版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)
文檔簡介
1、目的:本課題針對臨床上肝臟缺血-再灌注損傷(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)中線粒體DNA損傷與修復的機制進行初步研究,主要有如下幾點:1、肝細胞線粒體DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)損傷引起細胞凋亡的機制;2、mtDNA損傷的常見位點;3、線粒體聚合酶γ修復受損mtDNA的途徑及靶點;4、雷帕霉素對線粒體的保護作用及機制。對上述問題從基因水平探討 mtDNA損傷
2、在肝臟缺血-再灌注損傷中的作用,為肝臟缺血-再灌注損傷的治療提供理論依據(jù)。
方法:第一部分:肝臟缺血-再灌注中線粒體DNA損傷及修復的機制,建立大鼠全肝缺血-再灌注損傷模型,測定血清 AST、ALT;取出肝臟作病理學檢測;mtDNA D-loop區(qū)擴增測序,查找變異位點;RT-PCR檢測肝組織內(nèi)線粒體DNA聚合酶γmRNA的表達情況。第二部分:雷帕霉素在肝臟缺血-再灌注中對肝細胞線粒體的保護機制,建立大鼠全肝缺血-再灌注損傷模
3、型,用雷帕霉素進行干預。提取肝組織蛋白,western blot檢測細胞色素C蛋白表達水平;取肝臟組織行原位末端轉(zhuǎn)移酶標記技術(shù)(TUNEL)檢測肝細胞凋亡。
結(jié)果:第一部分:肝臟缺血-再灌注后早期(24h),大鼠血清AST、ALT均升高,肝組織病理學變化較重,線粒體DNA聚合酶γmRNA表達量均升高,其中雷帕霉素干預組AST、ALT及肝組織病理學改變和線粒體DNA聚合酶γmRNA表達量明顯低于未給藥組(p<0.01);24h后
4、血清AST、ALT均降低,為給藥組線粒體DNA聚合酶γmRNA表達量逐漸降低,雷帕霉素干預組則較未給藥組為低(p<0.01)且術(shù)后一直維持在同一水平;雷帕霉素干預組mtDNA D-loop區(qū)DNA突變率明顯低于未給藥組(p<0.01)。第二部分:肝臟缺血-再灌注后各時間點,大鼠肝臟細胞色素C表達水平均升高,其中雷帕霉素干預組細胞色素C的表達水平較未給藥組為低(p<0.01),24h后各組細胞色素 C的表達水平逐漸降低,但各時間點雷帕霉素
5、干預組細胞色素C的表達水平均較未給藥組為低(p<0.01)。各組各時間點檢測肝細胞凋亡與細胞色素 C表達水平的變化相同,即各時間點雷帕霉素干預組肝細胞凋亡水平均較未給藥組為低(p<0.01)。
結(jié)論:(1)肝臟缺血-再灌注損傷中存在線粒體DNA突變,且突變率與缺血時間呈正相關(guān),而雷帕霉素降低線粒體DNA突變率。(2)細胞在肝臟缺血-再灌注損傷的修復中線粒體DNA聚合酶γmRNA表達量升高,其表達水平與線粒體DNA損傷程度相一致
6、,而雷帕霉素可以抑制HIRI中線粒體DNA聚合酶γ mRNA的過度表達,更利于修復受損的線粒體DNA。(3)肝臟缺血-再灌注損傷使組織中細胞色素C表達水平升高、肝組織細胞凋亡,且隨缺血時間的延長表達水平及細胞凋亡程度亦升高,表明肝臟缺血時間越長,肝細胞凋亡程度越重,(4)雷帕霉素對肝細胞有保護作用,能降低線粒體DNA突變率;抑制肝臟缺血-再灌注損傷中線粒體DNA聚合酶γmRNA的過度表達,更利于修復受損的線粒體DNA及減輕肝細胞凋亡,從
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 大鼠肝臟缺血-再灌注損傷的實驗研究.pdf
- 烏司他丁對肝臟缺血再灌注損傷中線粒體保護作用的研究.pdf
- 缺血預處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷保護作用機制的研究.pdf
- 大鼠肝臟缺血再灌注損傷及缺血預處理對缺血肝臟損傷保護和再生作用及其機制研究.pdf
- 缺血神經(jīng)細胞DNA損傷與修復機制的實驗研究.pdf
- 褪黑素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護作用及機制.pdf
- 大鼠肝臟缺血再灌注損傷與肝臟代謝產(chǎn)物的相關(guān)性研究.pdf
- 缺血預處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的延遲性保護作用及其機制的初步探討.pdf
- 雷帕霉素延長小鼠肝臟缺血-再灌注損傷的修復.pdf
- 蘿卜硫素對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響及機制研究.pdf
- Il-17A在小鼠肝臟缺血再灌注損傷模型中促進肝臟修復的作用與機制研究.pdf
- 禁食對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響.pdf
- S-腺苷蛋氨酸對大鼠肝臟缺血再灌注損傷線粒體的保護作用.pdf
- 板藍根多糖對大鼠肝臟缺血-再灌注損傷的保護作用.pdf
- 缺血后處理對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護作用研究.pdf
- TNF-α對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響.pdf
- rhEPO對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的保護作用.pdf
- 肝臟缺血再灌注所致腦損傷及機制的探討.pdf
- 還原型谷胱甘肽對大鼠肝臟缺血再灌注損傷的影響及機制探討.pdf
- 鞘脂在大鼠肝臟缺血再灌注損傷中脂類組學變化及機制的初步研究.pdf
評論
0/150
提交評論