葡萄SVP-like MADS-box、MADS12基因的克隆與植物表達(dá)載體的構(gòu)建.pdf

1、葡萄是世界上最重要的果樹(shù)之一，其種植面積和產(chǎn)量都在世界前列。研究花發(fā)育的機(jī)理對(duì)果樹(shù)栽培、育種工作的發(fā)展以及促進(jìn)果品生產(chǎn)都具有重要的意義。
　　本試驗(yàn)以藤稔葡萄的花序?yàn)樵嚥模瑧?yīng)用電子克隆技術(shù)從葡萄 EST數(shù)據(jù)庫(kù)中拼接到兩個(gè)MADS-box基因，并用 RT-PCR方法擴(kuò)增得到了該基因的編碼區(qū)全長(zhǎng)序列，分別命名為VvSVP和VvMADS12。結(jié)果如下：
　　VvSVP基因序列編碼區(qū)全長(zhǎng)684 bp，編碼227個(gè)氨基酸殘基，與 Pt

2、MADS1、MdJOINTLESS、PkMADS、SVP分別有84.1％、81.7%、78.9%和74.9%的同源性。該序列具有 MADS-box基因典型的MADS-box和K-box結(jié)構(gòu)域。系統(tǒng)發(fā)育分析同樣將VvSVP基因歸入 MADS-box基因家族的STMADS11進(jìn)化系。電子表達(dá)譜分析顯示，該基因在葡萄的芽、葉片、花序及果實(shí)中表達(dá)，在花、花梗、莖、根中不表達(dá)，推測(cè)該基因與葡萄花序及果實(shí)發(fā)育有關(guān)。將VvSVP mRNA與基因組序列

3、比對(duì)發(fā)現(xiàn)，VvSVP基因由8個(gè)外顯子，7個(gè)內(nèi)含子組成，與SVP基因的結(jié)構(gòu)不完全相同。
　　VvMADS12基因序列編碼區(qū)全長(zhǎng)630 bp，編碼209個(gè)氨基酸殘基，與 Pd MADS-box、AmDEFH7、MODEFH7、SlTDR8、CsMADS-box、PrMADS-box、ZmMADS15分別有70%、63%、62%、60%、66%、45%和50%的同源性。該序列具有 MADS-box基因典型的MADS-box和 K-box