轉(zhuǎn)基因水稻中過量表達維生素C代謝相關(guān)基因的研究.pdf

1、維生素C（Vitamin C，Vc）是植物自身合成的抗氧化劑，對植物的生長發(fā)育具有重要的生理功能。維生素C的缺乏也會嚴重影響人類的身體健康，但是人類和一些靈長類動物由于體內(nèi)缺乏合成維生素C的最后一個酶，所以必須從膳食中獲取。因此提高食物中的Vc含量和利用Vc增強作物抗逆能力的研究顯得尤為重要。水稻是禾本科作物的重要模式植物，也是世界重要糧食作物之一;通過轉(zhuǎn)基因的途徑提高植物體內(nèi)Vc含量，進而改善植物營養(yǎng)品質(zhì)和提高抗逆能力，是一個重要的研

2、究方向。
　　本研究圍繞提高水稻Vc含量這一目標，在本實驗室前期已培育含維生素C代謝相關(guān)基因轉(zhuǎn)基因水稻的基礎(chǔ)上，主要開展以下四方面的研究：通過葉片潮霉素抗性檢測和目的基因PCR分析篩選轉(zhuǎn)基因純合系和聚合兩個轉(zhuǎn)基因的純合系；通過半定量和實時熒光定量RT-PCR技術(shù)對轉(zhuǎn)基因水稻籽粒和葉片中目的基因進行表達分析，為下一步Vc含量的測定提供依據(jù)；通過高效液相色譜法測定了轉(zhuǎn)基因水稻葉片中的Vc含量，以期評價不同轉(zhuǎn)基因?qū)μ岣遃c的效果；通過鹽

3、脅迫處理對轉(zhuǎn)基因水稻幼苗進行抗性表型的分析。獲得的主要進展和結(jié)果如下：⑴選育獲得了含不同目的基因的轉(zhuǎn)基因純合株系，其中含GLDH、OsDHAR、GGP、DHAR、GME、GMP、GDH、GPP目的基因的純合系分別為10、10、9、9、6、7、7和8個，獲得聚合有GPP和GDH兩個轉(zhuǎn)基因的純合系。⑵在不同轉(zhuǎn)基因水稻植株中，外源目的基因的表達有著較大的差異;通過葉片中相關(guān)基因的表達分析推測水稻中內(nèi)外源基因之間的表達可能存在競爭性。⑶通過對轉(zhuǎn)