蝦夷扇貝毒素(Yessotoxins,YTXs)毒性作用的初步研究.pdf

1、蝦夷扇貝毒素(Yessotoxins,YTXs)是近年來在海產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)測方面頗受關(guān)注的一種聚醚類赤潮藻類毒素,它能在貝類體內(nèi)累積進(jìn)而對人類健康造成威脅。目前針對YTXs的毒性作用在國際上展開了很多相關(guān)的研究,但是尚未得出較為明確的結(jié)論。其毒性作用過程尚未完全清楚。
　　 近兩年來,在我國貝類樣品中檢測到Y(jié)TXs存在,但是國內(nèi)關(guān)于這種毒素的研究尚未見報道。
　　 本論文主要是通過體內(nèi)、體外實驗對YTX在個體水平、組織水平和

2、細(xì)胞水平的毒性作用進(jìn)行研究,并對其作用的可能機(jī)制進(jìn)行分析,主要結(jié)果如下:
　　 1.通過組織學(xué)和免疫學(xué)方法對YTX的神經(jīng)毒性作用進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)YTX可以使雌性ICR小鼠小腦浦肯野細(xì)胞發(fā)生明顯的組織學(xué)變化。S-100抗體的特異性免疫染色發(fā)現(xiàn),YTX處理組小腦浦肯野細(xì)胞的S-100表達(dá)量增多,而S-100又是一種鈣結(jié)合蛋白,因此YTX的作用可能與鈣離子濃度相關(guān)。
　　 2.對三株產(chǎn)YTXs的甲藻--網(wǎng)狀原角藻(Protoce

3、ratium reticulatum,CCMP2776)、多邊舌甲藻(Lingulodinium polyedrum,CCMP1931)以及具刺膝溝藻(Gonyaulax spinfera,CCMP409)產(chǎn)物進(jìn)行LC-MS/MS分析,發(fā)現(xiàn)幾種甲藻均產(chǎn)YTX、homo-YTX、45-OH-YTX,但是產(chǎn)毒能力不強(qiáng),各藻種YTX產(chǎn)量低于已有報道。而P.reticulatum所產(chǎn)毒素物質(zhì)最多,且其中homo-YTX產(chǎn)量最高,達(dá)到2.88pg

4、·cell-1。
　　 3.將YTX與人類的三種細(xì)胞系--肝細(xì)胞HL7702、肝癌細(xì)胞Bel7402及Hela細(xì)胞進(jìn)行孵育,通過光學(xué)顯微鏡觀察、Hoechst33342/PI雙染色、DNA瓊脂糖凝膠電泳等方法,同時對細(xì)胞內(nèi)Caspase 3酶活力進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)YTX及藻毒粗提液能使三種細(xì)胞發(fā)生凋亡。另外,利用流式細(xì)胞術(shù)對細(xì)胞內(nèi)線粒體膜電位及Ca2+濃度進(jìn)行研究,發(fā)現(xiàn)YTX及藻毒粗提液可以造成線粒體膜電位下降和細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度升