基于M-C作圖進(jìn)行牙鲆雌核發(fā)育二倍體的遺傳鑒定與分析.pdf

1、牙鲆是重要海水經(jīng)濟(jì)魚(yú)類。隨著養(yǎng)殖技術(shù)的發(fā)展,牙鲆已經(jīng)成為我國(guó)主要的海水養(yǎng)殖對(duì)象。伴隨牙鲆近親繁殖問(wèn)題進(jìn)行牙鲆遺傳改良研究,培育出具有生長(zhǎng)快、體型大和抗逆性強(qiáng)等優(yōu)良性狀的新品種,將對(duì)我國(guó)牙鲆養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。本文研究主要基于微衛(wèi)星標(biāo)記與著絲粒之間的相對(duì)距離,篩選位于連鎖群不同位置的微衛(wèi)星標(biāo)記進(jìn)行牙鲆有絲分裂雌核發(fā)育二倍體的遺傳鑒定和不同二倍體的比較研究。
　　1.本研究從日本第二代連鎖圖譜選擇均勻分布于牙鲆24個(gè)連鎖群

2、的72個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記,用兩個(gè)正常的全同胞家系來(lái)驗(yàn)證得到,72個(gè)微衛(wèi)星位點(diǎn)均符合孟德?tīng)栠z傳分離測(cè)驗(yàn)。紫外線照射牙鲆精子并通過(guò)冷休克誘導(dǎo)而獲得4個(gè)減數(shù)分裂雌核發(fā)育家系,估計(jì)標(biāo)記-著絲粒(Microsatellite-Centromere,M-C)之間的相對(duì)距離,。在假設(shè)無(wú)交叉干涉的情況下,17個(gè)標(biāo)記位于著絲粒區(qū)域,19個(gè)標(biāo)記位于連鎖群中部,36個(gè)標(biāo)記位于遠(yuǎn)著絲粒區(qū)域。用36個(gè)標(biāo)記來(lái)鑒定有絲分裂雌核發(fā)育二倍體192尾。
　　2.以牙鲆選育

3、基礎(chǔ)群體為親本,選擇性腺發(fā)育良好的個(gè)體制備普通二倍體(ND),減數(shù)分裂雌核發(fā)育二倍體(MGD-1)、連續(xù)兩代減數(shù)分裂雌核發(fā)育二倍體(MGD-2),并利用MGD-1發(fā)育達(dá)性成熟的雌魚(yú)與同時(shí)誘導(dǎo)的性反轉(zhuǎn)偽雄魚(yú)交配制備近交二倍體(MGD-3)。從牙鲆遺傳連鎖圖譜選擇均勻分布于24個(gè)連鎖群的72個(gè)微衛(wèi)星標(biāo)記,在假設(shè)無(wú)交叉干涉的情況下,17個(gè)標(biāo)記位于著絲粒區(qū)域,19個(gè)標(biāo)記位于連鎖群中部,36個(gè)標(biāo)記位于端粒區(qū)域。分別選擇上述區(qū)域的微衛(wèi)星標(biāo)記鑒定牙鲆

4、4種二倍體的遺傳特征。分析結(jié)果顯示,4種二倍體的等位基因數(shù)(A)和多態(tài)信息含量(PIC)在不同區(qū)域變化范圍較小,ND的A和PIC均為最高,MGD-3則表現(xiàn)為最低。隨著標(biāo)記與著絲粒之間距離的增加,4種二倍體的觀測(cè)雜合度逐漸升高,純合度逐漸降低。純合個(gè)體比例在著絲粒區(qū)域最高,為8.8％-29.1%;在端粒區(qū)域最低,為2.4%-23.2%。其中,MGD-1和MGD-2的變化幅度顯著高于其余二倍體。由此證明,選擇連鎖群上不同位置的微衛(wèi)星標(biāo)記對(duì)鑒