熱應(yīng)激條件下內(nèi)毒素對肉雞肝損傷的研究.pdf

1、細(xì)菌內(nèi)毒素是革蘭陰性菌細(xì)胞壁的外膜成分，在細(xì)菌死亡或快速生長時(shí)期被釋放出來，內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體后可激活間質(zhì)細(xì)胞和髓樣細(xì)胞，尤其是誘導(dǎo)單核巨嗜細(xì)胞合成和釋放各種細(xì)胞因子、生長因子、趨化因子和炎癥介質(zhì)作用于全身，引起機(jī)體炎癥反應(yīng)、休克、多器官功能衰竭甚至死亡。內(nèi)毒素也能直接作用于內(nèi)皮細(xì)胞、心肌細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等實(shí)質(zhì)細(xì)胞，造成細(xì)胞損傷或凋亡，不同種屬的革蘭陰性細(xì)菌內(nèi)毒素引起機(jī)體的病理變化和臨床癥狀大致相同。內(nèi)毒素穩(wěn)定性強(qiáng)，不容易滅活，所以臨床上因

2、為革蘭陰性菌造成的內(nèi)毒素血癥非常常見，手術(shù)器械、沖洗系統(tǒng)、灌洗液、藥液以及各種介入治療、導(dǎo)管、引流管的置入都可能因?yàn)榧?xì)菌內(nèi)毒素的污染而使動(dòng)物發(fā)生外源性內(nèi)毒素血癥，而各種應(yīng)激、手術(shù)創(chuàng)傷、消化系統(tǒng)疾病會(huì)導(dǎo)致動(dòng)物出現(xiàn)腸源性內(nèi)毒素血癥。臨床上很多醫(yī)師在對動(dòng)物的診療中對內(nèi)毒素造成的危害認(rèn)識不足，例如在革蘭陰性菌感染的治療中，雖然用抗生素殺死了細(xì)菌，動(dòng)物卻產(chǎn)生嚴(yán)重的內(nèi)毒素血癥，對動(dòng)物造成嚴(yán)重的危害。如寵物犬的膿皮病、腹膜炎、子宮蓄膿等病的治療，不僅

3、要控制細(xì)菌感染，也要糾正嚴(yán)重的內(nèi)毒素血癥，否則會(huì)增加寵物死亡的風(fēng)險(xiǎn)，即在動(dòng)物疾病診療中要“菌毒并治”。
　　夏季高溫肉雞常常因?yàn)榧毙詿釕?yīng)激而死亡，而熱應(yīng)激引發(fā)的腸源性內(nèi)毒素血癥是肉雞死亡的重要原因。本試驗(yàn)以AA肉雞為研究對象，建立肉雞熱應(yīng)激內(nèi)毒素血癥模型，通過臨床觀察、組織病理學(xué)檢查、血常規(guī)檢查、鱟試劑檢查法、血液生化和分子生物學(xué)檢查等技術(shù)，檢測熱應(yīng)激條件下肉雞血液內(nèi)毒素的變化、肝臟損傷和內(nèi)毒素受體基因表達(dá)情況，探討熱應(yīng)激條件下肉

4、雞的發(fā)病機(jī)理。
　　隨著熱應(yīng)激時(shí)間的延長，肉雞出現(xiàn)精神沉郁，氣喘，拉稀等現(xiàn)象。病理組織學(xué)顯示，熱應(yīng)激初期小腸絨毛、漿膜、肌層和黏膜下層未見明顯變化，到后期小腸絨毛斷裂、毛細(xì)血管淤血、黏膜上皮細(xì)胞發(fā)生脫落。初期肝細(xì)胞部分細(xì)胞核溶解、肝血竇輕度擴(kuò)張，到后期肝細(xì)胞脂肪變性，肝索排列紊亂，炎性細(xì)胞浸潤，肝臟組織受到損傷，導(dǎo)致肉雞食欲下降，消化不良，體溫升高，機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)。
　　鱟試驗(yàn)法檢測結(jié)果顯示，熱應(yīng)激初期肉雞血液內(nèi)毒素水

5、平即上升;熱應(yīng)激后期，血液內(nèi)毒素水平升至高至對照組的7倍。證明急性熱應(yīng)激下肉雞腸道黏膜受到損傷，腸道內(nèi)毒素進(jìn)入血液循環(huán)而使內(nèi)毒素水平升高，肉雞熱應(yīng)激條件下發(fā)生內(nèi)毒素血癥的理論得到了驗(yàn)證。而VC組對試驗(yàn)組相比差異不顯著。
　　血細(xì)胞鏡檢結(jié)果顯示，熱應(yīng)激內(nèi)毒素血癥初期雞血液紅細(xì)胞數(shù)目略微升高，中后期顯著降低，與對照組相比差異顯著，VC組與試驗(yàn)組紅細(xì)胞數(shù)目在各時(shí)間段相比差異不顯著。血液白細(xì)胞初期顯著降低，而后顯著升高，說明熱應(yīng)激內(nèi)毒素血

6、癥降低了肉雞免疫力，后期肉雞處于應(yīng)激狀態(tài)。VC不能很好的改善肉雞熱應(yīng)激內(nèi)毒素免疫力低下的狀況。
　　血液生化檢測結(jié)果顯示，ALT等主要指標(biāo)持續(xù)升高，與對照組相比差異極顯著，說明肉雞熱應(yīng)激條件下肝臟組織受到損傷，肝臟功能受到影響，同時(shí)說明肉雞血液內(nèi)毒素升高的另一個(gè)原因是肝功能受損后內(nèi)毒素清除機(jī)制被破壞。
　　RT-PCR技術(shù)對肝臟內(nèi)毒素受體檢測結(jié)果顯示，肝臟TLR4受體mRNA表達(dá)在熱應(yīng)激初期即上升，熱應(yīng)激后期表達(dá)量升高為對照

7、組的1.4倍，與對照相比差異顯著。TLR4受體激活后通過NF-κB誘導(dǎo)大量炎癥因子產(chǎn)生，導(dǎo)致全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)、彌散性血管內(nèi)凝血(DIC)、膿毒性休克及多器官功能衰竭(MODF)的發(fā)生，這可能是急性熱應(yīng)激肉雞大量死亡的原因。
　　綜合以上結(jié)果可得出結(jié)論，熱應(yīng)激能導(dǎo)致肉雞腸道損傷，繼而出現(xiàn)內(nèi)毒素血癥，且隨著熱應(yīng)激時(shí)間的延長嚴(yán)重程度加劇;腸源性內(nèi)毒素血癥的發(fā)生導(dǎo)致肝臟TLR4受體mRNA的表達(dá)上調(diào)，內(nèi)毒素誘導(dǎo)產(chǎn)生的炎癥因子