紫扇貝線(xiàn)粒體DNA的初步研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以引進(jìn)的紫扇貝和海灣扇貝為親本，建立了紫扇貝自交組合(ZZ)、海灣扇貝自交組合(HH)、紫扇貝×海灣扇貝(ZH)和海灣扇貝×紫扇貝(HZ)共4個(gè)實(shí)驗(yàn)組合。對(duì)紫扇貝、海灣扇貝及其雜交后代的線(xiàn)粒體進(jìn)行研究。通過(guò)對(duì)紫扇貝12SrRNA、16SrRNA和COI片段的擴(kuò)增測(cè)序，得到的線(xiàn)粒體片段分別為810bp、990bp和1504bp。與10種扇貝建立進(jìn)化樹(shù)，結(jié)果表明紫扇貝與海灣扇貝的親緣關(guān)系較近。
　　 應(yīng)用引物COIF和COIR

2、對(duì)紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線(xiàn)粒體DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得660bp長(zhǎng)度的COI基因片段，應(yīng)用引物Z001F/Z001R對(duì)紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線(xiàn)粒體12S片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得544bp長(zhǎng)度的12S基因片段。經(jīng)過(guò)比對(duì)性腺與體細(xì)胞的COI和12S片段，發(fā)現(xiàn)性腺與體細(xì)胞COI基因及12S基因均為一個(gè)單倍型，即體內(nèi)只有一種線(xiàn)粒體DNA類(lèi)型，沒(méi)有發(fā)現(xiàn)雙單性遺傳現(xiàn)象，雌、雄性腺的COI基因和12S基因片段變異率很低（0.45％和0.74％）。根據(jù)序

3、列的差異設(shè)計(jì)各自的選擇性引物:H001F/H001R,Z002F/Z002R，前者在海灣扇貝中擴(kuò)增出521bp片段，后者在紫扇貝中擴(kuò)增出362bp的片段。同樣可以用于雜交扇貝的鑒定。
　　 應(yīng)用引物COIF和COIR對(duì)紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線(xiàn)粒體DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得660bp長(zhǎng)度的COI基因片段，應(yīng)用引物Z001F/Z001R對(duì)紫扇貝的性腺和體細(xì)胞線(xiàn)粒體12S片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，獲得544bp長(zhǎng)度的12S基因片段。經(jīng)過(guò)比對(duì)性