8株單核細(xì)胞增多性李氏桿菌分離株的血清型、致病性、譜系及基因型的研究.pdf

1、單核細(xì)胞增多性李氏桿菌（Listeriamonocytogenes,LM）是一種重要的人畜共患病原菌，因其高死亡率及高致病率而被視為毒力最強(qiáng)的食源性病原菌，該菌是人和動物的常在菌，偶爾能穿越某些種類動物的腸道出現(xiàn)或是在無癥狀家畜動物的糞便中出現(xiàn)，此菌能穿越人及動物的腸道、血腦和胎盤三大屏障引起人及動物的李氏桿菌病，主要表現(xiàn)為敗血癥、腦膜炎和單核細(xì)胞增多。
　　本項(xiàng)研究對從新疆部分地區(qū)健康綿羊、發(fā)病綿羊及周圍環(huán)境（水源、青貯和烏鴉糞

2、）分離出來的單核增多性李氏桿菌分離株進(jìn)行了血清型與致病性的測定，以查明LM在新疆的主要血清型及致病性；同時用PCR-RFLP方法和多重PCR方法對8株LM分離株和實(shí)驗(yàn)室保存的參考菌株LM進(jìn)行譜系分析和基因型分型，從而確定健康綿羊LM分離株、發(fā)病綿羊LM分離菌株及參考菌株LM在分子流行病學(xué)方面的相關(guān)性。
　　從564只健康綿羊的鼻腔和肛門分離到5株LM及實(shí)驗(yàn)室保存的3株發(fā)病綿羊LM分離株，對這8株LM分離株采用五重PCR方法進(jìn)行血清

3、型分型，鑒定出單核增多性李氏桿菌血清型為1/2a、4b，而大多數(shù)發(fā)病綿羊分離株與健康綿羊分離株單核細(xì)胞增多性李氏桿菌血清型均為1/2a，并與單核細(xì)胞增多性李氏桿菌參考菌株1/2a血清型相同，初步揭示本地導(dǎo)致綿羊發(fā)病的優(yōu)勢血清型為1/2a，綿羊發(fā)病可能為內(nèi)源性感染，預(yù)示1/2a血清型和LM可能給食品安全帶來隱患。
　　對8株LM分離株進(jìn)行了小白鼠致病力檢測、多重PCR譜系鑒定、血清型鑒定及InlA基因的PCR-RFLP分析，并與參考

4、菌株對照。健康綿羊與臨床發(fā)病綿羊單核增多性李氏桿菌分離株對小鼠具有相同的致病性；除1株臨床分離株為血清型4b和譜系Ⅰ外，其余7株均為血清型1/2a和譜系Ⅱ；5株健康綿羊分離株的毒力基因InlA的PCR-RFLP基因型均為E型，而3株臨床分離菌株則為C型或B型。兩種不同來源單核增多性李氏桿菌在小鼠致病性，血清型及譜系上是具有一致性及相關(guān)性，但其毒力基因InlA存在多樣性。初步揭示健康綿羊攜帶的LM可經(jīng)內(nèi)源性感染而發(fā)生李氏桿菌病，表明內(nèi)源性