紅錐優(yōu)良系ISSR遺傳結(jié)構(gòu)分析.pdf

1、本研究以廣西大青山實(shí)驗(yàn)林場(chǎng)的紅錐為研究對(duì)象，運(yùn)用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)紅錐進(jìn)行遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的分析。研究結(jié)果及方法如下：
　　 1、利用改良的CTAB法提取紅錐基因組DNA，以此方法提取出的DNA純度及含量都較高，經(jīng)檢測(cè)可以用于ISSR-PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
　　 2、建立了適合于紅錐的ISSR-PCR反應(yīng)體系，最佳反應(yīng)體系為：在20μL的體系中各反應(yīng)物用量為：2.0μL10×Buffer、1.4μL Mg2+、0.3

2、μL dNTP、0.8μL引物、0.2μL Taq酶、50ng模板DNA。ISSR-PCR最佳反應(yīng)程式：94℃預(yù)變性5min，94℃變性30s，52～55℃(根據(jù)引物的不同其退火溫度也會(huì)變化)退火45s，72℃延伸2min，共循環(huán)40次，最后一個(gè)循環(huán)結(jié)束后，72℃延伸7min，4℃保存。
　　 3、利用ISSR技術(shù)對(duì)廣西大青山實(shí)驗(yàn)林場(chǎng)5個(gè)種源區(qū)的紅錐遺傳多樣性進(jìn)行分析。選用了11條ISSR引物，共擴(kuò)增出多態(tài)性位點(diǎn)168個(gè)，多態(tài)位

3、點(diǎn)百分比為100％，不同種源區(qū)的多態(tài)位點(diǎn)百分比在94.64％～99.40％之間。其中博白種源區(qū)的多態(tài)位點(diǎn)百分比最高，高達(dá)99.40％，說明其種源內(nèi)遺傳變異水平是五個(gè)種源區(qū)中最高的，總的Nei's遺傳多樣性指數(shù)為0.3697，總Shannon信息指數(shù)為0.550。各種源區(qū)的遺傳相似系數(shù)在0.9503～0.9754之間，群體間的基因分化系數(shù)為0.0546，根據(jù)UPGMA聚類圖分析表明，憑祥與容縣遺傳距離較近，浦北和博白聚類，東蘭因遺傳距離和

4、地理關(guān)系單獨(dú)聚為一類，這與地理分布大致相符。
　　 4、在分子水平上分析了紅錐群體的遺傳變異與地理地貌變化的關(guān)系，對(duì)32個(gè)家系的紅錐遺傳多樣性記性統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯示紅錐遺傳多樣性在32個(gè)家系之間存在一定的差異。有效基因數(shù)、Nei’s遺傳多樣性指數(shù)、Shannon信息指數(shù)都揭示出32個(gè)紅錐家系遺傳多樣性的豐富性。
　　 5、提出了紅錐優(yōu)良家系的保護(hù)和利用方案，充分了解紅錐在遺傳變異的空間分布格局對(duì)于制定科學(xué)的優(yōu)質(zhì)基因資源保

5、護(hù)和利用策略所具有的重要作用。在對(duì)紅錐遺傳改良工作的過程中，優(yōu)良個(gè)體、優(yōu)良群體和優(yōu)良種源選擇都不容忽視。群體及群體內(nèi)個(gè)體的保護(hù)保存很重要，尤其是特殊生境群體和在分類與遺傳上具有不可替代的獨(dú)特性的群體需重點(diǎn)保護(hù)。如博白群體特異帶所占比例最高，為99.4％，擁有其他群體沒有的基因類型，且博白群體的遺傳多樣性指數(shù)明顯高于其他群體，群體內(nèi)個(gè)體的基因型十分豐富。群體間的遺傳分化指數(shù)Gst為0.0546，即群體間的遺傳變異占總變異的5.46％，群體