廣西靖西壯族端午藥市植物地膽草和毛大丁草的研究.pdf

1、隨著組合化學(xué)在藥物研發(fā)中不足處的呈現(xiàn)以及天然產(chǎn)物分離與鑒定技術(shù)的飛速發(fā)展，天然產(chǎn)物的研究在新藥開(kāi)發(fā)中受到更多的重視，而作為天然產(chǎn)物研發(fā)重要來(lái)源的民間傳統(tǒng)藥用植物及傳統(tǒng)藥用知識(shí)也受到了更多的關(guān)注。我國(guó)豐富的傳統(tǒng)藥用植物資源及上千年積累的民族傳統(tǒng)藥用知識(shí)，為我國(guó)天然產(chǎn)物研究提供了巨大寶庫(kù)。
　　 本研究通過(guò)民族植物學(xué)方法（關(guān)鍵人物訪談、半結(jié)構(gòu)式訪談、參與式農(nóng)村評(píng)估）對(duì)靖西端午藥市的藥用植物進(jìn)行了包括傳統(tǒng)用途、使用方法、使用部位等多方

2、面?zhèn)鹘y(tǒng)知識(shí)的調(diào)查研究;得知兩種菊科植物地膽草(Elephantopusscarber L.)和毛大丁草(Gerbera piloselloides(L.) Cass.)在靖西當(dāng)?shù)貞?yīng)用廣泛，且均有較好的治療效果;同時(shí)毛大丁草除作為藥用植物之外還作為食用植物，這一調(diào)查結(jié)果促使選擇該兩種植物作為實(shí)驗(yàn)室研究材料。我們進(jìn)一步運(yùn)用，植物化學(xué)分離技術(shù)（常壓硅膠色譜法、凝膠色譜法、高速逆流色譜、高效液相色譜等）分離提取兩種藥用植物中的化學(xué)成分，并利用波

3、譜分析技術(shù)(NMR、MS和IR等光譜學(xué)手段)確定化合物結(jié)構(gòu);進(jìn)而利用生物學(xué)活性測(cè)定方法（ABTS抗氧化和細(xì)胞毒性）及計(jì)算機(jī)模擬活性篩選技術(shù)對(duì)部分分離得到的化合物的生物活性進(jìn)行了研究;以期在運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段對(duì)地膽草和毛大丁草驗(yàn)證傳統(tǒng)知識(shí)合理性的同時(shí)，并為傳統(tǒng)知識(shí)的傳承與保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)，同時(shí)也為對(duì)兩種民間藥用植物開(kāi)展深入的研究提供參考及依據(jù)。
　　 本研究運(yùn)用多種色譜技術(shù)（正反相硅膠色譜、凝膠色譜、MCI柱色譜等）對(duì)地膽草全草

4、的石油醚層及乙酸乙酯層提取物進(jìn)行了化學(xué)成分的分離與提取，得到包括δ-truxinate類、倍半萜烯內(nèi)酯類、黃酮類在內(nèi)的8個(gè)單體化合物;進(jìn)一步利用NMR、MS、IR等現(xiàn)代波譜技術(shù)，確定了8個(gè)化合物的結(jié)構(gòu);其中化合物8被確定為新的δ-truxinate類天然產(chǎn)物。運(yùn)用ABTS清除自由基實(shí)驗(yàn)并以維生素E為對(duì)照測(cè)定了部分化合物的抗氧化活性，其結(jié)果顯示:該新化合物具有較強(qiáng)的抗氧化活性(IC50=0.57 mg/mL);其次運(yùn)用MTT法，以去甲斑蝥

5、素(NCTD，10.0 mg/mL)為陽(yáng)性對(duì)照品，測(cè)定了新化合物對(duì)HepG2細(xì)胞的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明該化合物對(duì)HepG2細(xì)胞具有顯著的劑量依賴抑制活性(IC50=24.0 mg/mL)。本研究還運(yùn)用Discovery Studio軟件的反向找靶(TargetFishing)功能、結(jié)合蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)(PDB database)對(duì)化合物8的生物活性進(jìn)行了篩選，結(jié)果表明該化合物具有抗炎、抗菌及抗腫瘤等潛在的生物活性，指明以后對(duì)該化合物的活性篩選

6、應(yīng)圍繞其抗炎、抗菌及抗腫瘤等活性來(lái)進(jìn)行。
　　 本研究運(yùn)用ABTS抗氧化活性引導(dǎo)(Activity-guided)方法，通過(guò)分析比較各提取分離層的抗氧化活性的大小，并結(jié)合大孔樹(shù)脂色譜、凝膠色譜、HPLC等分離技術(shù)分離毛大丁草提取物中的抗氧化活性成分;最終得到包括黃酮類、奎寧酸類及香豆素類在內(nèi)的10個(gè)化合物，運(yùn)用NMR、MS和IR等波譜學(xué)方法確定化合物結(jié)構(gòu)。其中化合物5為首次從植物中分離得到的Parasorbosid類天然產(chǎn)物;同