分子遺傳標記進行相關性分析比單個SNP標記更加有效。
本研究隨機選取來自5個全同胞家系的322個長牡蠣個體,以長牡蠣糖原合酶基因(Cg-GYS)和長牡蠣糖原磷酸化酶基因(Cg-GPH)作為糖原代謝相關性分析的候選基因,將其編碼區(qū)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)與生長性狀(包括殼高
3、、殼長、殼寬、總體重以及軟體部重)和糖原含量(%干重)進行了相關性研究。
1.長牡蠣糖原合酶基因多態(tài)性與生長及糖原含量相關性研究
在長牡蠣糖原合酶基因的1420bp擴增片段中共檢測到41個SNPs位點,全部位于外顯子編碼區(qū)域,編碼區(qū)SNPs平均密度為1/35bp。6個編碼區(qū)SNPs位點與糖原含量存在顯著相關性(P<0.01)。與生長性狀相關聯(lián)的SNPs由于數量較少,因此未進行后續(xù)單倍型與性狀之間的相關性分析。通過連鎖
4、不平衡所構建的4種SNP單倍型中,長牡蠣糖原合酶基因的H3(GGAATC)單倍型在糖原含量方面顯著低于其他3種SNP單倍型(P<0.05)。其中,具有H2(GAGGAT)單倍型個體的糖原含量極顯著高于具有H3單倍型個體的糖原含量(P<0.0001),因此,H2單倍型可能是導致長牡蠣高糖原含量的SNP單倍型。
2.長牡蠣糖原磷酸化酶基因多態(tài)性與生長及糖原含量相關性研究
在長牡蠣糖原磷酸化酶基因的1940bp擴增片段中共
5、檢測到82個SNPs位點,其中63個SNPs位點位于外顯子區(qū)域,1個SNPs位點位于5'-UTR區(qū),18個SNPs位點位于3'-UTR區(qū),編碼區(qū)SNPs平均密度為1/25bp;5個SNPs位點與生長性狀存在顯著相關性(P<0.05),未檢測到與糖原含量相關SNPs。生長性狀關聯(lián)SNPs位點構建的6個SNP單倍型中,Cg-GPH基因的H6(CTGAT)單倍型在總體重性狀方面均顯著高于其他5種SNP單倍型(P<0.05),表明H6單倍型可能
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